TMEM158在乳腺癌的表达及其对乳腺癌细胞迁移侵袭能力的影响

目的分析跨膜蛋白158(transmembrane protein 158,TMEM158)在乳腺癌组织中的表达,探讨其对乳腺癌细胞侵袭能力的影响及作用机制。方法分析TCGA数据库中下载的1 094例乳腺癌组织和120例癌旁组织的m RNA表达谱数据;Western印迹验证癌组织及其对应癌旁组织中TMEM158蛋白表达差异;实时荧光定量聚合酶链反应(q RT-PCR)检测乳腺癌细胞系中TMEM158表达水平。通过小干扰RNA技术转染乳腺癌SUM1315细胞,Transwell及细胞划痕实验观察沉默TMEM158后对乳腺癌细胞迁移侵袭能力的影响,同时Western印迹和q RT-PCR实验分析干扰TMEM158对EMT(epithelialmesenchymal transition)相关标志物E-Cadherin、Vimentin、Snail、N-Cadherin表达量的影响。结果分析TCGA数据库中下载的1 094例乳腺癌组织和120例癌旁组织的m RNA表达谱数据显示,TMEM158在乳腺癌组织中的表达水平(6.65±1.76)高于癌旁组织(5.81±1.22)(P0.05);分析120对乳腺癌及其对应的癌旁组织,结果表明,TMEM158在乳腺癌组织中表达(6.50±1.76)高于对应的癌旁组织(5.81±1.22)(P0.05)。Western印迹检测4对人乳腺癌及对应的癌旁组织标本中TMEM158蛋白的表达显示,与癌旁乳腺组织比较,乳腺癌组织TMEM158表达升高(P0.05)。q RT-PCR分析乳腺癌细胞水平TMEM158表达显示,相对于正常乳腺导管细胞(MCF-10A),乳腺癌细胞中TMEM158表达水平升高(P0.05);人乳腺癌细胞株TMEM158表达量也升高(均P0.05)。Transwell实验结果表明,与对照组细胞(SUM1315-Si NC)相比,干扰TMEM158(SUM1315-Si TMEM158),癌细胞的迁移和侵袭能力降低[(346±59)比(196±33),P0.05;(202±68)比(99±21),P0.05)]。细胞划痕实验结果显示,沉默TMEM158后癌细胞迁移能力降低[(54.68±10.85)比(25.54±7.64),P0.05]。Western印迹和q RT-PCR结果证明,沉默TMEM158后E-Cadherin表达量增加,而Vimentin、Snail、N-Cadherin表达量下降(P0.05)。结论TMEM158在乳腺癌组织与细胞系中高表达,可通过调控EMT相关蛋白的表达干扰TMEM158,从而抑制乳腺癌细胞迁移侵袭。     

CpG寡核苷酸促进Toll样受体9的表达增强乳腺癌细胞侵袭

目的:探讨Toll样受体9(Toll-like receptor 9,TLR9)在乳腺癌细胞中的表达对其侵袭能力的影响。方法:应用West-ern blot检测乳腺癌细胞系TLR9的表达状况,以CpG寡核苷酸刺激不同乳腺癌细胞株后,检测TLR9表达的变化、体外侵袭能力的变化以及细胞活性的影响。结果:人乳腺癌细胞株MDA-MB-231表达TLR9而MCF-7不表达。CpG寡核苷酸处理后MDA-MB-231的TLR9表达增高,且侵袭能力进一步增强;MCF-7的该受体表达情况和侵袭能力均无明显变化。侵袭能力的增加不是源自于细胞活性的增强。结论:TLR9在高侵袭的乳腺癌细胞系中表达,其表达的增加可以促进乳腺癌细胞的侵袭能力。     

循环肿瘤细胞在转移性乳腺癌中的应用

近年来,乳腺癌的个体化治疗越来越受到重视,在转移性乳腺癌患者中尤其如此。由于不同个体间和个体内部各肿瘤病灶间的异质性,治疗效果和生存时间差异明显。因此,准确、实时、高效地评估肿瘤负荷及相关生物学特性是进行个体化治疗的前提。相对于传统的组织活检手段,基于循环肿瘤细胞（circulating tumor cell,CTC）的液体活检由于其无创性和便捷性逐渐在精准治疗方面展现出巨大的应用潜力。CTC在肿瘤的早期诊断、微小残余/复发病灶的检测、预后评价、耐药监测等方面的优势也被众多研究证实。本文主要讨论CTC计数和表型在转移性乳腺癌患者的预后评估、疗效评价、治疗决策方面的应用。     

