蛋白质分子空间结构的预测

蛋白质分子的空间结构,即蛋白质的三维构象或称高级结构,指的是蛋白质分子中原子和基团在三维空间上的排列、分布及肽链的走向。各种蛋白质分子都有其独特的三维空间结构。这种精确的结构对不同分子间的识别和决定它们如何发生作用是必需的。因此,空间结构的知识对于理解蛋白质分子的生物学功能是极端重要的。实验资料表明,决定蛋白质分子空间结构的全部信息存在于它们的线性氨基酸序列中。因此,从理论上看来,可以仅从序列的知识预测蛋白质的空间结构。至今,测定蛋白质分子空间结构的实验方法有X线衍射分析、圆二色性谱研     

全血γ-干扰素释放试验对活动性结核病的辅助诊断价值

目的研究全血γ-干扰素(interferon gamma,IFN-γ)释放试验对活动性结核病的辅助诊断价值。方法应用化学发光酶免疫分析法分别检测124例结核病患者、60例非结核肺部疾病患者、33名健康对照者全血中IFN-γ水平;绘制受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC曲线)确定其诊断活动性结核病的临界值,并评价其对活动性结核病的诊断效能。结果活动性结核病患者组结核特异性IFN-γ的水平为405±306pg/mL,显著高于非结核肺部疾病组(111±127pg/mL,P0.001)和健康对照组(52.20±28.28pg/mL,P0.001)。而健康对照组与非结核肺部疾病组差异无统计学意义(P0.05)。结核特异性IFN-γ诊断结核病的临界值为143pg/mL,其灵敏度和特异性分别为86.3%和77.8%。结论全血γ-干扰素释放试验可能成为活动性结核病辅助诊断指标之一。     

几种心房肽三维构象的预测和分析

本文用chou-Fasman蛋白质二级结构预测规则,预测了近年来发现的一组新肽—心房肽四种分子的二级结构。并讨论了这些肽的三级结构和其构象与功能的关系。     

结核分枝杆菌重组Ag85A、Ag85B蛋白免疫原性的研究

目的研究结核分枝杆菌重组Ag85A（rAg85A）和/或Ag85B（rAg85B）蛋白与母牛分枝杆菌菌苗（Mycobacteri-um vaccae,MV）联合免疫的免疫原性。方法 60只雌性BALB/c小鼠随机分为下列6组：（1）阴性对照组：磷酸盐缓冲液（PBS）组,（2）阳性对照组：卡介苗（BCG）组,（3）阳性对照组：MV组,（4）实验组：rAg85A-MV组,（5）实验组：rAg85B-MV组及（6）实验组：rAg85A-rAg85B-MV组。每2周免疫1次,共免疫3次。末次免疫结束后第14天杀鼠,用ELISA法检测血清中IgGI、gG1和IgG2a水平;ELISPOT检测脾脏分泌γ干扰素（IFN-γ）的T淋巴细胞斑点数;流式细胞术检测全血单个核细胞内Th1和Th2百分比。结果三个实验组小鼠血清抗体水平均明显高于三个对照组（P〈0.001）;三个实验组和两个阳性对照组小鼠的T淋巴细胞斑点数均明显高于阴性对照组（P〈0.05）;rAg85A-rAg85B-MV组小鼠Th1百分比明显高于其余五组（P〈0.001）,三个实验组Th1/Th2比值均明显高于三个对照组（P〈0.05）。结论结核分枝杆菌rAg85A和rAg85B蛋白均具有很强的免疫原性,与MV联合免疫可增强其Th1型细胞免疫应答。     

人胰岛素受体空间结构的推测和结构与功能关系的探讨

本文用Chou-Fasman方法推算了人胰岛素受体(HIR)的二级结构,对HIR的三、四级结构进行了一些讨论,还探讨了HIR和胰岛素空间结构的关系。     

实习生实践活动的设计和引导

帮助确立医学生生产实习所要达到的目标，根据目标进行实习生实践活动的设计和引导，让学生参与到整个设计中来，并参与到最后的评估中。     

呼吸道合胞病毒F蛋白基因片段真核细胞表达纯化及其ELISA建立的研究

目的表达纯化人呼吸道合胞病毒(HRSV)F蛋白基因片段,建立间接夹心酶联免疫吸附分析法(ELISA),为进一步大量表达F基因、构建基因工程疫苗和快速临床检测奠定基础。方法逆转录并扩增F基因中的F1片段,连接到载体中,转染真核细胞,诱导并纯化重组F蛋白。将纯化重组F蛋白免疫小鼠制备抗体血清,并建立间接夹心ELISA。通过100份标本应用"金标法"对所建立的方法进行验证。结果成功获得F基因中F1片段的扩增产物,筛选阳性克隆,得到相对分子质量为45000的大量表达蛋白。确定了间接夹心ELISA的最佳反应条件和工作浓度;鼠抗F1IgG最佳质量浓度为3.2μg/mL,样品最佳反应时间为37℃70 min,酶标兔抗鼠IgG最佳工作浓度为1∶6 000。与"金标法"对比,阳性样品的变异系数为3.2%～8.6%,阴性样品的变异系数为5.1%～8.3%,均小于10.0%,表明该方法有良好的重复性。结论构建的重组真核细胞能够大量表达F蛋白,纯化的F蛋白具有很好的免疫原性,制备的抗体血清用于ELISA能够得到准确的检测结果。     

蛋白芯片联合检测多种结核抗体在结核病诊断中的应用价值

目的设计并建立一种基于结核分支杆菌表面抗原表位的蛋白芯片检测方法,用来进行临床分离样本的检测,探讨其在临床诊断中的应用价值。方法利用生物信息学方法,分析结核分枝杆菌抗原Ag85A,38 kD,CFP10,MPT51,16 kD,TB10.4和ESAT-6的表位,并克隆表达这些优势肽段,用于制备多靶点的蛋白芯片;使用该芯片对300株临床分析样本进行检测,与商品化蛋白芯片结果进行比较,分析其敏感性与特异性。结果在200例临床确诊结核病人中,商品化芯片检测敏感性为35.5%。而本文建立的蛋白芯片检测敏感性为98.5%;在100例临床检测非结核病人中,商品化芯片特异性92%,而本文建立的蛋白芯片特异性97%。结论基于优势表位的蛋白芯片敏感性及特异性均显著高于商品化试剂盒,具有较高的临床诊断价值,可提高检测阳性率。