应用重组抗原(rSAG1)检测IgM抗体诊断弓形虫病的研究

目的以刚地弓形虫RH株重组主要表面抗原1作为检测抗原,建立检测弓形虫IgM抗体的rSAG1-ELISA.方法用Ni2 螯合柱纯化重组抗原rSAGI;以不同浓度的rSAG1的包被聚苯乙烯酶标条,阳性和阴性混合血清分别作1:100和1:200稀释,以辣根过氧化物酶标记的羊抗人IgM为二抗,采用正交试验确定rSAG1-ELISA的最佳检测条件;按其最佳检测条件分别对弓形虫IgM阳性和阴性混合血清重复测20次进行精确度的检测;采用抗体抑制试验检测其特异性;同时对用进口试剂盒筛得的35份弓形虫IgM阳性血清和57份弓形虫IgM阴性血清进行检测.结果 制备的rSAG1重组蛋白纯度在90%以上;rSAG1-ELISA的最佳检测条件为:rSAG1的包被浓度为2.5μg/m1,血清稀释度1:100,酶标记的羊抗人IgM 1:4 000稀释;用rSAG1-ELISA对混合弓形虫IgM阳性和阴性血清的重复检测表明:IgM阳性混合血清检测值的变异系数(CV值)为13.8%,IgM阴性混合血清的CV值为7.7%;灵敏度检测表明血清稀释度在1:50～1:200均可检出阳性;特异性试验的抑制率为62.0%;rSAG1-ELISA与进口试剂盒的总符合率为88.0%,其中阳性和阴性符合率分别为82.9%(29/35)和91.2%(52/57).结论 rSAG1-ELISA具有较好的灵敏度和特异性,与进口试剂盒相比有较高的符合率,表明该法对弓形虫病早期诊断具有较高的价值,可进一步推广应用.     

低分子肝素联合波立维治疗不稳定型心绞痛疗效观察

笔者在常规治疗的基础上应用低分子肝素联合波立维治疗不稳定型心绞痛 (UAP) 39例 ,旨在观察两药联用对UAP的疗效。1　临床资料1.1　一般资料　选择 2 0 0 0年 11月～ 2 0 0 3年 3月本院收治的 76例UAP患者 ,均符合 1979年WHO推荐的及 1994年在南京召开的有关UAP诊断治疗研讨会的诊断标准。其中初发劳力型 2 2例 ,恶化劳力型 18例 ,自发型 36例。劳力型心绞痛按严重程度分级 :Ⅱ级 15例 ,Ⅲ级 19例 ,Ⅳ级 6例。随机分为低分子肝素加波立维治疗组 (39例 )和常规治疗对照组 (37例 )两组。两组治疗前后的年龄、性别、心绞痛类型、心电图…     

白首乌的研究进展

白首乌是传统补益类中药材,具有补益肝肾、养血益精、强筋壮骨、乌须生发、抗衰老之功效,被历代医家奉为延年防老的珍品。近年来,国内学者对不同品种的白首乌进行了药理活性及物质基础的相关研究。现将白首乌近年来的研究新进展进行综述,通过对不同品种白首乌C21甾体总苷、苯酮类化合物结构和含量的差异,不同品种白首乌多糖类成分和营养物质含量的差异,以及不同化学成分的药理活性进行系统归纳,为进一步合理利用白首乌提供科学依据。     

刚地弓形虫RH株主要表面抗原1的基因克隆及原核表达

目的 从刚地弓形虫RH株基因组DNA中扩增出其主要表面抗原1(SAG1)全长的基因编码序列，构建重组原核表达载体并在大肠埃希菌中进行表达，为进一步研制弓形虫病免疫诊断试剂盒打下基础。方法 根据弓形虫RH株主要表面抗原SAG1的cDNA序列设计一对引物，利用聚合酶链反应(PCR)技术从RH株弓形虫基因组中扩增出SAGl的全长基因，将其克隆到载体pGEX-4T-3中，并通过基因测序加以证实；重新设计引物将其亚克隆至原核表达载体pET-32c中，在大肠埃希菌中经IPTG诱导表达。结果 从刚地弓形虫RH株基因组中成功扩增到1030bp的全长SAG1基因，该基因在原核系统中经诱导表达出一分子量约37000大小的融合蛋白，表达产物以包涵体的形式存在。结论 SAG1是弓形虫主要的表面抗原，原核表达的sAG1融合蛋白在弓形虫病的免疫诊断中具有明显的潜在应用价值。     

