腹腔镜胆囊切除术＋胆总管切开取石一期缝合术治疗胆囊结石合并胆总管结石的预后评价

目的:评价腹腔镜胆囊切除术联合胆总管切开取石一期缝合术治疗胆囊结石合并胆总管结石的预后效果。方法:选取2017年1月～2018年6月收治的84例胆囊结石合并胆总管结石患者,按术式的不同分为A组和B组,各42例。A组采用腹腔镜胆囊切除术联合胆总管切开取石一期缝合术,B组采用内镜下逆行胆胰管造影胆总管取石术联合腹腔镜胆囊切除术,比较两组手术效果。结果:两组结石取净率及术后30 d内并发症发生率相比较,无显著差异(P>0.05);A组手术时间、术后肛门排气时间及住院时间均短于B组,术中出血量少于B组,差异显著(P<0.05);A组术后复发率为2.38%,低于B组的16.67%,差异显著(P<0.05)。结论:腹腔镜胆囊切除术联合胆总管切开取石一期缝合术治疗胆囊结石合并胆总管结石近期效果显著,并发症发生率及复发率更低。     

慢病毒载体携带siRNAs对乙型肝炎病毒抑制作用的体内研究

目的:建立小鼠急性乙型肝炎病毒感染动物模型,在此基础上观察慢病毒载体携带小干扰RNA (small interferingRNAs,siRNAs)对乙型肝炎病毒(HBV)复制和表达的影响.方法:36只Balb/c小鼠随机等分为3组(n=12):①空白对照组(NC组):通过尾静脉注射pTHBV2(包含HBV全基因组真核表达质粒).建立小鼠急性HBV感染模型;②干扰组(E组):将pTHBV2与pWPT-HBV-siRNA1(携带靶向HBV S区的siRNA1的慢病毒)通过尾静脉共注射小鼠;③无关干扰组(I组):pTHBV2和pWPT-HBV-siRNA2(携带非靶向HBV的无关siRNA2的慢病毒)通过尾静脉共注射小鼠.于注射后第4大和第7天取小鼠血清和肝脏组织.采用ELISA法检测血清中HBsAg(HBV表面抗原);选择逆转录聚合酶链反应方法(RT-PCR)检测肝组织HBVS-mRNA水平;用免疫组织化学法检测肝组织HBcAg(HBV核心抗原)和HBsAg.结果:与NC组比较,E组小鼠血清中HBsAg水平在第4和第7天分别下降89.76%和94.81%(P<0.01);RT-PCR结果提示E组肝组织HBV S-mRNA水平明显降低(P<0.05);免疫组织化学法检测结果显示示E组肝组织HBcAg、HBsAg阳性细胞数明显减少(P<0.05).I组与NC组比较,上述检测指标无统计学差异(P>0.05).结论:慢病毒载体携带siRNAs能够显著抑制小鼠体内HBV的复制和表达,并儿抑制作用在第7天较第4天更强.没有减弱的趋势.     

腹腔镜脾切除治疗门脉高压脾功能亢进患者术后血栓相关并发症分析

目的探讨腹腔镜脾切除(LS)治疗门脉高压脾功能亢进患者术后血栓相关并发症发生情况。方法选取2015-02—2016-02间接受脾切除术的66例门脉高压脾功能亢进患者,依据手术方式不同分为2组,每组33例。A组行腹腔镜手术,B组行开腹手术。比较2组手术时间、切口长度、术中出血量、血小板计数(PLT)、PLT变化率及术后血栓相关并发症。结果 A组手术时间、术中出血量明显多于B组,手术切口长度明显短于B组(P0.05);2组术后PLT均较术前明显升高,但组间差异均无统计学意义(P0.05);A组PLT变化率、门脉系统血栓总出现率明显高于B组(P0.05)。结论相对于开腹术,LS术后患者更易产生门脉系统血栓,LS术暂时无法完全替代开腹术治疗门脉高压性脾功能亢进。     

激光腔内闭合术联合高位结扎治疗下肢静脉曲张的临床效果

目的:分析激光腔内闭合术联合高位结扎治疗下肢静脉曲张的临床疗效。方法:将2012年3月～2017年5月我院收治的94例下肢静脉曲张患者随机分为对照组和观察组,每组47例,对照组采用大隐静脉高位结扎剥脱术治疗,观察组采用激光腔内闭合术联合大隐静脉高位结扎治疗,比较两组的治疗情况和术后并发症。结果:观察组的切口长度和术中出血量均明显少于对照组,差异均有统计学意义,P0.05;治疗后,观察组的VCSS评分明显低于对照组,差异有统计学意义,P0.05;观察组的术后并发症发生率为4.26%,明显低于对照组的17.02%,差异有统计学意义,P0.05。结论:采用激光腔内闭合术联合高位结扎治疗下肢静脉曲张患者,可缩短切口长度,减少术中出血量,降低并发症风险,明显改善患者病情。     

