中药消痔方熏洗联合痔疮栓治疗痔疮的疗效观察

痔疮在所有肛肠疾病中占80％ ～85％,各个年龄段均有发生,临床表现为不同程度便血、肛门肿胀、肛门疼痛等,且容易反复发作[1-2].本文采用消痔方熏洗联合痔疮栓治疗痔疮30例,总结如下.     

TAT-E4orf4融合蛋白对胃癌细胞迁移和凋亡的影响

目的 构建融合细胞穿膜肽的腺病毒早期区4第4编码蛋白的pET28-TAT-E4orf4原核表达载体,分析TAT-E4orf4融合蛋白对胃癌AGS细胞凋亡的影响及其作用机制。方法 PCR法构建pET28-his-TAT-E4orf4表达载体,经PCR酶切鉴定后,诱导表达。并分别用pET28、pET28-his-E4orf4和pET28-his-TAT-E4orf4处理胃癌AGs细胞,分别采用MTT法和Transwell小室检测TAT-E4orf4对胃癌细胞增殖和迁移的影响,以流式细胞仪检测刺激后胃癌细胞的凋亡,以Western blot检测Caspases和Src信号轴上关键蛋白的表达变化。结果 PCR和Western blot实验结果证实成功构建pET28-TAT-E4orf4表达载体,MTT法显示pET28-his-E4orf4和pET28-his-TAT-E4orf4刺激后,胃癌AGS细胞增殖活性下降,且后者下降更为明显。与MTT实验结果趋势相似,Transwell实验的结果,pET28-his-TAT-E4orf4刺激后胃癌细胞迁移数目显著减少,与前三组比较,差异具有统计学意义。Western blot实验结果表明,Caspase-3和Caspase-9的表达水平无明显变化,而Src信号通路上的蛋白均出现规律性变化。结论TAT-E4orf4融合蛋白能抑制胃癌细胞增殖和迁移,促进胃癌细胞凋亡,主要依赖于Src信号通路。     

川楝素与γδ T细胞协同抗结直肠癌的作用及机制研究

目的:探讨γδT细胞对结直肠癌细胞的杀伤活性,并研究川楝素对γδT细胞的协同效应。方法:体外培养人γδT细胞并用流式细胞术进行鉴定。乳酸脱氢酶(LDH)释放实验检测γδT细胞和川楝素对人结直肠癌SW480细胞的杀伤活性。Western blot实验检测川楝素对SW480细胞中Bcl-2、Bcl-x L和MCL-1表达水平的影响。ELISA实验检测川楝素是否影响γδT细胞肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)和Fas配体(Fas L)的分泌。流式细胞术检测川楝素和γδT细胞处理后SW480细胞的线粒体膜电位和凋亡情况。Western blot实验检测川楝素和γδT细胞处理后SW480细胞caspase-9和caspase-3的活化。结果:体外培养的γδT细胞高表达CD3和γδT细胞受体(TCR)。川楝素处理能显著增强γδT细胞对SW480的杀伤活性。川楝素不影响γδT细胞TRAIL和Fas L的表达。川楝素不影响SW480细胞中Bcl-2和Bcl-x L的蛋白水平但显著抑制MCL-1的表达。转染MCL-1质粒能显著抑制川楝素对γδT细胞的协同效应。川楝素通过抑制MCL-1的表达促进γδT细胞对SW480细胞线粒体膜电位的损伤和凋亡的诱导。川楝素通过抑制SW480细胞MCL-1的表达促进γδT细胞对SW480细胞caspase-9和caspase-3的活化。结论:川楝素通过抑制MCL-1的表达发挥对γδT细胞的协同抗结直肠癌作用。