中国地鼠线粒体DNA 16S rRNA基因序列分析及分子系统发育研究?

目的 实验通过克隆分析中国地鼠16S基因的部分序列，对中国地鼠16S基因的结构和功能进行初步探索和揭示。方法 从GeneBank中已报到的啮齿动物16S基因保守区设计一对引物，进行PCR扩增，测序。用Blastn与Genbank中7种啮齿类动物的16S基因进行序列比较，分析其碱基组成及变异情况，并用邻接法(NJ)、非加权组平均法(UPGMA)构建分子系统树，在分子水平上探讨中国地鼠和其它啮齿类动物的进化关系，对中国地鼠的种属地位进行了进一步验证。结果 获得了中国地鼠线粒体16S基因的部分序列；进化树表明，中国地鼠、金黄地鼠与欧洲仓鼠先聚为一支，小鼠与大鼠先聚为一支，东方田鼠、台湾田鼠与东欧田鼠先聚为一支。结论 中国地鼠和金黄地鼠的亲缘关系最近，与传统的分类地位基本吻合。     

山医群体近交系中国地鼠血液生理生化指标的测定分析

目的 对山医群体中国地鼠近交A、E家系主要血液生理、生化和血清电解质指标进行检测分析.方法 对山医群体中国地鼠近交A、E家系成年动物进行空腹采血,常规方法测定13项血液生理、12项生化以及4项电解质指标,分别对相同性别不同家系间和同一家系不同性别间指标进行统计分析.结果 相同性别A、E家系间动物血小板(PLT)、中间细胞数(MID)、谷丙转氨酶(ALT)、总胆固醇(TC)、总胆红素(TBiL)、肌酐(Cr)和血钾(K)差异有显著性;相同家系雌、雄动物间PLT、TBiL和尿酸(UA)差异有显著性.结论 A、E家系动物间产生了一定的血液生理、生化性状的分离.     

甘丙肽重构基因GAL(intronⅡ)的克隆及其过表达转基因载体的构建

目的克隆甘丙肽重构基因GAL(intronⅡ),构建小鼠神经系统特异性表达甘丙肽(galanin,GAL)的转基因载体pUC18/PDGF-β-promoter/GAL(intronⅡ),为制备GAL转基因小鼠做准备。方法通过常规PCR、RT-PCR及重叠延伸PCR(overlap extension PCR,OE-PCR)扩增出插入GAL第二内含子的GAL全长cDNA的重构基因GAL(intronⅡ),将GAL(intronⅡ)克隆入T载体进行酶切、测序鉴定;同时从psisCAT6α中切下血小板源性生长因子β链(platelet-derived growth factor beta polypeptide,PDGF-β)启动子片段连接到空载体pUC18上构建出重组载体pUC18/PDGF-β-promoter;然后将GAL(intronⅡ)定向克隆于pUC18/PDGF-β-promoter下游,构建转基因载体pUC18/PDGF-β-promoter/GAL(intronⅡ)。结果 PCR和限制性内切酶分析鉴定,表明获得转基因载体pUC18/PDGF-β-promoter/GAL(intronⅡ)。通过对重构基因GAL(intronⅡ)的GALcDNA和第二内含子序列测序证实其与GenBank中的标准序列一致,GAL(intronⅡ)中第二内含子插入的位置准确,且无移码。结论使用重叠延伸PCR扩增重构基因GAL(intronⅡ)并成功构建转基因载体pUC18/PDGF-β-promoter/GAL(intronⅡ),为转基因小鼠制备奠定一定的实验基础。     

地方医科大学实验动物管理工作水平评价指标体系的构建

目的构建地方医科大学实验动物管理工作水平评价指标体系,为高校实验动物管理工作的评价提供参考。方法根据研究主题确定咨询专家人选37人,采用Delphi法进行问卷调查和统计分析。结果两轮咨询问卷回收率分别为70.27%和76.92%。权威系数为0.855;第二轮指标体系的协调系数为0.486。结论本次研究构成的地方医科大学实验动物管理工作水平评价指标体系是可靠的。     

医学院校本科教学中开设实验动物学的探讨

医学院校学生专业的特殊性决定了他们在学习、工作和科研中不可避免地要接触实验动物和开展动物实验,这就要求学生必须了解一些实验动物学基础知识.从实验动物学对医学研究的意义,医学院校本科生开设实验动物学选修课的必要性以及可行性几个方面进行分析,提出医学院校本科教学中应开设实验动物学课程.     

