PI3K/Akt/mTOR和MAPK/ERK信号通路在胃癌细胞生长中协同作用及机制

目的初步探讨PI3K/Akt/m TOR和MAPK/ERK信号通路在胃癌细胞生长中的协同作用。方法采用不同浓度的PI3K/Akt/m TOR和MAPK/ERK信号通路抑制剂rapamycin与PD98059分别单独及联合作用于胃癌细胞SGC-7901。采用CCK8法检测SGC-7901细胞增殖情况;实时荧光定量PCR检测关键基因m RNA的表达;蛋白印迹法(WB)检测相关蛋白的表达;流式细胞术检测细胞周期和凋亡的变化。结果 Rapamycin(12.5、25、50、100、150、200 nmol/L)与PD98059(25、50、100、200、300、400μmol/L)单独作用可抑制SGC-7901细胞增殖活性,联合作用也可抑制其活性,且联合组的抑制作用强于单独作用(P0.05)。与rapamycin、PD98059单独作用相比,联合组对AKT、m TOR、MEK、ERK基因m RNA表达和p-AKT、p-m TOR、p-MEK1/2、p-ERK1/2蛋白表达的抑制作用明显增强(P0.05)。联合组阻滞于G0/G1期的细胞比例显著增多,且具有更强的促凋亡作用。结论 PI3K/Akt/m TOR和MAPK/ERK信号通路在胃癌细胞生长中具有一定的协同调控作用。     

胚胎实验室关键指标质控专家共识

辅助生殖技术(ART)胚胎实验室涉及的配子及胚胎操作流程多而复杂,如何有效选取并利用关键指标对胚胎实验室进行全面质量管理(TQM)显得尤为关键。因此,中华医学会生殖医学分会制定"胚胎实验室关键指标质控专家共识",为我国各地辅助生殖中心胚胎实验室对其进行有效的质量管理提供参考。     

卵巢衰老的临床干预新进展

女性生育力的降低显著早于全身机体的衰老,卵巢储备一般在35岁开始下降。目前卵巢衰老的诊断主要依据年龄、基础血FSH、抑制素B和血清抗苗勒氏管激素(AMH)水平及窦卵泡计数。卵巢衰老包括生理性卵巢衰老(NOA)、隐匿性卵巢功能不全(OPOI)和早发性卵巢功能不全(POI)。在IVF周期中补充生长激素、脱氢表雄酮以及辅酶Q10可以部分改善NOA患者的IVF结局。目前针对POI尚无有效的临床治疗手段。卵巢组织玻璃化冷冻联合体外激活的POI临床研究获得了较好的妊娠结局。干细胞移植干预POI患者的临床研究提示其良好的应用前景。逆转卵母细胞衰老的技术中,自体生殖系线粒体能量移植(AUGMENT)在小规模临床试验中能够显著改善卵母细胞的质量和临床妊娠率。本文就卵巢衰老的临床诊断、发病机制和干预方法进行综述。     

CSRM数据报告:2008～2018年中国健康男性精液质量变化分析

目的探讨近10年中国健康男性精液质量的变化情况。方法中华医学会生殖医学分会(CSRM)收集2008~2018年向中国七家精子库8 989位捐精者基本情况及精液参数,按照WHO《人类精液检查与处理实验室手册》标准分析精液体积、精子浓度、前向运动百分率和正常形态率等参数。资料分析方法采用ANOVA分析、偏相关分析、线性回归分析等。结果研究对象总样本量为8 989人,平均年龄为(26.26±5.35)岁。2008~2018年间,精液体积、精子浓度、精子总数、总活力百分率、前向运动精子百分率、精子正常形态率各参数均值有统计学差异(P<0.001);偏相关分析控制年龄、BMI因素,结果显示精液体积、精子总数、前向运动百分率、精子正常形态率均与时间呈负性相关,系数分别为-0.177、-0.135、-0.104、-0.084(P<0.001)。线性回归分析显示精液体积、精子总数、前向运动精子百分率、精子正常形态率变化与时间相关,均呈下降趋势(β=-0.148、-9.988、-0.134、-0.695;P<0.001)。结论 2008~2018年间,中国健康男性精液质量随时间变化呈下降趋势。     

激光辅助孵化技术在透明带异常患者新鲜移植周期中的应用及安全性分析

目的探讨透明带异常患者新鲜移植周期中应用激光辅助孵化(AH)技术的临床结局及其安全性。方法回顾性分析2013年1月至2016年12月在本中心进行IVF-ET的透明带异常患者的临床资料,总例数为154例。按照纳入标准对第3天移植的115例透明带异常患者进行筛选,符合纳入标准的48例患者均行激光AH,设为AH组;随机筛选透明带正常未行激光AH的患者290例设为对照组;比较两组患者的一般资料及临床妊娠结局。结果 AH组和对照组两组患者的一般资料,如年龄、体重指数(BMI)、激素水平及内膜厚度比较差异均无统计学意义(P0.05)。AH组患者48例,临床妊娠34例,临床妊娠率70.83%;对照组患者290例,临床妊娠219例,临床妊娠率75.52%,两组临床妊娠率比较无统计学差异(P0.05)。两组的多胎率、活产率、早产率、流产率及异位妊娠率比较差异亦无统计学意(P0.05)。结论对于透明带异常但具有优质胚胎的患者,行激光AH可以改善患者的妊娠结局,且并未增加流产率、畸形率、多胎率等不良结局风险。     

