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1.
目的研究过氧化氢诱导人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞氧化损伤中的细胞衰老现象并探讨其机制。方法培养的人RPE细胞随机分为正常对照组和过氧化氢处理组,过氧化氢处理组根据用600μmol·L-1过氧化氢处理的不同时段分为1h、6h、12h、24h及72h组。流式细胞术分析各组细胞周期,计算G0/G1期细胞所占比率;流式细胞术检测各组细胞线粒体膜电位的变化;免疫组织化学法检测各组细胞Caspase-9的变化。结果与正常对照组相比,过氧化氢作用6h组G0/G1期细胞所占比率增高(P<0.05),且随作用时间的延长而增加,72h组最高(P<0.01),达到(89.12±0.21)%;过氧化氢损伤导致RPE细胞膜电位降低,且随时间延长逐渐降低,72h组最低(62.48±0.59);Caspase-9蛋白在过氧化氢作用1h时表达开始增高,且随时间延长逐渐增加,在24h时达到高峰(36·2±0.4),72h时略有回落(26.4±0.8),但仍较正常组(3.2±0.2)高。结论过氧化氢作用下,人RPE细胞生长停滞于G/G期,呈现衰老现象。线粒体膜电位的降低和线粒体凋亡途径上游因子Caspase-9的活化可能是细胞衰老的机制之一。  相似文献   
2.
目的:以小干扰RNA沉默人眼脉络膜黑色素瘤细胞中的低氧诱导因子-1(hypoxia inducible factor-1,HIF-1)基因,在缺氧状态下观察其对人眼脉络膜黑色素瘤(human uveal melanoma cell,OCM-1)细胞中基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)基因表达的影响。

方法:将脉络膜黑色素瘤细胞分为正常组与缺氧组,其中将缺氧组再分成单纯缺氧组、干扰组、脂质体对照组、阳性对照组和阴性对照组; 对正常组细胞用含有浓度为10%的胎牛血清和1%的双抗(青-链霉素混合液)的DMEM高糖培养基进行培养。在缺氧组人眼OCM-1细胞的培养瓶中加入100μmol/L CoCl2以构建肿瘤细胞内部的缺氧微环境。干扰组转染HIF-1α siRNA,阴性对照组转染无义siRNA,阳性对照组转染β-actin siRNA,脂质体对照组转染空脂质体。RT-PCR检测细胞中HIF-1α和MMP-2 mRNA的表达,行Western-blot检测HIF-1α和MMP-2蛋白的表达。

结果:与正常组相比,单纯缺氧组HIF-1α蛋白的表达增高(P<0.05),而其mRNA表达量无明显变化(P>0.05); MMP-2 mRNA及蛋白的表达升高(P<0.05)。缺氧培养的各组之间相比,阳性对照组β-actin mRNA表达下降(P<0.05),证实转染成功; 干扰组HIF-1αmRNA和MMP-2 mRNA和蛋白表达均下降(P<0.05),阴性对照组、脂质体对照组各检测因素均无明显差别(P>0.05)。

结论:缺氧条件下可以提高人眼脉络膜黑色素瘤细胞中HIF-1α蛋白的表达,而且HIF-1α蛋白的表达水平可以影响MMP-2的转录与翻译,从而可能进一步影响人眼脉络膜瘤细胞的外周浸润和远处转移能力。  相似文献   

