赤芝FPS基因酵母单杂交文库构建及其上游转录因子的筛选

目的筛选赤芝三萜合成途径中法尼基焦磷酸合酶(farnesyl diphosphate synthase,FPS)基因的上游调控转录因子。方法首先克隆了FPS基因启动子,并连接至pAbAi质粒构建诱饵载体pAbAi-FPS。将pAbAi-FPS转化Y1H酵母感受态细胞构建诱饵菌。采用SMART技术构建赤芝酵母单杂交cDNA文库,再将纯化的双链cDNA、pGADT7-Rec共转化诱饵菌株,筛选FPS上游的转录调控因子。结果构建了含pAbAi-FPS的诱饵载体并筛选出诱饵菌株,构建了cDNA文库并转化诱饵菌株,筛选出阳性克隆37个,得到作用FPS基因上游的转录调控因子18个,包括转录因子3个、核糖体蛋白5个及其他家族蛋白10个。结论筛选出转录因子GlSNF2、GlMHR和GlZn2Cys6为调控FPS表达的候选基因,为深入研究FPS基因的表达调控机制奠定了研究基础。     

三七片DNA条形码分子鉴定及方法学考察

目的为研究DNA条形码技术在中成药鉴定中的应用,以三七片为研究对象,对方法的适用性、专属性与精密度进行考察。方法收集15批次市售三七片样品,考察三七片DNA提取条件,并对"中药材DNA条形码分子鉴定法指导原则"中PCR扩增、序列获得、结果判定等方法适用性进行确认;收集三七、人参、西洋参,制作三七片及其掺伪品,考察方法的专属性和重现性。结果三七片取样量100 mg,56℃水浴8 h所获得DNA的质量浓度平均值为60.7 ng/μL,PCR扩增、序列获得和结果判定均可获成功;三七、人参和西洋参的ITS2序列长度均为230bp,三七与人参、三七与西洋参的序列间均存在7个稳定的SNP位点,自制三七片和掺伪三七片均可成功获得ITS2序列,不同比例三七与人参、三七与西洋参的测序峰图在SNP位点处呈现相应峰高比的SNP套峰具备专属性;重复性、中间精密度和重现性考察符合《中国药典》2015年版(通则9101)相关要求。结论 ITS2序列作为DNA条形码能够稳定、准确鉴定三七片的原料药材,具备良好的专属性和精密度,三七片DNA条形码分子鉴定法将为保障三七片临床用药安全提供新的技术手段,并对《中国药典》其他收载单方制剂的鉴定提供参考。     

白血病人骨髓间充质干细胞是否是恶性细胞?

本研究探索白血病人的骨髓间充质干细胞是否也具有白血病恶变特征。分别分离培养急性早幼粒细胞白血病(APL)及慢性髓系白血病(CML)患者的骨髓间充质干细胞并与正常对照比较其形态、生长曲线、细胞表面标志及是否带有白血病细胞的恶性克隆性的基因异常标志。结果表明:白血病患者的骨髓间充质干细胞在细胞生物学特征方面与正常健康人无任何明显差异,未发现白血病患者的骨髓间充质干细胞带有白血病细胞的恶性克隆性基因改变。结论:来源于白血病患者的骨髓间充质干细胞并无相应白血病细胞的克隆性异常,提示可能作为自体移植的辅助治疗和细胞治疗或基因治疗的可供选择的细胞载体。     

前列地尔注射液治疗糖尿病肾病的疗效观察

目的观察前列地尔治疗糖尿病肾病的临床疗效及安全性。方法将于我院就诊的60例糖尿病肾病患者随机分为两组,治疗组30例,对照组30例,两组均给予常规的低盐低蛋白糖尿病饮食,降压及降糖治疗。治疗组在此基础上给予前列地尔10ug,加入100mL生理盐水中静脉滴注,每日1次,14d为一疗程。观察两组治疗前后的血肌酐、血尿素氮、24h尿蛋白定量及内生肌酐清除率等生化指标的变化,同时观察其不良反应。结果与治疗前相比,两组治疗后的血肌酐、血尿素氮、24h尿蛋白定量及内生肌酐清除率与治疗前相比有显著性差异(P<0.05),且治疗后治疗组在24h尿蛋白定量及内生肌酐清除率方面与对照组有显著性差异(P<0.05),而治疗后两组在血肌酐及血尿素氮方面差异无显著性差异(P>0.05)。结论前列地尔注射液治疗糖尿病肾病,能减少24h尿蛋白定量,提高内生肌酐清除率,并且无明显的不良反应。     

基于ITS2条形码序列的山豆根基原植物及其混伪品的DNA分子鉴定

山豆根是我国常用中药材,对山豆根基原植物及其易混伪品进行DNA分子鉴定研究具有重要意义。本文对5科9属38个物种84份山豆根基原植物及其混伪品样品的ITS2序列进行序列变异分析、K-2p遗传距离比较及NJ系统发育聚类树构建。结果表明所研究山豆根基原植物样品种内ITS2序列无变异,与其同属密切相关物种的ITS2序列变异位点为102个,平均K-2p遗传距离为0.072,与其他混伪品的ITS2序列变异位点为200个,平均K-2p遗传距离为0.594。山豆根基原植物在NJ系统发育聚类树上聚为一支,支持率为98。因此,ITS2作为DNA条形码序列能够有效的区分山豆根基原植物及其混伪品,为山豆根药材及其混伪品的鉴定提供基础。     

米索前列醇预防产后出血的临床观察

宫缩乏力引起的产后出血仍是导致我国产妇死亡的主要原因之一.为探索一种简单、高效、安全的防治方法,我们采取前瞻性研究方法,观察米索前列醇对预防产后出血的效果,现报道如下.     

中药散瘀止痛酊湿敷在浅静脉化疗病人中的应用

目的探讨中药散瘀止痛酊湿敷在浅静脉化疗病人中湿敷在浅静脉的临床应用效果。方法选择我科需行浅静脉化疗病人60例。随机分成实验组和对照组各30例。实验组采用中药散瘀止痛酊，对照组为传统浅静脉化疗。观察两组病人静脉炎发生率、疼痛、渗漏损伤情况。结果实验组静脉炎发生率明显低于对照组，渗漏损伤率明显低于对照组。结论表明应用散瘀止痛酊效果确切，有效避免护理性疼痛的发生。     

液基薄层细胞学筛查宫颈上皮内瘤变4358例分析

目的探讨液基薄层细胞学筛查对宫颈上皮内瘤变的检出情况。方法对2006年3月至2007年4月在笔者所在医院妇科门诊就诊的患者4358例进行液基薄层细胞学检查。发现异常327例,占7．50％（327／4358）。对327例阴道镜检查及阴道镜下多点活检,以阴道镜下活检为金标准。结果非典型鳞状上皮细胞272例,低度鳞状上皮内瘤变44例,高度鳞状上皮内瘤变10例,不典型腺上皮细胞1例。结论宫颈液基薄层细胞学检查联合阴道镜下多点活检可提高宫颈上皮内瘤变的检出率及准确性。     

血乳酸测定在小儿腹泻并脱水中的应用价值探讨

目的探讨血乳酸测定在小儿腹泻并脱水中的应用价值。方法检测62例腹泻患儿血酸和尿素氮水平,其中无脱水组33例,脱水组29例。结果腹泻并脱水组血乳酸水平均高于无脱水组（P〈0．01）,血尿素氮水平无明显差异（P〉0．05）。结论血乳酸水平可用于腹泻患儿脱水评估,从而有效指导小儿补液,动态检测可用于评估液体疗法的效果。