日本血吸虫虫卵核糖核酸的提取及鉴定

本文采用异硫氰酸胍－酚－氯仿一步法成功地提取了日本血吸虫虫卵总RNA，琼脂糖电泳结果呈现18S一条主带，与日本血吸虫成虫RNA的电泳结果一致。日本血吸虫虫卵RNA的抽提成功为虫卵cDNA库的构建以及虫卵有效抗原的筛选奠定了基础。     

基因芯片筛选抗胸腺细胞血清性肾炎大鼠肾组织基因表达差异的初步研究

目的： 利用基因芯片检查大鼠系膜增生性肾炎，即抗胸腺细胞血清性肾炎(ATSN)模型大鼠发病 40 min 和 5 d 时肾组织相关基因的表达情况，探讨ATSN大鼠不同时相肾组织基因表达的差异并作功能分析。 方法： 用抗胸腺细胞抗血清（ATS）复制大鼠ATSN模型，抽提发病 40 min 和 5 d 时肾组织RNA，分别用逆转录合成荧光分子掺入的cDNA作探针进行基因芯片杂交。用Agilent 扫描仪扫描，Imagene软件读取数据，最后用Genespring进行normalize处理和差异表达基因的筛选。差异基因筛选标准为实验组/对照组比值（ratio）>或=2为上调基因，实验组/对照组ratio<或=0.5为下调基因。然后选取上调和下调基因登录GenBank查找其相关功能。 结果： 在 9 234 个大鼠基因中（去除质控基因），ATSN大鼠 40 min 时肾组织上调基因为341个，其中部分为凋亡相关的调控基因，部分为增生相关基因及一些与信号转导有关的基因；下调基因为392个，其中一些是酶类基因，部分为生长因子和细胞因子受体基因等，其余大多上调和下调基因功能不详。ATSN发病 5 d 时，肾组织上调基因是213个，包括增生相关基因、信号转导相关基因等；下调基因119个，其中部分为酶类和细胞因子相关基因。5 d 时上调和下调基因大多功能不清楚。 结论： 大鼠ATSN发病早期（40 min），致病相关基因已被激活（如凋亡和增生相关基因），其中相关信号转导分子基因也表达上调，而在ATSN大鼠发病 5 d 时，基因表达谱有所改变，其中涉及的基因多为增生相关基因和信号转导相关基因。     

用Dot-ELISA直接法筛选诊断日本血吸虫病的单克隆抗体

报道用14株酶标记单克隆抗体(MAB)与不同病期的血吸虫病人和正常人血清进行Dot-ELISA直接法检测循环抗原,分别计算各株MAb的正确诊断指数r,以初步筛选其中具有诊断价值的MAb。结果显示,r≥0.88者,在急性感染时有三株抗可溶性虫卵抗原(SEA)的和四株抗肠相关抗原(GAA)的,在慢性感染时有一株抗SEA的和二株抗GAA的,这三株在急性感染时也有效。作者将扩大检测样本,期望从上述三株MAb中进一步筛选出具有诊断价值和疗效考核价值的MAb,应用于血吸虫病诊断。     

亚溶解剂量的补体C5b-9复合物诱导肾小球系膜细胞增生及其NF-κB活化的作用

目的：研究亚溶解剂量补体C5b-9（SC5b-9）复合物刺激大鼠肾小球系膜细胞（GMCs）增生和细胞外基质（ECM）分泌的作用，并探讨NF-κB核转录因子是否介入SC5b-9的促增生效应。方法：体外纯培养大鼠GMCs，并行光镜、电镜及功能鉴定。质控SC5b-9后，将GMCs分为5组，即SC5b-9刺激组、SC5b-9＋PDTC组（吡咯啉烷二甲基硫脲）、ATS组、灭活人血清组及完全营养液组。应用RT-PCR检测40min PCNA和FN mRNA水平；同时应用免疫组化检测18 h GMCs增殖细胞核抗原（PCNA）、平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和纤维粘连蛋白（FN）及细胞核内NF-κBp65表达情况。结果：实验40min，SC5b-9刺激组PCNA和FN mRNA表达上调，PDTC处理后表达则明显下降，其余3组PCNA均呈阴性，另3组FN则均有一定基础表达。SC5b-9刺激组，GMCs免疫组化显示：PCNA、α-SMA、FN、NF-κBp65表达增加，PDTC处理后则4者表达明显下调，其余各组，PCNA、α-SMA、NF-κRn65均呈阴性，FN亦有一定的基础表达．结论．SC5b-9可能通过激活NF-κR促讲GMCs增生和ECM分泌.     

