莱菔硫烷促进神经胶质瘤细胞凋亡的机制探讨

目的探讨莱菔硫烷(SFN)促进神经胶质瘤细胞凋亡的作用机制。方法采用噻唑蓝(MTT)法与流式细胞法检测不同浓度的SFN对神经胶质瘤U251细胞系生长的抑制作用,测定半数抑制浓度,空白对照设为对照组;采用Western blot研究SFN对U251细胞内Cyt-c的表达情况。结果不同浓度SFN组A值均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。不同浓度SFN均对U251细胞生长有一定抑制作用,12.5μmol/l、25μmol/l、50μmol/l、100μmol/l浓度的SFN对U251细胞生长抑制率逐渐增强,各组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。但100μmol/l与200μmol/l浓度的SFN对U251细胞生长抑制率比较无统计学意义(P>0.05)。不同浓度SFN诱导细胞凋亡率及Cyt-c蛋白表达均显著高于对照组,且随着SFN浓度递增,U251细胞凋亡率、Cyt-c蛋白表达逐渐增加,各组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论SFN可能参与神经胶质瘤细胞的凋亡过程,表现为诱导凋亡U251细胞,可能与Cyt-c表达增高存在关系。     

问题导向干预对卵巢癌患者应对方式及心理弹性的影响

目的探讨问题导向干预对卵巢癌患者应对方式及心理弹性的影响。方法选取96例卵巢癌患者,随机分为两组各48例,对照组行常规护理,观察组在对照组基础上行问题导向护理干预,比较两组的应对方式和心理弹性。结果干预后,观察组的面对评分显著高于对照组,屈服和回避评分显著低于对照组,心理弹性各项目评分均显著高于对照组(P<0.05)。结论问题导向干预能有效缓解卵巢癌患者的负面情绪,增加积极应对方式,提升心理弹性,促进患者转归。     

微创方法治疗下尿路结石的临床研究

目的探讨不同微创方法治疗下尿路结石的临床疗效。方法回顾性分析155例下尿路结石患者的临床资料。行膀胱镜大力钳碎石术20例,钬激光碎石术55例、气压弹道碎石术69例,直接钳夹法11例。根据手术时间、出血量、并发症发生率等指标结合临床实际问题进行分析。结果所有病例均一次性治疗成功。碎石时间为10 min~1 h,术后无明显出血和其他并发症。结论微创方法治疗下尿路结石效果良好,但应根据具体情况选择不同的方法才能保证安全可靠、疗效确切,同时,应掌握适应证,预防并发症的发生。     

逆行小腿筋膜皮瓣修复儿童足跟部软组织缺损

目的 探讨小腿筋膜皮瓣对儿童足跟部软组织缺损的修复方法及疗效.方法 对自2010-2013年收治的12例因轮辐条伤致足跟部软组织缺损的患儿,进行小腿筋膜皮瓣逆行转位修复术.结果 本组共12例患儿,皮瓣全部成活,且外观良好,行走无疼痛感,受区无明显臃肿,足部感觉未受影响.结论 采用小腿筋膜皮瓣修复足跟部软组织缺损,其质地良好,术后恢复快,是修复儿童足跟部较大软组织缺损的理想方法.     

足月新生儿不同程度黄疸听性脑干反应特点分析

目的 探讨不同程度黄疸足月新生儿的听性脑干反应（ABR）特点。方法 对2010年7月至2011年4月入住我院新生儿科的黄疸（以间接胆红素增高为主）足月新生儿（除外合并缺氧缺血性脑病、颅内出血、颅内感染,机械辅助通气者）进行ABR检测,分别测定Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ各波的潜伏期（PL）、波间期（IPL）与振幅（AMP）。并根据性别分为男、女婴两组;根据胆红素水平分为3组：轻度组≤250μmol/L,中度组251~299μmol/L,重度组≥300μmol/L。比较不同性别及不同程度黄疸新生儿的ABR特点。结果 共入选足月黄疸新生儿442例,其中男婴筛查异常率46.2%,女婴筛查异常率29.8%,差异有统计学意义（P〈0.01）。男、女婴左耳平均阈值分别为39.6 dBnHL和32.2 dBnHL,右耳平均阈值分别为38.7 dBnHL和34.3 dBnHL,男婴均高于女婴,差异有统计学意义（P〈0.01）。重度组ABR筛查异常率（40.8%）明显高于轻度组（25.0%）,差异有统计学意义（P〈0.001）,重度组与中度组（37.9%）之间、中度组与轻度组之间差异均无统计学意义（P〉0.05）;重度组双耳Ⅰ波潜伏期、Ⅴ波潜伏期和Ⅰ~Ⅴ波间期均较轻度组和中度组延长,差异有统计学意义（P〈0.01）,轻度组与中度组差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 黄疸足月儿中男婴听力损失发生率高于女婴。胆红素影响听力不仅表现在阈值升高,同时还存在波潜伏期及波间期延长、振幅降低。随着黄疸程度加重即胆红素水平的升高,ABR波形潜伏期也逐渐延长,达一定水平后影响中枢听觉神经。     

黄豆苷元杂质谱与其生产工艺的相关性研究

目的:研究黄豆苷元的杂质谱以及与其生产工艺的相关性。方法:通过高效液相色谱[色谱柱为C₁₈柱(250 mm×4.6 mm, 5μm),流动相为水-乙腈(65∶35),检测波长249 nm,流速1.0 mL·min^-1,柱温30℃,进样量20μL,运行时间为主成分保留时间的6倍]对最大未知杂质进行定量检测,结合高效液相色谱-离子肼质谱联用仪(一级、二级质谱)和核磁共振谱仪(氢谱、碳谱)对杂质结构进行确证。通过对生产工艺的分析研究推断杂质来源并提出工艺改进建议。结果:黄豆苷元原料药及制剂的主要杂质为杂质A,在原料药合成工艺中引入,与合成工艺中使用的N,N-二甲基甲酰胺二甲缩醛和乙醇有关。结论:本文主要研究了黄豆苷元杂质谱的液相检测方法,并利用核磁对最大未知杂质结构进行了确证,质谱研究进一步验证了异黄酮类化合物的质谱裂解规律,对生产工艺的提高、质量标准的修订以及黄豆苷元衍生物的合成研究具有重要的意义。     

