流式细胞术检测细胞周期实验条件的影响因素分析

［摘要］目的: 研究流式细胞术检测细胞周期的各个实验环节对结果的影响。方法: 应用流式细胞术检测经秋水仙素刺激后的人结肠癌细胞株,分析细胞周期的固定方式、细胞数量、固定温度、固定时间以及染色时间等环节对结果的影响。结果： 用PBS吹散后经纯乙醇固定的效果最佳;细胞数太多或太少时,影响检测结果和曲线的平滑程度,且变异系数（coefficient of variation,CV）值增大;固定后放置于常温影响检测结果,置于4℃或-20℃没有显著差异;固定后-20℃放置70 d内检测结果无明显差异;染色完成后2 h内检测结果无明显差异。结论： 1×106细胞沉淀用PBS吹散后经纯乙醇固定,放置于-20 ℃,70 d内检测,染色后2 h之内完成检测。     

肠出血性大肠杆菌O157:H7 EspA与IntiminC300融合蛋白的构建表达

目的构建表达肠血性大肠杆菌（EHEC）0157：H7Ⅲ型分泌蛋白EspA与紧密粘附素G端免疫保护性片断（Intindn C300）的融合蛋白（EspA-IntiminC300）。方法采用PCR技术从EHEC0157lH7基因组中扩增EspA的编码基因espA及IntiminC300的编码基因eaeC300，T-A克·隆后依次构建至表达载体pET-28a（＋），转化宿主细胞E．coliBL21（DE3），测序鉴定，IPTG诱导表达，SDS-PAGE检测其表达量及表达形式，亲和层析法纯化目的蛋白，免疫印迹分析免疫反应性。结果PCR法自EHEC0157tH7基因组中分别扩增出了约580bp（espA）和900bp（eaeC300）的目的片段，将二者融合构建了重组质粒pET-28a（＋）-espA-eaeC300，测序结果与理论预测值一致性为99．9％（1501／1502）。融合蛋白在工程菌中表达量约40％，PAGE初步测定目的蛋白的相对分子量（Mr）约54×10^3Da，破菌后电泳证实目的蛋白主要以包涵体形武表达，包涵体洗涤后纯化，获得目的蛋白纯度约90％。免疫印迹显示融合蛋白能分别与兔抗EspA和IntiminC300血清发生免疫反应。结论高效表达了融合蛋白（EspA-IntiminC300），此融合蛋白具有良好的免疫反应性和免疫原性，为研制EHEC0157：H7多亚单疫苗奠定了基础。     

冠状动脉内可吸收金属支架的研究进展

冠状动脉内支架植入是目前广泛应用的冠心病治疗手段,但支架内狭窄和晚期血栓形成影响冠状动脉支架远期疗效和安全性,长期应用抗血小板药物所带来的不良反应以及经济上给患者造成的负担,这些都限制了冠状动脉支架的进一步应用。生物可吸收金属支架具有与裸金属支架相当的支撑力及良好生物相容性,可有效降低再狭窄率和血栓形成,临床应用前景十分广阔。     

急性缺血性脑卒中患者血清微小RNA-590水平变化及意义

目的]探究急性缺血性脑卒中(AIS)患者血清微小RNA-590(miR-590)水平变化及与预后的关系。[方法]选取2019年2月—2020年10月接受静脉溶栓和动脉取栓治疗的176例AIS患者作为研究对象,根据治疗后90天的改良Rankin量表(mRS)评分将其分为预后良好组(n＝123;mRS评分0～2分)、预后不良组(n＝53;mRS评分3～6分)。用实时荧光定量PCR法检测AIS患者血清miR-590水平;用受试者工作特征(ROC)曲线评价miR-590预判AIS预后的价值;用Logistic回归分析AIS预后的风险因素。[结果]预后不良组的年龄、男性占比、糖尿病史占比、空腹血糖(FPG)、总胆固醇(TC)、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分和入院至溶栓时间(DNT)均高于预后良好组(P＜0.05)。按1∶1进行倾向性评分匹配后,治疗前预后不良组的miR-590相对水平低于预后良好组,预后不良组和预后良好组的治疗后miR-590相对水平均高于治疗前,治疗后预后不良组的miR-590相对水平升高程度高于预后良好组,差异均有统计学意义(P＜0.05)。治疗前miR-590预判AIS预后的ROC曲线下面积为0.793,高于miR-590差值(治疗前和治疗后血清miR-590相对水平的差值)(P＜0.001)。Logistic回归分析结果显示FPG、TC、NIHSS评分和DNT是AIS预后的独立危险因素(P＜0.05),治疗前血清miR-590水平是AIS预后的独立保护因素(P＜0.001)。[结论]AIS患者静脉溶栓和动脉取栓治疗前血清miR-590水平低与AIS预后不良有关。     