Syndecan-1表达缺失促进胃癌淋巴结转移

目的:探讨Syndecan-1基因在胃癌及癌旁组织中的表达及其与癌淋巴结转移的关系。方法:将44例胃癌手术病例分为伴淋巴结转移组和不伴淋巴结转移组,以相应的癌旁正常组织为对照。应用RT-PCR及免疫组化技术检测Syndecan-1的表达,并同时检测p53表达水平的改变。结果:所有癌旁正常组织均有Syndecan-1基因的表达,而44例胃癌组织中只有10例有表达,阳性表达率为22.7%(10/44),癌旁正常组织中Syndecan-1基因表达率显著高于胃癌组织(χ~2=9.14.P<0.05)。35例伴有淋巴结转移的胃癌组织中,2例有Syndecan-1基因表达,阳性表达率为5.7%(2/35),不伴淋巴结转移的9例胃癌组织中有8例检测到Syndecan-1 mRNA的表达,阳性表达率为88.9%(8/9),伴有淋巴结转移的胃癌组织中Syndecan-1 mRNA的表达率显著低于不伴淋巴结转移者,两组间差异明显(χ~2=23.66,P<0.05)。p53表达阳性的胃癌组织Syndecan-1 mRNA的表达低于p53表达阴性的胃癌组织(χ~2=6.18,P<0.05)。结论:Syndecan-1 mRNA表达缺失促进了胃癌生成及淋巴结转移。     

慢病毒转染绿色荧光蛋白对乳腺癌细胞系肿瘤干细胞相关亚群的影响

背景：研究发现通过流式分选的SP肿瘤干细胞具有干细胞功能，提示可用于检测表面标志未知的肿瘤干细胞。 目的：观察慢病毒转染绿色荧光蛋白（green fluorescent protein，GFP）对乳腺癌细胞系MCF-7中SP肿瘤干细胞生物学特性及亚群分布的影响。 设计、时间及地点：细胞学基因检测水平体外观察，于2007-06/2008-07在南京医科大学第一附属医院普外科实验室完成。 材料：MCF-7细胞株由上海细胞生物学研究所馈赠，GFP-MCF-7细胞株由江苏省人民医院普外实验室保存。 方法：取MCF-7与GFP-MCF-7细胞株，加入含10%小牛血清的高糖DMEM培养液，在37 ℃、体积分数为0.05的CO2饱和湿度恒温箱中培养，生长至80%~90%融合时消化传代，取处于对数生长期的两种细胞进行实验。 主要观察指标：利用流式细胞技术检测转染前后细胞中SP肿瘤干细胞的比例，运用Percoll不连续密度梯度法分离转染前后富集SP肿瘤干细胞的亚群，平板克隆实验测定各亚群的克隆形成率，观察比较转染前后细胞生长曲线、骨桥蛋白的表达水平。 结果：MCF-7与GFP-MCF-7细胞中SP肿瘤干细胞比例分别为2.79%和2.73%，转染前后差异无显著性意义（t=2.184，P > 0.05）。经Percoll分选，MCF-7与GFP-MCF-7细胞均分为5层，其中GFP-MCF-7第4亚群中明显富集SP肿瘤干细胞，且克隆形成率最高（t=3.415，P < 0.01）。转染前后细胞生长曲线无明显变化，且骨桥蛋白的表达水平基本相似（t=2.562，P > 0.05）。 结论：慢病毒转染绿色荧光蛋白对MCF-7中的SP肿瘤干细胞比例、亚群分布、细胞生物学特性无明显影响，且Percoll不连续密度梯度法富集效果显著。GFP-MCF-7细胞株可用于乳腺癌肿瘤干细胞转移动物模型的构建等实验。     

背阔肌肌皮瓣联合扩张器在乳腺癌即刻乳房重建中的临床应用

目的 :介绍背阔肌肌皮瓣联合扩张器应用于乳腺癌患者即刻乳房重建的临床经验。方法 :回顾本院2013~2014年10例行保留皮肤或保留乳头乳晕乳腺癌切除术后,应用背阔肌肌瓣或肌皮瓣联合扩张器进行即刻乳房重建病例,术后分次注水扩张,维持6个月以上,二期手术将扩张器更换为硅凝胶假体,完成乳房重建。结果:10例乳房再造手术均获成功,未发生扩张器或假体相关并发症。术后随访1年,外观效果满意。结论:背阔肌肌皮瓣联合扩张器的即刻乳房重建手术对乳腺癌患者安全可行,手术效果好。     