慢病毒载体介导的针对端粒酶的RNA干扰技术对HepG2细胞的体外效应

目的 观察针对hTERT的siRNA对肝癌HepG2细胞的体外抑制效应.方法 将逆转录表达载体中的针对hTERT的siRNA序列亚克隆至慢病毒表达载体pWPT-GFP中,经293T细胞包装,收集病毒上清,感染肝癌细胞株HepG2.采用半定量RT-PCR法、TRAP法及MTT法,分别检测hTERT基因表达、端粒酶活性、肿瘤细胞生长抑制情况等.结果 限制性内切酶酶切分析表明成功构建了靶向人端粒酶逆转录酶的干扰RNA的慢病毒表达载体;以293T包装的重组慢病毒能够高效感染肝癌细胞,感染效率可达99%以上;在稳定表达pWPT-hTERT-siRNA的肝癌细胞中,hTERT mRNA表达水平、肿瘤细胞的体外增殖受到抑制.结论 慢病毒介导的siRNA转染能明显抑制恶性肝癌细胞的生长.     

慢病毒载体介导端粒酶逆转录酶小干扰RNA治疗肝癌的实验研究

目的 探讨慢病毒介导的端粒酶逆转录酶(hTERT)小干扰RNA(siRNA)对肝癌细胞生长的影响.方法 构建携带hTERT siRNA的慢病毒表达载体,在体外转染人肝癌HepG2细胞系,以MTT法测定细胞生长变化,半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测hTERT mRNA的表达.将转染hTERT siRNA的HepG2细胞,接种于裸鼠腋窝皮下,观察移植瘤生长情况.取移植瘤组织,常规HE染色,行组织学观察,应用原位末端标记(TUNEL)技术检测细胞凋亡情况.结果 hTERT siRNA转染HepG2细胞后,随着时间的延长,对细胞增殖的抑制作用逐渐增强,到第8天,干扰组细胞抑制率为57.5%,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01).RT-PCR产物凝胶电泳图显示,hTERT siRNA转染后,肿瘤细胞的端粒酶活性明显下降.转染后72 h,干扰组hTERT mRNA的表达水平为0.035±0.007,明显低于空载体对照组(0.151±0.016)和空白对照组(0.155±0.014,均P<0.01).转染细胞皮下接种后,干扰组的肿瘤生长速度明显慢于两个对照组,随着时间的延长,差异越来越明显.移植瘤组织常规HE染色显示,组织坏死增多,周围炎性细胞浸润.TUNEL检测结果显示,细胞凋亡增多,增殖减慢.结论 慢病毒介导的hTERT siRNA转染能明显抑制肝癌细胞的生长.     

十二指肠损伤的早期诊断和手术治疗体会(附24例报道)

目的对十二指肠损伤的早期诊断和合理手术方式进行探讨。方法收集我院2003年2月至2010年5月收治的24名十二指肠损伤患者的临床资料,进行回顾分析。结果 24例患者均早期行外科手术治疗,1例患者于术后第3天因多器官功能衰竭死亡,1例患者术后发生十二指肠瘘,经保守治疗后痊愈。对存活的23例患者术后随访2～7个月(平均4.5个月),其中1例出现不全性肠梗阻,1例出现肠间脓肿,此2例患者经保守治疗后痊愈。结论早期诊断必要时尽早探查并选择合理的手术方式是十二指肠损伤患者预后的关键。     

腹腔镜联合胆道镜保胆取石术治疗胆囊结石的疗效分析

目的评价腹腔镜联合胆道镜保胆取石术治疗胆囊结石的临床疗效。方法选取2012年12月～2017年1月在我院接受治疗的86例胆囊结石患者作为研究对象,按不同术式分为对照组和观察组各43例。对照组采取腹腔镜胆囊切除术,观察组采取腹腔镜联合胆道镜保胆取石术。比较两组手术指标及术后恢复指标。结果观察组手术时间长于对照组,差异有统计学意义(P0.05);两组术后出血量、肛门排气时间、胃肠蠕动时间、住院时间比较,差异无统计学意义(P0.05);观察组术后并发症发生率、术后结石复发率平均低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论腹腔镜联合胆道镜保胆取石术治疗胆囊结石,安全性高,恢复快,值得推广。     

针对人IKKα、IKKβ基因RNA干扰慢病毒质粒的构建及其对人肝癌细胞生长的影响

目的 构建人IKKα、IKKβ基因RNA干扰慢病毒质粒.并观察其对肝癌细胞生长的影响.方法 将目的 片段亚克隆入慢病毒载体中,包装成病毒后感染人肝癌细胞,检测细胞IKKα、IKKβ的表达,并将感染细胞接种于裸鼠皮下,观察肿瘤生长情况.结果 目的 片段被成功克隆入载体质粒.pLenti-GFP-IKKα-SiRNA慢病毒液感染的细胞中IKKα蛋白表达明显降低,pLenti-GFP-IKKβ-SiRNA慢病毒液感染的细胞中IKKα蛋白表达明显降低.实验组裸鼠皮下肿瘤出现晚且生长缓慢.结论 成功构建了针对人IKKα、IKKβ基因RNA干扰慢病毒质粒,包装成病毒后感染人肝癌细胞后能抑制其生长.