移植胰腺再灌注后细胞凋亡及Fas表达的实验研究

目的 探讨胰腺移植再灌注后胰腺细胞凋亡发生的过程及凋亡相关基因Fas的表达。方法 将60只SD大鼠随机分成7组:假手术组(5只),冷缺血2小时组(I组,5只),冷缺血2小时再灌注1、3、6、9、12小时组(I/R1组、I/R3组、I/R6组、I/R9组、I/R12组,各10只)。HE染色后光镜及电镜观察各组胰腺组织的病理变化;流式细胞仪检测各组胰腺细胞的凋亡百分比;采用免疫组织化学方法检测各组胰腺组织中Fas蛋白的表达。结果胰腺移植后早期即可观察到细胞凋亡的典型改变,胰腺冷缺血再灌注后发生凋亡的高峰期为再灌注后3小时[凋亡率(AR)为(12.61％±2.94％),P<0.01],再灌注6小时较3小时细胞凋亡有所减少[AR为(6.35％±2.19％),P<0.01),再灌注9小时及12小时细胞凋亡进一步减少[AR分别为(3.67％±1.44％)及(3.33％±1.03％),P<0.05]。假手术组与I/R3组均未见Fas蛋白表达,I/R1组Fas(+);至I/R3组Fas表达增强为(++),以后各组表达有所下降。结论 细胞凋亡是胰腺移植后的早期事件,移植胰腺冷缺血再灌注后的凋亡高峰发生在再灌注后3小时;移植胰腺的细胞凋亡受基因调控,Fas基因可促进胰腺细胞的凋亡。     

银杏总黄酮对肾缺血再灌注大鼠p-JNK表达的影响

目的观察肾缺血再灌注损伤(IRI)后JNK活化的变化,并探讨银杏总黄酮(TFG)对其影响。方法 SD大鼠随机分为假手术组(Sham,n=12)、缺血再灌注组(IR,n=30)和银杏总黄酮处理组(TFG,n=12)。采用夹闭双侧肾动静脉45min然后松开动脉夹制备肾IRI模型。蛋白免疫印迹检测肾组织中p-JNK的表达,并用细胞凋亡原位末端标记(TUNEL法)检测肾小管上皮细胞凋亡。结果 IR组肾组织中p-JNK的表达在再灌注10 min开始升高,再灌注30 min达到高峰,再灌注1 h有所降低,再灌注24 h再次升高,同时该时段有大量肾小管上皮细胞凋亡;给予TFG处理,再灌注30 min p-JNK表达明显减弱,再灌注24 h细胞凋亡明显减少。结论 TFG防治肾IRI机制可能与抑制肾组织中JNK磷酸化的程度,减少肾小管上皮细胞凋亡有关。     

肾组织单细胞悬液制备方法的比较研究

目的　寻找更好的肾组织单细胞悬液制备方法。方法　以肾缺血再灌注大鼠肾为标本 ,分别采用剪碎法和研磨法制备肾组织悬液。经台盼蓝染色测细胞存活率 ,并进行流式细胞术 (FCM )分析。结果　剪碎法细胞形态完整、存活率高 ;2种方法细胞凋亡水平 (APO)、CV(coefficiencyofvariation)值有显著性差异 (P <0 .0 1)。结论剪碎法制备肾组织单细胞悬液优于研磨法     

BMP-7/Smad1/5/8信号通路在肾缺血后处理减轻 大鼠肾缺血再灌注损伤中的作用

目的：观察肾缺血后处理后BMP-7/Smad1/5/8信号通路活性改变,探讨肾缺血后处理减轻肾缺血再灌注损伤(IRI)的机制。方法：雄性SD大鼠随机分为假手术组(sham组),缺血再灌注组(IR组),缺血后处理组(IPostC组)。各组又分成再灌注1.5 h、3 h、6 h、12 h和24 h 共五个时间点亚组,每组6只动物。IR组采用结扎左侧肾蒂60 min后松开动脉夹制备肾脏缺血再灌注损伤模型;IPostC组操作同IR组,恢复灌注前给予6个循环10s再灌注/10s缺血处理,然后恢复灌注。测定血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)浓度;免疫印迹法测定肾组织中BMP-7、USAG-1和p-Smad1/5/8蛋白的表达变化;TUNEL法分析肾小管上皮细胞凋亡情况。结果：与sham组相比,IR组各时间点SCr和BUN含量、USAG-1表达水平以及TUNEL凋亡指数(apoptotic index,AI)明显增高,而BMP-7和p-Smad1/5/8蛋白表达水平显著下调,差异均具有统计学意义(P<0.05);与IR组各对应时间点相比,IPostC组SCr和BUN含量、USAG-1表达水平以及AI明显降低,而BMP-7和p-Smad1/5/8蛋白表达水平显著上调,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论：肾IPostC对大鼠肾缺血再灌注损伤有一定的保护作用,其机制可能与上调BMP-7的表达、下调USAG-1的表达,继而激活BMP-7/Smad1/5/8信号通路以及抑制细胞凋亡有关。     