TMEM158在乳腺癌中的表达及其对乳腺癌细胞迁移侵袭能力的影响

目的分析跨膜蛋白158（Transmembrane protein 158, TMEM158）在乳腺癌组织中的表达,探讨其对乳腺癌细胞侵袭能力的影响及作用机制。方法分析TCGA数据库中下载的1094例乳腺癌组织和120例癌旁组织的mRNA表达谱数据;Western 印迹验证乳腺癌患者癌组织及其对应癌旁组织中TMEM158蛋白表达差异;实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测乳腺癌细胞系中TMEM158表达水平。通过小干扰RNA技术转染乳腺癌SUM1315细胞,Transwell及细胞划痕实验观察沉默TMEM158后对乳腺癌细胞迁移侵袭能力的影响,同时Western 印迹和qRT-PCR实验分析干扰TMEM158对EMT（epithelial-mesenchymal transition）相关标志物E-Cadherin、Vimentin、Snail、N-Cadherin表达量的影响。结果分析TCGA数据库中下载的1094例乳腺癌组织和120例癌旁组织的mRNA表达谱数据显示,TMEM158在乳腺癌组织中的表达水平（6.65 ± 1.76）高于癌旁组织（5.81 ± 1.22）,差异有统计学意义（P<0.05）;分析120对乳腺癌及其对应的癌旁组织,结果表明,TMEM158在乳腺癌组织中表达（6.50 ± 1.76）高于对应的癌旁组织（5.81 ± 1.22）,差异有统计学意义（P<0.05）。Western 印迹检测4对人乳腺癌及对应的癌旁组织标本中TMEM158蛋白的表达差异显示,与癌旁乳腺组织比较,乳腺癌组织TMEM158表达升高,差异有统计学意义（P<0.05）。qRT-PCR分析乳腺癌细胞水平TMEM158表达差异显示,相对于正常乳腺导管细胞（MCF-10A）,乳腺癌细胞中TMEM158表达水平升高,差异有统计学意义（P<0.05）,qRT-PCR结果显示,与正常乳腺导管细胞（MCF-10A）相比,人乳腺癌细胞株TMEM158表达量升高,差异有统计学意义（均P< 0.05）。Transwell实验结果表明,与对照组细胞（SUM1315-SiNC）相比,干扰TMEM158（SUM1315-SiTMEM158）细胞的迁移和侵袭能力降低[（346 ± 59）比(196 ± 33), P< 0.05;（202 ± 68）比（99 ± 21）, P< 0.05）]。细胞划痕实验结果显示,沉默TMEM158后细胞迁移能力降低[（54.68 ± 10.85）比（25.54 ± 7.64）, P< 0.05]。Western 印迹和qRT-PCR结果证明,沉默TMEM158后E-Cadherin表达量增加,而Vimentin、Snail、N-Cadherin表达量下降,差异有统计学意义。结论TMEM158在乳腺癌组织与细胞系中高表达,可通过调控EMT相关蛋白的表达干扰TMEM158,从而抑制乳腺癌细胞迁移侵袭。     

胃癌酪氨酸激酶与细胞凋亡的关系

目的 研究酪氨酸激酶(Syk)的表达与胃癌细胞凋亡的关系.方法 RT-PCR检测50例胃癌及癌旁正常胃组织标本中Syk mRNA的表达情况,并用流式细胞仪检测胃癌组织肿瘤细胞凋亡,分析Syk表达与胃癌组织肿瘤细胞凋亡的情况.结果 所有癌旁胃组织都有Syk基因的表达,而50例胃癌组织中只有11例有表达,癌旁正常胃组织与胃癌组织中Syk基因表达率差异有显著性(P＜0.05).有淋巴结转移的39例胃癌组织中, 2例有Syk基因表达,无淋巴结转移的11例胃癌组织中有9例检测到Syk mRNA的表达,有淋巴结转移的胃癌组织中Syk mRNA的表达率显著降低(P＜0.05). Syk阳性表达的11例胃癌组织的凋亡率为(28.27±4.39)%,显著高于39例Syk阴性的胃癌组织的凋亡率为(3.29±2.37)%(P＜0.05).结论 Syk对胃癌的生长和转移可能有抑制作用,诱导胃癌组织肿瘤细胞凋亡可能是其抑癌作用的主要原因之一.     

前锯肌瓣在扩张后假体乳房再造术中的应用

目的:研究前锯肌瓣在扩张后假体乳房再造术中的应用及其临床意义?方法:47例乳腺癌改良根治术或单纯乳腺切除患者(共47侧乳房)采用软组织扩张器并假体置入方式分期乳房再造,即扩张后假体置入乳房再造术(以下简称扩张乳房再造术),术式中均采用前锯肌瓣作为扩张器或假体外侧覆盖,观察一期及二期术后包膜挛缩?血清肿?血肿?切口裂开及感染等并发症发生情况?结果:所有观察病例中,一期扩张器置入术后(47例)无血肿发生,无感染,无切口或皮瓣坏死,2例(2侧)切口裂开;二期假体更换后(46例),无血肿发生,无感染,无切口或皮瓣坏死,无切口裂开,平均随访(465.0 ± 2.5)d,随访期间未见包膜挛缩病例?结论:扩张后假体乳房再造术中运用前锯肌瓣能较好地固定扩张器及假体,减少并发症,防止假体移位,获得好的乳房形态?     

乳腺癌术后上肢淋巴水肿发生机制及预防进展

乳腺癌是严重危害妇女身心健康的主要恶性肿瘤之一[1].自19世纪80年代Halsted创立乳腺癌根治术以来,手术方式发生了很大变化.但不管术式如何变化,腋窝淋巴结清扫（axillary lymph node dissection,ALND）始终是乳腺癌外科治疗的一个重要组成部分.然而,ALND后可发生一些相关并发症,其中上肢淋巴水肿（upper limb lymphedema）迄今尚无良策,严重影响中重度水肿患者的生活质量.ALND术后上肢淋巴水肿的发生率报道不一,从6% ～49%不等[2-3],即使仅行前哨淋巴结活组织检查（sentinel lymph node biopsy, SLNB）,其发生率也波动于4% ～10%之间[4-5].因此,本文就上肢淋巴水肿的发生机制、影响因素及其预防进行综述.