经尿道输尿管镜气压弹道碎石术的围手术期护理

2003年3月～2004年11月，我院采用经尿道输尿管镜气压弹道碎石术98例，疗效满意。现将护理体会介绍如下。     

糖尿病的基因治疗技术:大鼠胰岛素原基因真核细胞表达质粒构建与鉴定

目的:构建大鼠胰岛素原基因的真核细胞表达质粒pCMV/proinsulin并进行序列测定。方法:实验选用雄性SD大鼠1只,从大鼠胰腺组织中提取总RNA,通过RT-PCR法获得胰岛素原基因cDNA全长序列,并采用现代分子生物学技术,借助真核细胞表达质粒pCMV-Scriptvector具有多克隆酶切位点的特点,选择适当的限制性酶切位点(EcoRⅠ和HindⅢ),并使大鼠胰岛素原基因cDNA两端带有相同的酶切位点,利用其黏性末端进行定向克隆,从而将大鼠胰岛素原基因准确地插入到表达质粒pCMV上。结果:经RT-PCR法扩增并通过DNA核酸序列测定获得大鼠胰岛素原基因。经PCR法及酶切法初步筛选阳性克隆重组子,并进一步进行DNA核酸序列测定(双脱氧末端终止法),确定其序列与目的基因序列完全一致。结论:成功构建重组质粒pCMV/proinsulin,为进一步进行胰岛素原基因转染糖尿病大鼠和非胰岛β细胞,使之产生胰岛素、建立类胰岛β细胞系的研究奠定了扎实的基础。     

小鼠骨髓内破骨细胞诱导形成的实验观察

目的：建立骨髓间充质干细胞诱导培养成为破骨细胞的培养方法并进行初步的形态观察，为破骨细胞学及与其相关疾病的发病机制的研究提供更有意义的手段。方法：采用小鼠骨髓间充质干细胞通过1，25-(OH)2D3诱导分化为破骨细胞的培养方法，并观察原代成骨细胞对该方法破骨细胞形成及其功能的影响。根据是否加原代成骨细胞，分成未加成骨细胞、加成骨细胞二组，未加成骨细胞组是骨髓间充质干细胞直接诱导培养，加成骨细胞组是骨髓间充质干细胞与原代成骨细胞共同培养。分别培养6，9，12及15d，各组细胞到培养时间后取出进行TRAP染色阳性的多核细胞计数、骨片甲苯胺蓝染色及扫描电镜观察。结果：未加成骨细胞、加成骨细胞两组的骨髓间充质干细胞经培养后均出现破骨细胞，而且随着培养时间的延长，破骨细胞及骨片吸收陷窝的数目增多。培养相同时间的未加成骨细胞、加成骨细胞两组之间的破骨细胞及骨片吸收陷窝的数目差异无显著性意义。结论：通过1,25-(OH)2D3诱导骨髓中的间充质干细胞培养破骨细胞的方法是可行的，而且骨髓间充质干细胞诱导培养成破骨细胞时加入原代成骨细胞共同培养对破骨细胞的形成和骨吸收功能并无明显促进作用。     

甲状腺刺激抗体检测判断Graves病预后

甲状腺刺激抗体检测判断Ｇｒａｖｅｓ病预后刘超，张忠邦，蒋须勤，陈家伟，覃又文，刘翠萍甲状腺刺激抗体（ＴＳＡｂ）是与Ｇｒａｖｅｓ病（ＧＤ）发生、发展和复发密切相关的一类异常免疫球蛋白，检测这种抗体具有重要的临床价值￣［１￣４］。本研究重点研究ＴＳＡｂ作...     

脑干听觉诱发电位转颈试验对椎基底动脉供血不足的诊断意义

椎基底动脉供血不足(VBI)是中老年常见病、多发病,诊断往往根据临床症状,缺乏简便且准确的客观指标.脑干听觉诱发电位(BAEP)对诊断VBI有一定的帮助,但其阳性率低,限制了其对临床的进一步应用.我们2002年12月至2007年10月用BAEP检查结合转颈试验的方法研究了50例VBI患者,发现可以明显提高BAEP阳性率.报告如下.     