1例阴囊page’s病皮肤全切行腹部皮瓣移植术后护理

阴囊page’s病又称阴囊炎性癌或湿疹样癌,是一种老年男性恶性肿瘤,目前病因尚未明确,部分来自大汗腺肿瘤.来源内表皮内汗腺管,起病初期为小水泡皮疹,因搔抓破溃渗液,病后逐渐扩大累及阴茎根部、会阴处、局部表现发红或颗粒状慢性炎性硬结,也可因阴囊皮肤可出现瘙痒、糜烂、渗液、结痂等湿疹样损害,约有一部分患者可单侧双侧触及肿大腹股沟的淋巴结[1]。笔者近期在北京协和医院进修期间参与护理了1例阴囊page’s病例,行经皮肤全切术、双侧腹股沟淋巴结清扫加皮瓣转移术,术中、术后效果良好,护理中未出现并发症。现将护理体会介绍如下。1病例…     

中青年急性心肌梗塞患者康复期主要心理问题及护理对策

中青年急性心肌梗塞是指45岁以下青年无论何原因所致的急性心肌梗塞。此类患者在院内经过系统地抢救、治疗和护理，在面临即将康复出院及出院后的一定时期内，存在许多心理问题。为使患者愉快出院，尽早康复，我们对60例患者进行了心理调查，找出其主要心理问题，并采取了相应的护量对策，现报告如下。1对象及方法1．1对象本组病例为我科1993年至1996年5月住院的中青年急性心肌梗塞患者。经过系统的治疗，选取临床疗效为痊愈和显效的60例患者为调查对象。其中男57例，女3例；年龄19～30岁且回例，30～45岁49例；小学文化4例，中学44例，大学…     

公共卫生硕士(MPH)专业学位研究生培养中的产学研结合研究——以南京医科大学为例

随着我国经济社会的快速发展,迫切需要大批具有创新能力?创业能力和实践能力的高层次专门人才?与之相背离的是,现行高等教育管理体制下,研究生教育适应社会需求的能力差,与生产?科研和其他方面的联系少?很难利用各种社会力量和优势提高教育质量?因此,要想凸现非全日制公共卫生硕士教育的特色和核心竞争力,势必需要加强产学研合作教育,完善公共卫生硕士培养模式?     

小儿脑外伤后患儿康复护理的效果观察

目的:研究并探讨康复护理对小儿脑外伤患儿的护理效果。方法:选取2014年1月-2017年7月就诊于本院年龄≥5岁的小儿脑外伤患儿65例。按照护理方法不同将其分为对照组30例和观察组35例。对照组给予常规护理干预,观察组在常规护理的基础上实施康复护理。比较两组患儿的神经功能缺损评分、Fugel-Meyer肢体功能评分、运动功能评分、日常生活能力评分,并比较两组家长的负性情绪评分、护理满意度。结果:护理后,两组患儿神经功能缺损评分均低于护理前,且观察组低于对照组,比较差异均有统计学意义(P0.05);护理后,两组患儿Fugel-Meyer肢体功能评分、运动功能评分、日常生活能力评分均高于护理前,且观察组均高于对照组,比较差异均有统计学意义(P0.05);护理后,两组家长焦虑、抑郁评分均低于护理前,且观察组均低于对照组,比较差异均有统计学意义(P0.05);观察组家长的总满意率高于对照组(P0.05)。结论:在小儿脑外伤患儿中开展康复护理,可有效促进其神经功能修复,有利于改善患儿的肢体功能、运动功能、日常生活能力,还有利于减轻患儿家长的负性情绪,使患儿家长对护理服务更加满意。     

院校多媒体信息资源系统的建设与应用

为了加快军队院校训练现代化和信息化建设,适应军队院校教学改革的需要,2003年8月,上级确定我院为全军军事训练多媒体信息资源系统的建设单位之一,并为我院配发了<军队院校网络教学应用系统>平台,它是一个面向全军院校的分布式网络教学应用系统平台.经过一年多的建设与初步应用,已经构成了我院网络多媒体教学的基础.使全院网络多媒体教学跨上一个新台阶.