miR-28-5p靶向Nrf2调控LPS诱导的急性肺损伤机制研究

目的 探究miR-28-5p在LPS诱导的急性肺损伤（acute lung injury,ALI）进程中的功能和分子机制。方法 利用脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）诱导小鼠急性肺损伤3h,6h,12h,取肺组织进行荧光定量PCR（real-time quantitative PCR,RT-PCR）检测miR-28-5p表达;同时体外利用LPS刺激小鼠巨噬细胞RAW264.7发生炎症反应,RT-PCR检测细胞中miR-28-5p表达;巨噬细胞中过表达miR-28-5p mimic后利用LPS刺激,RT-PCR检测巨噬细胞炎症因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）表达情况;RT-PCR和蛋白免疫印迹（western blotting,WB）检测抗氧化关键分子核因子E2相关因子2（Nrf2）、血红素加氧酶（HO-1）、醌氧化还原酶（NQO1）表达水平;Targetscan 7.0预测miR-28-5p靶向基因,突变结合位点后,并通过荧光素酶报告基因系统检测miR-28-5p对靶基因的转录调控作用。结果 LPS诱导小鼠ALI 3h,6h,12h,肺组织中miR-28-5p的表达水平明显升高（***P＜0.001）;LPS刺激巨噬细胞炎症反应时,细胞内miR-28-5p的表达水平也明显升高（***P＜0.001）;巨噬细胞中过表达miR-28-5p mimic后,炎症因子TNF-α（###P＜ 0.001）和IL-1β（&&&P＜0.001）表达水平明显升高;同时抗氧化关键分子Nrf2（###P＜ 0.001）及其下游HO-1（&&&P＜0.001）、NQO1（$$P＜0.01）表达的明显降低;Targetscan 7.0预测发现miR-28-5p靶向Nrf2基因3'' UTR序列,荧光素酶报告基因实验进一步明确miR-28-5p通过靶向 基因3'' UTR序列调控其转录。结论 miR-28-5p在LPS诱导的ALI中表达上调,并进一步加剧ALI病理进程,其作用机制可能是通过靶向巨噬细胞Nrf2,从而减弱胞内抗氧化能力,促进炎症因子分泌和巨噬细胞的活化。     

绍兴地区非结核分枝杆菌肺病流行病学及临床特征分析

目的探讨绍兴地区非结核分枝杆菌肺病（NTMPD）流行病学及临床特征。方法选取绍兴文理学院附属医院2018年1月至2019年12月NTMPD患者121例（NTMPD组）和肺结核患者209例（肺结核组）,收集并分析两组患者的人口学资料、吸烟史、既往病史、临床症状、影像学检查结果。结果121例NTMPD患者中,共检出9种非结核分枝杆菌（NTM）菌种,分别为：胞内分枝杆菌66.9%,鸟分枝杆菌12.4%,堪萨斯分枝杆菌5.8%,龟脓肿分枝杆菌5.0%,淡黄分枝杆菌4.1%,草分枝杆菌2.5%,偶然分枝杆菌1.7%,戈登分枝杆菌0.8%,不产色分枝杆菌0.8%。胞内分枝杆菌与鸟分枝杆菌NTMPD患者在居住地分布上差异有统计学意义（P＜0.05）,NTMPD患者的临床症状比较差异均无统计学意义（均P＞0.05）,影像学表现中仅胸膜增厚在胞内分枝杆菌种占比高于鸟分枝杆菌（P＜0.05）。NTMPD组与肺结核病组比较,女性、40岁以上人群、城市、户籍、有慢性阻塞性肺疾病和肺结核病史、影像学表现支气管扩张占比明显较高,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。NTMPD组慢性阻塞性肺疾病和肺结核病史占比高于肺结核组（P＜0.05）,支气管扩张占比高于肺结核组（P＜0.01）。结论绍兴地区NTMPD患者胞内分枝杆菌感染率高,鸟分枝杆菌感染所致的NTMPD在农村发病为主。NTMPD患者女性占比高,在40岁以下人群中占比低,临床症状和影像学表现无特征性,慢性阻塞性肺疾病、肺结核、支气管扩张是NTMPD的易患因素。