常规MRI特征在弥漫性星形细胞瘤IDH基因突变预测中的临床价值

目的：分析常规MRI特征在弥漫性星形细胞瘤异柠檬酸脱氢酶（isocitrate dehydrogenase，IDH）基因突变预测中的临床应用价值。方法：回顾性分析经手术病理证实的85例弥漫性星形细胞瘤患者（58例IDH突变型，27例IDH野生型）的临床及术前常规MRI图像资料。由2名中枢神经影像医师独立依据伦勃朗视觉感受图像（visually accessible Rembrandt images，VASARI）特征集的标准进行影像学特征的定量分析。运用Kappa检验评价2名医生对影像学特征评分结果的一致性。应用Mann?Whitney U检验、卡方检验或Fisher精确检验评价IDH突变型组与野生型组影像学特征的统计学差异。运用Logistic回归分析及受试者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲线分析评价影像学特征对于预测弥漫性星形细胞瘤IDH突变的诊断效能。结果：2名中枢神经影像医师VASARI特征评分的一致性较好（Kappa值：0.737~0.960）。年龄、肿瘤定位、脑室受累、深部脑白质受累、跨中线、T2/FLAIR不匹配征对于弥漫性星形细胞瘤IDH基因突变的预测具有统计学意义（P < 0.05）。其中年龄、肿瘤定位、T2/FLAIR不匹配征为独立预测危险因素，ROC曲线下面积（area under curve，AUC）分别为0.779、0.705和0.840；联合三者对预测弥漫性星形细胞瘤IDH基因突变的诊断效能最高，AUC为0.927。结论：术前常规MRI特征有助于非侵入性地预测弥漫性星形细胞瘤IDH基因突变。     

长链非编码RNA HOTAIR促进胶质瘤细胞侵袭

目的探讨长链非编码RNA HOTAIR对人脑胶质瘤细胞侵袭的促进作用。方法采用HOTAIR-siRNA寡聚核苷酸转染胶质瘤U87和U251细胞系,通过实时荧光定量PCR技术检测HOTAIR在胶质瘤细胞中的表达水平。利用Western blot验证上皮间质化相关通路蛋白(Snail、Stat3和β-catenin)、标记蛋白(E-cadherin、CDH13和Vimentin)和侵袭迁移相关基质金属蛋白酶(MMP2、MMP9)的表达变化。采用Transwell实验,观察敲低HOTAIR后其对胶质瘤细胞侵袭的影响。结果下调HOTAIR表达后,U87和U251细胞的上皮间质化相关信号通路蛋白降低,E-cadherin和CDH13升高,Vimentin降低,MMP2和MMP9表达下降,细胞侵袭能力减弱(P<0.01)。结论 HOTAIR通过诱导上皮间质化促进了胶质细胞侵袭能力。     

经鼻蝶神经内镜和显微镜垂体瘤切除术的疗效对比分析

目的对比神经内镜下经鼻蝶切除术和显微镜切除术对垂体瘤的临床疗效差异。方法选取本院2016年8月～2018年4月期间71例垂体瘤患者为研究对象,其中40例患者行经鼻蝶神经内镜垂体瘤切除术,31例行显微镜垂体瘤切除术。患者术后通过影像学和内分泌检查评价手术切除率,观察术后患者激素水平变化和视觉恢复情况,统计两组术式术后并发症情况。结果内镜手术组中38例(95%)患者肿瘤被完全切除,2例(5%)患者肿瘤次全切除,显微镜组中23 (74. 19%)例患者肿瘤完全切除,8例(25. 81%)患者肿瘤次全切除,内镜组肿瘤全切率相比于显微镜组较高,差别有统计学意义(P 0. 05)。术后患者泌乳素(PRL)和促肾上腺皮质激素(ACTH)水平内镜组相较于显微镜组降低显著,差别有统计学意义(P 0. 05),生长激素(GH)水平两组无统计学差异(P 0. 05)。术后1周患者加权视野指数(VFI)较术前升高,视野平均缺损(MD)、模式标准差(PSD)降低,内镜组视觉改善效果优于显微镜组,差别有统计学意义(P 0. 05)。内镜组术后并发症发生率相比于显微镜组较低,差别有统计学意义(P 0. 05)。结论相比于传统显微镜切除术,经鼻蝶神经内镜垂体瘤切除术能够达到较高全切率,在改善多项激素水平和视觉障碍方面有明显优势,同时术后并发症发生率较低,安全性高,值得作为主流手术方式推广应用。     

神经上皮组织起源的脑肿瘤中连接蛋白的表达

目的　探讨连接蛋白 (Cx) 43、3 2在神经上皮组织起源的脑肿瘤中表达及其与肿瘤的病理类型、恶性程度的关系。方法　利用Cx43、Cx3 2和Ki 67单抗或多抗对 8例正常脑组织、5 0例神经上皮组织起源的脑肿瘤和 4个恶性脑瘤体外细胞系进行免疫组化检测。结果　神经上皮组织起源的脑肿瘤中Cx表达阳性率为 5 4% ,Cx3 2仅在低恶度少枝胶质细胞瘤中表达 ,Cx43表达随WHO分级升高而下降 ;与Ki 67标记指数 (LI)呈负相关。表达缺失多见于高Ki 67LI者。结论　神经上皮组织起源的脑肿瘤中CX 表达可下降或缺失 ,Cx43表达与肿瘤的病理类型及恶性程度密切相关     

天津市军团菌病二例

自1976年美国费城爆发流行军团菌病并于1977年 Frases 等首次描述了军团菌病以来,至今已有30多个国家发现有军团菌病的存在。该病是由嗜肺军团菌引起,属需氧革兰氏阴性杆菌,该属已有43     