食道调搏术在诊断病窦中的应用(附24例临床分析)

病态窦房结综合症(SSS),在基层医院一般全凭临床症状、体征及阿托品激发试验诊断,目前各大医院多开展窦房结功能电生理检查以诊断此病.心电生理检查方法有创伤性和无创伤性两类,前者是经静脉送人3～4根电极导管,记录心脏不同部位的心腔内电图(包括希氏束电图).此法需要多导电生理记录仪、程控刺激器与X线增强设备,操作复杂,难以     

基于肠-肝-肾轴的肝纤维化与肾纤维化研究进展

纤维化是组织受到损伤后,组织内细胞外基质异常增生和过度沉积的病理过程。各类慢性疾病导致的损伤/炎症是纤维化发生的主要诱因。肝和肾的纤维化是较常见的脏器纤维化。近年来,肠道微生物群被证明与肝肾相关疾病的发展进程有密切关联,其内在机制可能与肠道微生物的组成变化以及肠道完整性等相关。肠-肝-肾三者之间通过内分泌和细胞信号通路等各种途径进行相互影响并促进肝和(或)肾纤维化的发展。本文基于肠-肝肾轴对肝纤维化与肾纤维化的相关研究进展进行综述,以期为诊疗肝肾纤维化提供新的策略和理论依据。     

白首乌C-21甾苷对肾纤维化大鼠的干预作用及其机制研究

目的观察白首乌C-21甾苷对单侧输尿管结扎所致的大鼠肾纤维化的干预作用,并探究其作用机制。方法 80只SD大鼠随机选取15只为假手术组,剩余大鼠进行单侧输尿管结扎制备大鼠肾纤维化模型,将造模大鼠随机分为4组,即模型组、阳性药氯沙坦钾(20 mg/kg)组及白首乌C-21甾苷高、低剂量(400、200 mg/kg)组,每组15只。各组大鼠于造模后第2天起,每天ig给药1次(10mL/kg),连续给药4周,假手术组与模型组大鼠ig给予等体积蒸馏水。干预28d后,每组取10只大鼠的肾组织,采用碱水解法检测肾组织中羟脯氨酸(Hyp)水平,采用HE和Masson染色检测病理损伤和纤维化程度,通过免疫荧光、Western blotting法检测转化生长因子-β1(TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达,通过实时荧光定量PCR(q RT-PCR)法测定肾组织中Ⅰ型胶原蛋白(collagen-Ⅰ)和collagen-Ⅲ mRNA表达水平。结果与模型组比较,白首乌C-21甾苷能明显改善肾纤维化大鼠的病变程度,减少炎性细胞浸润、纤维组织和胶原的增生,可以明显降低大鼠肾脏指数,降低肾组织中Hyp水平,并呈剂量依赖性(P0.05、0.01);免疫组化和Western blotting结果显示,白首乌C-21甾苷可以明显上调大鼠肾组织E-cadherin的表达水平,下调TGF-β1和α-SMA蛋白的表达水平(P0.05、0.01);qRT-PCR结果显示白首乌C-21甾苷可显著降低大鼠肾组织collagen-Ⅰ、collagen-Ⅲ mRNA表达水平(P0.01)。结论白首乌C-21甾苷对单侧输尿管结扎的大鼠肾纤维化具有明显的干预作用,其机制可能与抑制collagen-Ⅰ和collagen-Ⅲ的过度表达,下调TGF-β1、α-SMA蛋白高表达和上调E-cadherin蛋白低表达有关,通过调控肾小管上皮-间质转化,发挥抗肾纤维化的作用。