中国大陆不同地域隔离群湖北钉螺基因组DNA的限制酶切长度差异

为证实中国大陆湖北钉螺不同地理株的存在,制备了各地钉螺的基因组DNA,经限制性内切酶Bam HI和Pst I酶解后,置0.8%琼脂糖凝胶电泳,比较分析不同地域隔离群钉螺基因组DNA重复序列DNA的限制酶切长度差异.安徽、四川、云南、湖南、湖北、江苏、上海、福建、江西等9地隔离群钉螺的DNA酶切带型.主带基本一致;次带差异明显.以四川普格、云南巍山、江苏东台之间差异较大.湖北省的汉川、洪湖、荆州、石首、咸宁的钉螺酶切图谱基本一致.提示不同隔离群钉螺存在一定的同源和亲缘关系.在基因水平上的差异程度与隔离群之间距离和自然环境关系密切.在一定区域内的钉螺DNA相对稳定.     

人群日本血吸虫病再感染与优势抗体应答的研究

目的 :为研究日本血吸虫病流行区人群中特异性抗体水平是否为再感染的危险因素。方法 :选择江西省新建县鄱阳湖一小岛上三个毗邻的自然村作为观察试区 ,调查 196名 ( 3- 2 5岁 )感染者中 ,吡喹酮治疗后粪检阴性的 138人经过一个感染季节后再感染的情况 ,并检测其血清特异性同型限制性抗体水平。同时就人群接触疫水的暴露水平及年龄因素、血样中特异的同型限制性抗体水平诸因素同再感染的关系进行非条件 logistic回归分析。结果 :虫卵可溶性抗原和粗制成虫抗原特异的 Ig G4抗体水平是再感染发生的危险因素 ,危险度分别是 2 .83和 2 .4 0。结论 :本研究结果可能成为构建对再感染易感状态作预测性诊断试验的基础。     

用沉淀选择过滤法诊断曼氏血吸虫病的轻度感染

人们已经认识到血吸虫病的现场研究中诊断方法的标准化对于曼氏血吸虫病的监测及控制极为重要。比较不同地区、不同人群的资料、疗效及治疗后再感染程度,皆有赖于一种标准化的并能被广泛接受的方法。目前运用很广的Kato-Katz法有其明显不足,如因所用粪便量少,使其敏感性受到限制;对于轻度感染的曼氏血吸虫病人,该法常用的25—     

NF-κB抑制剂（PDTC）对大鼠抗胸腺细胞血清性肾炎系膜细胞凋亡、坏死及增生的影响

目的:研究吡咯二硫氨基甲酸脂(PDTC)作为NF-κB核转录因子特异性抑制剂对大鼠系膜增生性肾炎,即抗胸腺细胞血清性肾炎(ATSN)系膜细胞(MC)凋亡、坏死及增生病变的影响。方法:利用兔抗大鼠胸腺细胞抗血清(ATS)复制大鼠ATSN模型,并将大鼠设为3组,即ATSN模型组、ATSN PDTC处理组和正常对照组。实验40min、24h和7d分别取各组大鼠肾皮质切片用末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)技术和光镜、电镜、免疫组化方法检查其肾小球内NF-κBp65的表达和MC凋亡、坏死及增生病变。结果:ATSN模型组实验40min时肾小球内NF-κBp65即开始表达,与对照组之间有显著差别(P<0.01),24h表达进一步增多,第7d时达到较高水平。而ATSN PDTC处理组7d时,不仅肾内NF-κBp65的表达明显低于ATSN模型组,且肾小球MC的增生及细胞外基质(ECM)的分泌也低于ATSN模型组,但用PDTC处理对ATSN大鼠其早期(40min及24h)MC的病变无抑制效应。结论:NF-κB特异性抑制剂PDTC对ATSN大鼠的肾小球继发增生病变有抑制作用。     

532例性病患者病原体检测分析

目的：摸清江苏部分地区性病病原体在性病感染人群中的分布情况,为制定防治措施提供依据。方法：对搜集的532例性病患者进行性病病原体分离和分类统计。结果：532例性病患者中单一病原体感染占68．42％,合并2种和3种感染的各占27．07％和4．51％,20－39岁年龄段发病较多,占84．96％,中学文化层次人群占69．36％,职业分布以个体户和工人较高,占52．82％,结论：江苏部分地区性病患者以单一感染和多重感染并存,性病感染与年龄,受教育程度和职业有关。     

日本血吸虫感染大鼠血清特异性IgG及IgG2a IgG2c同型水平的动态观察

目的观察日本血吸虫感染大鼠血清中虫卵和成虫特异性抗体同型 ＩｇＧ、ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ２ｃ的动态变化。方法ＥＬＩＳＡ。结果三种特异性抗体同型均有明显升高,巨变化趋势基本一致,于感染后第３～８周升高,约在１２周达高峰并维持至观察结束的第１４周。结论提示ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ２ｃ在日本血吸虫感染的免疫中可能具有一定的作用。