转染HSV-TK的内皮祖细胞的靶向血管新生治疗胶质瘤体内外实验

目的 探讨转染单纯疱疹病毒胸苷激酶(herpes simplex virus thymidine kinase,HSV-TK)的内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)靶向血管新生及对胶质瘤的治疗作用.方法 将转染HSV-TK的EPCs和脐静脉内皮细胞、U87与U251胶质瘤细胞,以不同比例混合,经更昔洛韦(ganciclovir,GCV)作用,观察其旁观者效应.将转染HSV-TK的EPCs经尾静脉注入裸鼠皮下胶质瘤模型,观察各组肿瘤体积的变化,免疫组化检测各组中血管情况.结果 转染HSV-TK的EPCs对内皮细胞与胶质瘤细胞的旁观者效应,呈现时间依赖性与细胞比例依赖性.静脉注射转染后的EPCs,对裸鼠皮下胶质瘤生长具有明显抑制作用,并抑制血管生成.结论 转染HSV-TK的EPCs可能通过靶向血管新生来抑制胶质瘤生长.     

胶质瘤C6肿瘤干细胞蛋白质组学初步分析

目的: 运用蛋白质组学的方法,对C6脑肿瘤干细胞(BTSC)和非BTSC细胞进行配对研究,建立差异性蛋白文库,为探讨胶质瘤病因提供初步线索.方法: 在C6细胞中,参照神经干细胞(NSC)培养条件进行培养.出现典型的神经球后,利用免疫荧光染色检测细胞标记,包括nestin,神经元特异性烯醇化酶(NSE),神经胶质细胞纤维酸性蛋白(GFAP)等,以及诱导分化等方法,鉴定神经球细胞是否为BTSC.收集神经球和非神经球细胞,进行配对,利用双向凝胶电泳(2D-PAGE)检测细胞总体蛋白,分析差异性蛋白点.结果: C6细胞在NSC培养条件下,出现比较典型的神经球.神经球细胞nestin阳性,NSE和GFAP阴性.经诱导发生分化,分化后细胞形态与C6相似,能够表达NSE和GFAP等多种表型细胞标记,证实这种神经球细胞为肿瘤干细胞.在2D-PAGE结果中,C6肿瘤干细胞和非干细胞配对比较,有统计学差异(P＜0.05)的蛋白点共有84个,大于2倍差异蛋白点有50个,大于3倍的有17个,大于4倍的有6个,最大差异倍数为11.607 2.在BTSC中,有55个差异蛋白表达增多(上调),29个蛋白表达下降(下调).结论: 胶质瘤C6细胞系中存在肿瘤干细胞,在蛋白质组学方面与非BTSC细胞有明显差异.     

FOS蛋白在胶质瘤中的表达及其对胶质瘤细胞生长的影响

目的 探讨FOS蛋白在胶质瘤中的表达及其对胶质瘤细胞生长的影响.方法 用免疫组化染色法检测FOS蛋白在各级别胶质瘤组织中的表达水平.应用RNA干扰技术降低FOS表达后,应用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法和流式细胞技术检测胶质瘤细胞的增殖和周期的改变;应用Transwell实验检测胶质瘤细胞侵袭能力的改变;采用Western印迹法检测FOS下游功能蛋白的变化.结果 胶质瘤组织中FOS的表达随着级别的增高而增高;抑制FOS的表达后,U87和U251细胞生长受抑制,细胞生长阻滞在G1期且细胞侵袭能力下降,下游的功能蛋白CyclinD1和MMP9表达水平降低.结论 FOS在胶质瘤中高表达;抑制其表达可以下调功能蛋白CyclinD1和MMP9的表达,进而调控细胞的生长和侵袭能力.     

靶向miR-221 siRNA表达载体的构建及有效靶序列的筛选和表达

目的 构建靶向miR-221的siRNA表达载体,同时筛选出一条抑制效率最好的靶序列,为研究RNAi在哺乳动物细胞内抑制靶基因表达奠定基础.方法 根据siRNA靶点设计的原则运用相关软件设计靶序列并合成其表达框,连接入siRNA表达质粒pGCSIL-GFP,同时构建miR-221表达载体pEGFP-miR-221,共同转染293T细胞,Western blot检测转染后293T细胞中Flag蛋白表达,间接反映各靶序列抑制效率,最后将筛选出的抑制效率最好的质粒转染U87胶质瘤细胞,应用细胞增殖曲线及流式细胞仪检测其对U87细胞生长的影响.结果 重组质粒经测序鉴定证明各转录模板完整、正确插入到相应质粒中,并筛选出1号靶序列对miR-221抑制率最高,该组Flag蛋白的表达量仅为对照组的34.3%,同时该序列能有效抑制U87胶质瘤细胞的生长并诱导细胞凋亡,凋亡率达21.89%.结论 成功构建了靶向miR-221的siRNA 表达载体,并筛选出一个抑制效率最好的序列,在体外实验中该序列能有效抑制U87细胞的生长.     

人脑胶质瘤中连接蛋白基因表达及其临床意义

目的探讨人脑胶质瘤连接蛋白(Cx)43、32基因表达及其临床意义。方法对8例正常脑组织和50例人脑胶质瘤采用Northern印迹和免疫组织化学法检测。结果人脑胶质瘤Cx43mRNA及其蛋白表达阳性率分别为54％、52％，Cx32仅在1例低恶度少枝胶质细胞瘤及1例混合性星形一少枝胶质细胞瘤中表达。Cx43mRNA及其蛋白表达水平随肿瘤恶性程度升高而下降。结论Cx基因在人脑胶质瘤中表达可下降或缺失，与肿瘤的病理类型及恶性程度呈负相关，可作为某些肿瘤的病理诊断参考指标之一。