子宫内膜异位症与不孕症

子宫内膜异位症（EMs）在育龄妇女中发病率较高,较易引起患者生育能力下降乃至不孕.目前这类不孕症的治疗方式主要包括手术治疗和多种辅助生殖技术（ART）,包括体外受精（IVF）、促排卵治疗、宫内受精等.传统的药物加外科治疗方式对不孕症的治疗效果相当有限,因此越来越多的证据显示ART应该作为EMs相关不孕症患者的首选治疗,其中IVF因其相对较高的成功率备受关注.但是诸如IVF前的卵巢调控方式、妊娠后如何防治疾病本身带来的妊娠期并发症等诸多悬而未决的问题需要大型的研究来提供新的理论支持.     

微刺激全部胚胎冷冻方案在常规体外受精-胚胎移植失败的卵巢低反应患者中的应用

目的探讨微刺激全部胚胎冷冻方案在常规体外受精/卵胞质内单精子显微注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)方案失败的卵巢低反应(POR)患者中的应用价值。方法对196例IVF/ICSI-ET应用常规促排卵方案因POR放弃周期或移植失败后改用微刺激方案的402个周期进行回顾性分析,比较前、后2次不同促排卵方案的临床和实验室指标。结果 402个微刺激周期中32个周期取消,周期取消率为7.96%,370个周期获得卵母细胞,平均获卵数(2.2±1.5)个,共233个周期有胚胎冷冻,胚胎冷冻率为57.96%,共194个周期进行了ET,临床妊娠74例,早期自然流产6例,起始周期累积妊娠率为37.75%(74/196),冻融胚胎移植(FET)周期临床妊娠率为38.14%(74/194),其中≤37岁组FET周期的临床妊娠率(50.89%)明显高于37岁组(20.73%)(P0.05)。微刺激方案的临床和实验室指标均显著优于常规长方案。结论微刺激全部胚胎冷冻方案对常规方案IVF/ICSI-ET治疗失败的POR患者具有疗程短、刺激剂量小,获卵率高、可利用胚胎率高、周期取消率低等特点,对于该类患者再次助孕可考虑微刺激方案。     

锌指蛋白KLF12抑制人子宫内膜间质细胞体外蜕膜化过程中胰岛素样生长因子结合蛋白-1表达

目的人子宫内膜间质细胞蜕膜化标志蛋白胰岛素样生长因子结合蛋白-1(insulin-like growth factor binding protein-1,IGFBP-1)参与调控月经周期、排卵、蜕膜化、胚胎种植以及胎儿生长等生理过程,本研究旨在探索锌指蛋白KLF12对人子宫内膜间质细胞体外蜕膜化过程中IGFBP-1表达的影响。方法制备Ad-Flag-KLF12重组腺病毒,通过荧光定量聚合酶链式反应(PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)结合重组腺病毒介导的KLF12过表达实验,阐述人子宫内膜间质细胞体外蜕膜化过程中KLF12对IGFBP-1表达调控作用。结果成功获得滴度为2×1011ifu/ml的重组KLF12腺病毒,该腺病毒可在人子宫内膜间质细胞中高表达Flag-KLF12融合蛋白;体外分离培养的人子宫内膜间质细胞经8-Br-cAMP和醋酸甲羟孕酮(medroxy progesterone acetate,MPA)联合诱导蜕膜化后,KLF12的mRNA表达随着诱导时间延长逐渐降低,72h降低最明显,较未刺激降低约70%;过表达KLF12显著抑制8-Br-cAMP和MPA诱导的人子宫内膜间质细胞中IGFBP-1mRNA的表达,并以时间依赖的方式明显抑制IGFBP-1的分泌(P0.01);过表达KLF12明显抑制人子宫内膜间质细胞体外蜕膜化过程中IGFBP-1启动子转录活性。结论锌指蛋白KLF12抑制人子宫内膜间质细胞体外蜕膜化过程中IGFBP-1的表达与分泌。     

男性不育患者Y染色体微缺失筛查与意义分析

目的 探讨男性不育与Y染色体微缺失之间的关系.方法 利用6个Y染色体特异序列标签位点,以多重PCR技术对172例患者进行Y染色体AZF区域的微缺失筛查.结果 172例患者中共检出Y染色体微缺失7例,其中无精子症4例,少精子症3例,缺失率分别为15.38%和9.68%.正常生育组30例未发现Y染色体微缺失.结论 Y染色体微缺失筛查所用的标志物对于精子密度的减少可能是特异性的,Y染色体微缺失检测适用于临床上无精症和少精症的男性不育患者.