HPLC法测定奥卡西平及其制剂中有关物质

目的:建立使用C₁₈色谱柱同时测定奥卡西平及其制剂中8个杂质的高效液相色谱法。方法:采用ACE Excel C₁₈(4.6 mm×150 mm, 3μm)色谱柱,流速1.0 mL·min^-1,以6.8 g·L^-1磷酸二氢钾溶液(每1 000 mL加三乙胺2 mL,用磷酸调pH 6.0)为流动相A,乙腈-甲醇(11∶8)为流动相B,梯度洗脱,检测波长240 nm,柱温45℃。结果:奥卡西平与8个杂质分离度良好,奥卡西平和卡马西平分别在0.05～4.0μg·mL^-1和0.08～40μg·mL^-1浓度范围内呈现良好线性(r≥0.999 9),奥卡西平和卡马西平的定量限分别为1.03、0.65 ng,检测限分别为0.34、0.33 ng。共测定奥卡西平原料2个企业5批样品、奥卡西平片2个企业6批样品,其中1批原料检出杂质E,含量为0.004%;3批片剂检出卡马西平,含量分别为0.008%、0.005%、0.006%;1批片剂检出杂质C和杂质D,含量为0.006%、...     

非营养性吸吮与口服葡萄糖对早产儿足跟采血疼痛的影响

目的选择合适的干预方法减轻早产儿足跟釆血疼痛刺激。方法选择30例早产儿,每天1次进行医疗所需足跟釆血,连续4 d,分别在足跟采血前2 min采取安慰奶嘴、口服25%葡萄糖水、安慰奶嘴+25%葡萄糖水、口服灭菌注射用水进行干预,比较足跟采血前后不同时间早产儿疼痛得分、唾液儿茶酚胺和皮质醇浓度。结果非营养性吸吮法、25%葡萄糖水法及两者结合法采血时早产儿疼痛评分显著低于灭菌注射用水法(均P0.05);4种方案下,足跟采血前后不同时间早产儿唾液皮质醇和儿茶酚胺浓度比较,差异无统计学意义(均P0.05)。结论非营养性吸吮、口服25%葡萄糖水或两者结合干预方式均能降低早产儿足跟采血时疼痛得分,但对唾液皮质醇和儿茶酚胺的分泌无显著影响。     

scFv-DEC205-Trap重组包涵体靶向抗原复性及过程的优化北大核心CSCD

目的:疫苗防治将成为金黄色葡萄球菌防控的主要方式,如何解决靶向亚单位疫苗生产中包涵体靶向抗原的复性问题,将是蛋白亚单位疫苗生产的核心问题。方法:构建靶向树突状细胞DEC205受体的金黄色葡萄球菌重组scFv-DEC205-Trap质粒进行PCR、测序鉴定,IPTG诱导表达。对表达后形成的包涵体各项溶解条件:溶液、溶解温度、溶解时间以及是否振荡进行单因素优化;对复性缓冲液的不同添加剂和稀释浓度进行条件优化,最大限度提高包涵体蛋白复性率,Western blot检测复性蛋白抗原性。结果:离心力大于400 g,离心3 min以上,96%的包涵体蛋白沉降;含8 mol/L的尿素溶液在4~40℃溶解0.5 h以上可使包涵体蛋白充分溶解;3 mol/L精氨酸的100 mmol/L Tris-HCl缓冲液稀释5倍复性率最高,抗原性好。结论:实验证明通过适宜的溶解条件和复性条件可以从表达包涵体中获得良好抗原性的重组靶向抗原。     

复方浙贝颗粒药物血清对人结肠癌HCT-116细胞增殖与凋亡的影响

目的 观察复方浙贝颗粒对人结肠癌HCT-116细胞增殖、凋亡的影响及其可能作用机制。方法40只Wistar大鼠随机分为对照组和复方浙贝颗粒高、中、低剂量组,每组10只。复方浙贝颗粒高、中、低剂量组分别按8、4、2 g/(kg·d)灌胃,对照组给予0.1 ml/10 g生理盐水灌胃,连续7天。于末次灌胃后1 h制备各组药物血清。采用MTT法检测各组血清对人结肠癌HCT-116细胞抑制率,经流式细胞仪定量检测各组血清诱导HCT-116细胞凋亡率,Western blot方法检测各组血清对HCT-116细胞双微体-2(MDM2)、p53、p21蛋白表达的影响。结果 复方浙贝颗粒高、中、低剂量组对HCT-116细胞增殖抑制率分别为40.00%、42.37%和29.15%,凋亡率分别为18.75%、20.00%、15.32%,均高于对照组(P<0.05)。48 h时复方浙贝颗粒高剂量组HCT-116细胞MDM2、p53、p21蛋白,复方浙贝颗粒中剂量组MDM2蛋白,复方浙贝颗粒低剂量组MDM2、p53蛋白表达均较对照组升高(P<0.01);96 h时复方浙贝颗粒各剂量组MDM2蛋白表达较本组48 h明显降低,p53蛋白表达较本组48 h明显升高(P<0.01)。结论 复方浙贝颗粒能抑制人结肠癌HCT-116细胞增殖、促进凋亡,其作用机制可能与调节增加MDM2-p53信号通路有关。