大鼠胰腺冷缺血后细胞凋亡的研究

目的　观察大鼠胰腺冷缺血后细胞凋亡的变化。方法　大鼠胰腺肝素生理盐水原位灌注后切取并冷保存 0、3、6、12、2 4h ,分别用光镜、电镜、流式细胞仪及TUNEL法检测胰腺组织中细胞凋亡的变化。结果　冷保存6h胰腺组织中细胞凋亡数轻度增多 (P <0 .0 5 ) ,冷保存 12h及 2 4h时 ,细胞凋亡明显增多 (P <0 .0 1)。结论　胰腺冷缺血损伤可引起胰腺腺泡细胞凋亡。     

SP600125抑制c-Jun的激活拮抗肾缺血/再灌注诱导的细胞凋亡

目的应用JNK抑制剂SP600125研究转录因子c-Jun的激活对肾缺血/再灌注（I/R）诱导细胞凋亡的影响。方法采用双侧夹闭大鼠肾蒂缺血45 min后再灌注3 h的方法制备肾I/R动物模型。免疫组化法分析转录因子c-Jun的激活变化情况;原位末端标记法（TUNEL）检测肾小管上皮细胞凋亡情况。结果再灌注3h,p-c-Jun的免疫活性显著增强,凋亡的细胞数明显增加。SP600125明显抑制了p-c-Jun的免疫活性且明显减少肾I/R诱导的细胞凋亡。结论肾I/R诱导的细胞凋亡与c-Jun的激活有关,SP600125能明显抑制转录因子c-Jun的激活,减轻肾小管上皮细胞的凋亡。     

小剂量纳洛酮对氯胺酮镇痛效应的影响

目的观察小剂量纳洛酮(naloxone,NL)对氯胺酮(ketamine,KT)镇痛效应的影响,为临床合理联合用药提供依据。方法小鼠分单用KT、NL与KT合用组,用热板法和扭体法实验,观察NL对KT镇痛小鼠热板法痛阈(painthresholdinhot-platetest,HPPT)和扭体次数的影响。结果KT皮下注射或腹腔注射可以增大小鼠HPPT和减少小鼠扭体次数(P<0.05);NL可增大KT镇痛小鼠的HPPT、减少扭体次数(P<0.01)。结论小剂量NL能够增强KT的镇痛效应。     

消炎宁痔疮栓药效学研究

目的观察消炎宁痔疮栓的药效学作用。方法以小鼠耳肿胀和大鼠足跖肿胀法实验,观察其抗炎作用;应用热板法考察其镇痛作用;用小鼠断尾法观察出血时间。结果消炎宁痔疮栓有明显的抑制小鼠耳肿胀和大鼠足跖肿胀作用(P<0.01);热板法验证消炎宁痔疮栓能明显提高痛阈;小鼠断尾显示其能缩短小鼠尾出血时间。结论消炎宁痔疮栓具有明显的抗炎、镇痛及止血作用。     

创新理念下的药理学教学改革

大力培养学生的创新能力和实践能力，是我们教育工作者的历史使命和义不容辞的责任。多年来,我们致力于创新理念下的药理学教学改革。从药理学课程体系创新、药理学课程教学形式与手段创新、改革药理学理论考试的方法、医学生创新思维及创新能力的早期培养、注重药理学实验基本技能操作的训练等方面进行了改革，效果显著。     

不同本科专业药理学中“药代动力学”教学之我见

该文提出了针对高等医学院校不同的本科专业,应当各有侧重点地讲授药理学中的药代动力学内容.分析了药学、麻醉学和临床医学等专业的学生毕业后的工作岗位及特点,指出了药代动力学的哪些内容属于掌握的和熟悉的,教师应该如何讲授才能使学生学好药代动力学知识,为以后工作中知识的应用打下良好的基础.