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1.
目的:运用CRISPR/Cas9基因编辑技术,建立IL-15基因敲除的MGC-803胃癌细胞株?方法:针对IL-15基因作用的功能域,设计了靶向IL-15基因Exon2的gRNA? 构建PX458-gRNA重组质粒并转化感受态细胞Stbl3,筛选出重组子后进行测序,通过测序确认了所设计的gRNA的有效性?并进一步通过流式细胞分选以及ELISA法检测筛选出的MGC-803胃癌细胞株IL-15基因的表达水平?结果:测序结果显示敲除质粒构建成功,与阴性对照组相比,转染PX458-IL-15-gRNA质粒组IL-15的表达水平明显低于阴性对照组,差异具有统计学意义(P < 0.001)?结论:利用CRISPR-Cas9系统成功构建了IL-15基因敲除的MGC-803 细胞,为后续研究IL-15在肿瘤中的作用机制和功能奠定了基础?  相似文献   
2.
在炎症和肿瘤微环境中间充质干细胞(MSC)的作用备受关注,而调节性T细胞(Treg)、辅助性T细胞17(T helper cell17,TH17)对炎症和肿瘤的发展也起着重要作用,但这3者之间的相互作用及机制尚未明确。MSC可以通过旁分泌或直接接触的方式参与免疫反应的调节,在移植物抗宿主病或某些炎症反应中MSC可以上调Treg细胞并抑制TH17细胞的活化,最终抑制炎症的发展。在某些肿瘤环境中的MSC对Treg/TH17细胞的极化均起重要作用。MSC对CD4+T细胞的调节作用因环境而异。MSC可以作为调节免疫反应的诊断、治疗靶点。  相似文献   
3.
4.
目的探讨人脐带间充质干细胞来源的外体(huc-exosomes)对SD大鼠急性心肌梗死(AMI)的修复作用及其可能的分子机制。方法体内构建SD大鼠AMI模型,分为假手术组、AMI+PBS组和AMI+exosomes组,小动物高频彩色超声仪检查心功能;72 h后处死取心肌组织,western blot检测组织内Smad7蛋白变化;体外培养心肌细胞系H9C2及原代培养心肌组织细胞,免疫荧光法鉴定原代培养心肌组织细胞,分为正常氧+PBS、正常氧+exosomes、缺氧+PBS、缺氧+exosomes 4组,分别提取各组的蛋白质或RNA,用定量PCR、western blot分别检测Smad7 mRNA和蛋白质变化。结果成功构建了SD大鼠AMI模型,超声心动图结果显示,尾静脉注射huc-exosomes可改善AMI大鼠的心功能。定量PCR及western blot结果显示,exosomes处理使心肌细胞中Smad7 mRNA和蛋白质的表达水平均上调。结论 huc-exosomes对AMI有修复作用,exosomes可能通过调节Smad7的表达促进细胞修复,Smad7可作为huc-exosomes介导损伤修复的判断指标。  相似文献   
5.
摘要:目的:构建大鼠急性心肌梗死(AMI)模型并初步探讨人脐带间充质干细胞 (hucMSCs) 对大鼠AMI损伤的修复效果。 方法:用小动物呼吸机维持呼吸,开胸后快速挤出大鼠心脏,结扎左冠状动脉前降支,并结合双层荷包缝合法构建模型。经心电图,超声心动图和TTC染色多方面验证。尾静脉注射hucMSCs,观察大鼠AMI损伤修复效果。 结果:成功构建了大鼠AMI模型,建模后成活率高(79.2%)。与模型+PBS组左心室收缩期容积[LV Vol;s(μL):164.73±15.54]和左心室收缩期内径[LVID;s(mm):5.77±0.23]相比,模型+MSCs组[LV Vol;s(μL):116.08±9.06]和[LVID;s(mm):4.96±0.17]明显降低,F分别为75.10和107.96,P均<0.01。与模型+PBS组左心室射血分数[LVEF(%):45.55±3.71]和左心室收缩分数[LVFS(%):23.56±2.38]相比,模型+MSCs组[LVEF(%):53.99±2.32]和[LVFS(%):28.76±1.52]明显增高,F分别为65.80和62.94,P均<0.05。HE染色结果表明,模型+MSCs组细胞损伤程度明显轻于模型+PBS组。 结论:成功构建大鼠AMI模型并初步证明hucMSCs可以促进大鼠AMI损伤修复,为进一步研究其机制奠定了基础。  相似文献   
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