乙型丙型肝炎病毒合并感染细胞模型的建立

目的：本文拟利用慢病毒载体,在可感染丙型肝炎病毒（HCV）的Huh7.5.1细胞中过表达人肝细胞乙型肝炎病毒（HBV）受体钠离子牛磺胆酸共转运蛋白（sodium taurocholate cotransporting polypeptide, NTCP）编码基因,建立Huh7.5.1- hNTCP细胞模型,使其可以被HBV、HCV共同感染。方法：使用携带人NTCP编码基因、GFP（green fluorescent protein）基因、嘌呤霉素抗性基因的GV358重组慢病毒载体,以50的感染复数（MOI）感染Huh7.5.1细胞。经过嘌呤霉素筛选获得稳定表达人NTCP基因的Huh7.5.1-hNTCP细胞株,并通过Western-blotting验证NTCP蛋白的表达。使用HepAD38细胞来源的HBV感染Huh7.5.1-hNTCP细胞,通过ELISA及qPCR等方法检测HBV感染后不同时间点HBsAg、HBeAg的表达以及HBV DNA的复制。HBV感染后24小时予以HCV-JFH1感染,检测合并感染状态下HBV DNA以及HCV RNA的复制。结果：Western-blotting 结果表明Huh7.5.1-hNTCP细胞株可稳定表达HBV受体NTCP。HBV感染Huh7.5.1-hNTCP细胞后ELASA、qPCR结果显示：HBsAg、HBeAg、HBV DNA合成逐渐增加,并在第9天达峰。HBV/HCV合并感染Huh7.5.1-hNTCP细胞后,qPCR检测结果显示不同时间点HBV DNA、HCV RNA复制逐渐增加。结论:建立了Huh7.5.1-hNTCP细胞模型,该模型可被HBV/HCV合并感染。     

人EFTUD2基因靶向小分子化合物筛选细胞模型的建立*

目的 体外建立一个以荧光素酶为报告基因,靶向人EFTUD2基因的化合物筛选细胞模型。方法 应用限制性内切酶双酶切LV6载体,将人EFTUD2pro-0.5kb启动子和荧光素酶报告基因的融合片段重组入LV6慢病毒载体。以重组慢病毒感染HepG2细胞,采用嘌呤霉素筛选和有限稀释法获得Epro-LUC-HepG2细胞株。利用荧光素酶报告基因系统挑选最佳单克隆细胞株并扩大培养。结果 准确构建了LV6-Epro0.5-LUC慢病毒载体,并成功筛选出可稳定表达荧光素酶的Epro-LUC-HepG2单克隆细胞株。根据荧光素酶报告基因检测结果,挑选了最佳克隆株细胞,被命名为Epro-LUC-HepG2细胞。结论 我们成功构建了以人EFTUD2基因为靶点的Epro-LUC-HepG2细胞化合物筛选模型,有助于后续筛选新型靶向免疫调节药物。     

静脉用药成品输液集中调配溶媒适宜性探讨

目的探讨选择静脉用药调配适宜性溶媒,规范静脉用药调配技术,提高静脉用药质量。方法复习药品说明书,参考药学专业资料,分析总结出静脉用药调配适宜的注射用溶媒及用量、稀释用静脉输注液及用量、成品输液浓度与用药时限等影响成品输液质量的因素。结果静脉用药集中调配应严格按照药品说明书和药物理化性质,在规定用药时限内,成品输液质量稳定。结论选择静脉用药调配适宜性溶媒,是规范静脉用药调配技术最关键的因素,为提高成品输液质量提供了保证。     

护理干预对神经根型颈椎病患者康复的影响

目的观察护理干预对神经根型颈椎病患者康复的影响。方法将83例神经根型颈椎病患者随机分为对照组40例和护理干预组43例。两组均采用药物和中西医物理康复治疗,护理干预组同时针对患者焦虑、烦躁、抑郁等心理问题及在牵引、针刺时进行个性化护理干预。结果两组治愈率差异有统计学意义（P〈0.01）,显效率差异有统计学意义（P〈0.05）,总有效率比较差异也有统计学意义（P〈0.01）。结论护理干预可以提高神经根型颈椎病康复的治疗效果。     

人EFTUD2启动子的鉴定及初步分析

目的：鉴定并分析EFTUD2（elongation factor Tu GTP?binding domain?containing 2）基因的启动子区域。方法：应用生物信息学技术对EFTUD2基因结构及潜在启动子区域进行分析,预测4个EFTUD2启动子序列。使用全基因合成技术以及高保真PCR扩增得到目的启动子序列,通过BglⅡ和NheⅠ双酶切,将目的条带克隆到双荧光素酶报告基因载体psiCHECK?2中,得到4个长度不同并覆盖EFTUD2基因转录起始位点附近约2 kb的EFTUD2基因启动子双荧光素酶报告基因重组体。荧光素酶分析检测启动子活性。结果：经酶切、测序鉴定,成功构建了人EFTUD2启动子荧光素酶报告基因重组质粒。通过荧光素酶活性检测,重组体EFTUD2?0.5的相对荧光素酶活性增加（P < 0.05）,提示EFTUD2基因核心启动子序列位于转录起始位点附近约500 bp的区域内。结论：EFTUD2基因转录起始位点上游500 bp具有启动子活性,初步判定其核心启动子位于该区域。     

新型布尼亚病毒感染研究进展

<正>新型布尼亚病毒即发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒(sever fever with thrombocytopnia syndrome virus,SFTSV)是近年来被分离鉴定出的新病毒。该病毒感染人体引起的发热伴血小板减少综合征(sever fever with thrombocytopnia syndrome,SFTS)以发热、血小板和白细胞减少为主要临床表现,多数病例有乏力,消化道症状,肌肉酸痛和淋巴结肿大等临床症状。病情危重者可     

迭代重建技术结合低剂量扫描在CT引导肝癌微波消融术中的运用

【摘要】 目的 分析混合迭代重建技术（iDose4）在CT引导微波消融（MWA）治疗肝癌中对图像质量和患者的辐射剂量的影响。方法 随机收集205例CT引导下MWA手术患者,根据重建方式和毫安值的不同分为3组:对照组84例（标准重建+200 mAs）、iDose4组59例（iDose4+200 mAs）和低剂量组62例（iDose4 +140 mAs）,分别记录每例术中进针前、消融前针到位、拔针后3个序列CT图像的客观参数,包括:噪声,用图像的标准差（SD）表示,信噪比（signal to noise ratio,SNR）、 对比噪声比（contrast to noise ratio,CNR）,整体图像质量的主观评价。并记录以上3个序列每例患者的容积CT剂量指数（CT dose index volume,CTDIvol）,总剂量长度乘积（dose-length product,DLP）,总有效辐射剂量（effective dose,ED）。结果 与对照组对比,iDose4组进针前、针到位、拔针后3个序列CT图像SD 显著较低（P＜0.001）,SNR、CNR显著较高（P＜0.001）,主观评价也有优势（P＜0.05）,CTDIvol,DLP,ED差异均无统计学意义（P＞0.05）;低剂量组CTDIvol,DLP,ED有明显较低（P＜0.001）,针到位序列CT图像SD较低（P＜0.05）、SNR、CNR较高（P＜0.05）,主观评价也存在差异（P＜0.05）,其他2个序列CT图像SD、SNR、CNR、主观评价的差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 iDose4的运用能够在不增加患者辐射剂量的情况下,明显提高肝MWA术中CT图像的质量。另外,在结合低毫安扫描时,能大幅降低患者辐射剂量的同时,还能相对提高存在有消融针的CT图像的质量。