戊己散对腹腔注射甲氨蝶呤大鼠氧化应激及免疫状态的影响

目的观察戊己散对腹腔注射甲氨蝶呤大鼠氧化应激及免疫状态的影响。方法甲氨蝶呤按20 mg/kg剂量给予50只大鼠腹腔注射造模,另外取10只作为阴性对照组。造模后1周,将大鼠随机分为戊己散组和生理盐水组,每组20只,另10只处死,检测应激及免疫指标(作为治疗前水平),戊己散组给予相应水煎剂灌胃,每天2次;对照组给予等量生理盐水灌胃,每天2次,共2周。实验结束后处死大鼠,检测SOD、GSH、IL-6、IL-10、IgA、IgG、IgM、CD3~+、CD4~+、CD8~+水平。结果与阴性对照组比较,模型组大鼠血清SOD、GSH、IL-10水平显著降低(P0.05),IL-6水平显著增加(P0.05)。模型组大鼠免疫球蛋白及T细胞亚群显著低于阴性对照组(P0.05)。戊己散组及生理盐水组大鼠各指标均较用药前明显好转(P0.05),以戊己散组更显著(P0.05)。结论戊己散可有效改善甲氨蝶呤导致的应激及免疫低下状态。     

健康教育预防肾移植术后肺部感染的效果观察

肾移植是目前救治慢性肾衰竭最有效的方法,但肾移植术后由于免疫抑制剂的使用及病人预防感染意识缺乏等原因,易导致肺部感染的发生,特别是严重肺部感染并发急性呼吸窘迫综合征(ARDS),症状严重,病情复杂,进展迅猛,处理棘手,现已成为肾移植术后致病人死亡的最主要原因[1]。据统计     

大鼠胚胎胰腺发育后期基因表达谱的研究

目的：研究大鼠胚胎发育至第15.5和18.5天胰腺基因表达谱,探讨特异性基因表达在正常内外分泌胰腺发育及糖尿病中所起的作用.方法：①实验于2003-09/2004-06在南京医科大学生化与分子生物学实验室完成.选用SD大鼠,雌雄各10只,将雌雄鼠按1：2合笼,分别于胚胎发育至第15.5和18.5天,剖腹取出孕子宫,分离胚胎.②应用显微分离及提取技术获得胚胎发育不同阶段胰腺组织并提取RNA,采用高密度寡核苷酸芯片（Affemetrix芯片）对胚胎发育至第15.5天和第18.5胚胎胰腺进行基因转录水平分析,用生物信息学方法分析具体基因的表达情况.结果：胚胎发育至第18.5天与胚胎发育至第15.5天相比,差异表达2倍以上的基因共1 319条.其中表达上升的基因664条,表达下降的基因655条,功能已知基因占63%,表达序列标识占37%.控制胰腺细胞分化的转录因子明显下调,与功能代谢相关的转录因子有上升趋势,内外分泌酶类、激素类表达有上升趋势,骨架蛋白有下降趋势,与激素、酶类分泌相关的因子基本无表达.结论：大鼠胚胎胰腺发育至第15.5～18.5天,内分泌典型胰岛结构及外分泌腺泡、导管结构已基本形成,功能细胞分化基因表达下降,而细胞代谢调节功能基因表达上升,因此,在大鼠胚胎发育至第15.5天胰腺,功能细胞的代谢调节功能开始完善.     

纯化海藻酸钠-氯化钡微囊生物相容性及1型糖尿病微囊化胰岛移植的功能评价

背景海藻酸钠-多聚赖氨酸能引起机体的异物反应导致微囊内胰岛的功能失活,而氯化钡胶囊能否解决这一问题?目的研究纯化海藻酸钠-氯化钡微囊生物相容性以及微囊化大鼠胰岛生物学活性.设计以实验动物为研究对象的随机对照研究单位一所大学医院的内分泌科.材料本实验于2002-07/2002-12在南京医科大学第一附属医院内分泌实验室和动物房完成.Sprague Dawley(SD)大鼠、Wistar大鼠分别购自南京医科大学动物实验中心和上海动物实验中心,SPF级饲养.方法用自制微囊成囊仪,一步法制备纯化和未纯化海藻酸钠-氯化钡微囊,移植于正常SD大鼠腹腔内4周,观察其生物相容性.体外葡萄糖刺激试验和体内移植于链脲佐菌素(S眩)诱导的Wistar糖尿病大鼠观察微囊化胰岛生物学活性.主要观察指标①移植空微囊回收率;②微囊化胰岛胰岛素生物学活性检测结果;③组织学检查结果.结果移植4周后,纯化组微包囊回收率较未纯化组明显增高(P<0.05),并且形态完整、光滑,组织学检查未见纤维增生.体外培养纯化海藻酸钠-氯化钡微囊化胰岛具有良好的分泌功能,与未微囊化胰岛功能差异无显著性意义(P>0.05).微囊移植给STZ诱导的Wistar糖尿病大鼠,移植物存活时间大于6周.结论纯化海藻酸钠-氯化钡微囊具有良好的生物学活性和组织相容性,从而为糖尿病胰岛移植供体的解决提供理论依据.