3.
目的研究Caspase-1和NF-κb蛋白在糖尿病大鼠视网膜组织中的表达及氨基胍对其表达的影响,探讨糖尿病视网膜病变的发病机制。方法60只Wistar大鼠,8只作为正常对照组,其它用链脲佐菌素诱导糖尿病。糖尿病模型建立成功后,随机分组为糖尿病未治疗组(DM)和氨基胍治疗组(AG),其下又各设1月、3月、6月亚组。应用免疫组织化学法检测大鼠视网膜组织中Caspase-1和NF-κb蛋白的表达,及氨基胍对两者表达的影响。结果正常大鼠和DM1组视网膜无Caspase-1蛋白的表达,DM3组主要见于神经节细胞层;DM6组表达扩展到内核层和外核层。正常大鼠和DM1月组视网膜内外核层弱表达NF-κb。DM3表达波及神经节细胞层,DM6中NF-κb蛋白表达几乎遍及整个视网膜层。氨基胍治疗组中,Caspase-1和NF-κb的表达均有下降,其中AG3组与DM3组,AG6组与DM6组两者表达差别均有统计学意义(P<0.05)。结论早期糖尿病视网膜上Caspase-1和NF-κb的表达上调了,两者可能均参与了早期糖尿病视网膜病变的发生,其机制可能是导致了神经细胞的凋亡。氨基胍可通过抑制Caspase-1和NF-κb蛋白在视网膜上的表达来治疗糖尿病视网膜病变。  相似文献   
4.
脂质过氧化是引起细胞氧化损伤发生的主要机制之一.许多学者认为视网膜的脂质过氧化与年龄相关性黄斑病变的发生密切相关.促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)作为造血系统生长因子的生理效应已为人熟知,但在近年的动物试验和临床应用中均显示对视网膜疾病有一定疗效,其疗效机制尚未阐明,认为可能与抗氧化有关.  相似文献   
5.
目的 观察促红细胞生成素(EPO)对人视网膜色素上皮(hRPE)细胞抗过氧化氢(H2O2)损伤的影响。方法以传代培养hRPE细胞为研究对象, 采用800μmol/L H2O2 作用3 h 建立 hRPE 细胞损伤模型, 分为正常对照组、单纯损伤组、重组人EPO(rhEPO)治疗组。治疗组又根据加入rhEPO浓度不同分为10、20、40、60 IU/ml亚组。免疫组织化学方法检测细胞中核因子kappa B(NF-κB)的活化情况,比色法测定细胞脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量及乳酸脱氢酶(LDH)细胞释放率。结果 H2O2 可使培养液中MDA及LDH释放率上升,单纯损伤组与正常对照组相比,差异有统计学意义(tLDH=29.746,tMDA=20.426,P<0.05);各治疗组与单纯损伤组比较,MDA及LDH释放率均有显著降低,差异有统计学意义(t10IU=5.770,t20IU=12.774,t40IU=19.818,t60IU=24.833,P<0.05;MDA t10IU=5.345,t20IU=10.278,t40IU=18.571,t60IU=20.247,P<0.05);各治疗组相关分析显示,rhEPO浓度与LDH细胞释放率及MDA含量呈负相关(r=-0.976,P=0.024; r=-0.968,P=0.032);rhEPO浓度与NF-κB核移位率呈正相关(r=0.998,P=0.002);NF-κB核移位率与MDA含量呈负相关(r=-0.954,P=0.046)。结论 EPO能有效地拮抗 H2O2 对hRPE细胞的脂质过氧化损害,其机制可能与活化NF-κB有关。  相似文献   
6.
目的对泪腺上皮性肿瘤的临床病理特征进行总结,分析复发机理和原因。方法回顾分析经病理确诊的泪腺上皮性肿瘤125例病理,用免疫组化法检测肿瘤组织标本的CD44v6蛋白的表达。结果在泪腺上皮性肿瘤中,以多形性腺瘤、腺样囊腺癌、多形性腺癌和腺癌较为多见。复发是泪腺上皮性肿瘤的重要生物学特征之一,复发的原因主要与肿瘤的组织类型、包膜的浸润、残留或破裂、手术操作、CD44v6蛋白的过表达有关。结论临床病理特点与免疫组织化学紧密结合,有助于阐明对泪腺上皮性肿瘤生物学行为的了解及复发原因,CD44v6在泪腺上皮性肿瘤的进展过程和复发中发挥重要作用。  相似文献   
7.
目的:探讨折叠式人工晶状体悬吊术后角膜散光的变化。方法:对20例21眼晶状体切除联合玻璃体切割术后无囊膜支撑或囊膜不足以支撑人工晶状体的无晶状体眼患者行折叠晶状体悬吊术,在术前、术后1wk;1,3mo行自动角膜曲率计检查,记录角膜平均屈光力及散光度,用矢量分析法计算手术性散光(SIA)度数,比较角膜散光的变化。结果:患者术后1wk;1,3mo均与术前角膜的平均屈光度比较差异无显著性(P〉0.05);患者角膜散光度术后1wk与术前比较差异有显著性(P〈0.05);术后1,3mo与术前比较差异无显著性(P〉0.05);手术性角膜散光度术后1,3mo与术后1wk比较差异有显著性(P〈0.05),术后3mo与1mo比较差异无显著性(P〉0.05);角膜散光轴位有向逆规性散光方向转变的趋势。结论:无晶状体眼折叠型人工晶状体悬吊术后角膜平均屈光度变化小、术后3mo内基本恢复至术前状态,散光度及轴向术后1mo内变化明显,术后3mo内基本趋于稳定。  相似文献   
8.
目的:探讨Fas/FasL在大鼠视网膜缺血再灌注损伤中的表达与细胞凋亡的关系及碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth Factor,bFGF)的影响。方法:前房加压法制作大鼠视网膜缺血再灌注损伤模型,28只大鼠随机分为正常组和手术组,其中手术组大鼠左眼为缺血再灌注组,右眼为治疗组,手术组又按照再灌注后不同时间段分为1,6,12,24,48,72h组。应用末端脱氧核酸转移酶介导的脱氧三磷酸尿苷缺口末端标记法检测视网膜神经细胞凋亡指数(apoptosis index,AI),免疫组织化学法检测视网膜组织中Fas,FasL的表达。结果:视网膜神经细胞的凋亡出现于再灌注后6h,并逐渐递增,24h达到高峰,48h开始下降,72h组不明显。Fas,FasL表达改变与凋亡的神经细胞改变基本一致。bFGF治疗组各观察指标表达变化规律与缺血组基本一致,但AI值在12,24,48h组明显低于缺血组(P<0.05);Fas表达在6,12,24h组较缺血组显下降(P<0.05);FasL表达在12,24,48h组较缺血组明显下降(P<0.05)。结论:Fas/FasL死亡诱导系统参与视网膜缺血再灌注损伤,导致神经节细胞的凋亡;bFGF可抑制Fas、FasL的表达,减少神经节细胞凋亡,对视网膜缺血再灌注损伤有治疗作用。  相似文献   
9.

糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)作为最常见的视网膜血管疾病,严重影响患者的视功能和生活质量。对于DR的治疗,视网膜激光光凝是最安全、有效、经济的方法之一,但治疗的同时也存在一定的副作用。随着诊疗技术的不断发展,传统单点模式激光的并发症逐渐显露,目前多点扫描激光临床的需求量增大,但两者在治疗的有效性和安全性方面仍需进一步探讨。本文将从激光治疗后其对视力、眼底荧光素血管造影、视野、视功能、黄斑水肿和角膜神经等方面的影响作一综述。  相似文献   

10.
目的分析早产儿视网膜病变(ROP)的发生率及危险因素。方法对孕周〈36周,出生体质量〈2500g的208例早产儿生后4~6周行眼底检查,根据ROP国际诊断分期法进行诊断分级,探讨ROP与孕周、出生体质量、窒息、吸氧、母亲妊娠并发症、感染及贫血等因素的关系。结果208例早产儿中患有不同程度ROP者39例(其中ROPⅠ期24例,ROPⅡ期13例,ROPⅡ期2例),ROP发生率为18.8%。ROP病儿中住院期间有3例自愈,4例成功进行手术治疗,而大部分病例需出院后继续定期进行眼底检查。孕周、出生体质量、吸氧、母亲妊娠并发症、贫血及感染对ROP的发生具有明显影响。且孕周越短、出生体质量越小,ROP发生率越高。结论早产儿ROP的发生率较高,ROP的发生与孕周、出生体质量、吸氧、母亲妊娠并发症、贫血及感染等因素有关。  相似文献   
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