受精卵最佳显微注射时间的探索

目的探讨最佳显微注射受精卵的时间。方法对小鼠诱导超排卵后,在不同时间点采集受精卵,观察采集到受精卵的不同阶段中雄原核的状态,确定受精卵出现雄性原核的最佳时间。结果在注射人绒毛膜促性腺激素(HCG)后的23-25 h,出现雄性原核的受精卵所占的百分率达到75%以上,此时雌雄原核清晰可见,受精卵雄原核较大。结论在注射HCG后23-25 h的受精卵最适合进行显微注射。     

五味子乙素对染矽大鼠肺组织MAPKs和NF-κB信号转导通路的影响

目的 探讨五味子乙素(Sch-B)对SiO2致大鼠肺损伤过程中肺组织丝裂素活化蛋白激酶(MAPKs)和核因子-κΒ(nuclear factor-κΒ,NF-κΒ)信号转导通路的影响.方法 92只大鼠随机分为对照组(20只)、染尘组(30只)、Sch-B干预1组(24只)和Sch-B干预2组(18只).非暴露气管法建立大鼠矽肺模型,Sch-B干预1组造模后第1天起连续灌胃(80mg/kg Sch-B)21 d,Sch-B干预2组造模后第8天起连续灌胃(80mg/kg Sch-B)21 d.Sch-B干预1组在第3、7、14和21天,Sch-B干预2组在第14、21和28天随机取6只,在第3、7、14、21和28天随机取对照组4只,染尘组6只,处死取其肺组织.右肺用于蛋白质提取,通过免疫印迹(Western bloting)法测定肺组织MAPKs家族中细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)和p38的磷酸化水平;用免疫组化法测定NF-κΒ核转移率.结果 Sch-B干预1组第3、7、14和21天,Sch-B干预2组第21和28天肺组织ERK1/2磷酸化水平(0.974±0.169、0.987±0.149、0.920±0.092、0.884±0.078、1.167±0.083、1.002±0.060)均明显低于染尘组,差异均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01);Sch-B干预1组在第7天肺组织JNK1磷酸化水平达到最高峰后持续下降,与染尘组比较,差异有统计学意义(P＜0.01),而Sch-B干预2组第14、21和28天肺组织JNK1磷酸化水平(0.882±0.064、0.802±0.061、0.792±0.015)均低于染尘组,差异有统计学意义(P＜0.01);Sch-B干预1组第3天p38磷酸化水平为0.309±0.045,高于染尘组,Sch-B干预1组和2组第14天p38磷化水平为0.667±0.072和0.650±0.066,均明显低于染尘组,差异有统计学意义(P＜0.01).Sch-B干预1组大鼠肺组织第3、7、14和21天NF-κΒ核转移率为(13.54±5.36)%,(21.01±6.43)%,(30.55±6.44)%,(37.39±9.32)%,Sch-B干预2组第21天核转移率为(44.33±22.88)%,明显均低于染尘组,差异有统计学意义(P＜0.01),而在第28天Sch-B干预2组核转移率为(58.52±14.57)%,明显高于染尘组,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 ch-B对SiO2诱导的肺组织损伤过程中MAPKs家族3个成员活化都有一定的抑制作用.在染矽初期给予Sch-B干预可抑制NF-κΒ活化.Sch-B对SiO2诱导的大鼠肺损伤保护作用可能通过MAPKs和NF-κΒ信号转导通路.     

山医群体中国地鼠近交E家系RAPD分析

目的　分析山医群体中国地鼠E家系的遗传纯度。方法　应用经过筛选的 3 1条随机引物对中国地鼠E家系 12只个体基因组DNA进行RAPD扩增 ,计算近交个体间的相似系数。结果　所有样品的相似系数0 943 1到 0 9978之间变动 ,平均相似系数为 0 9749,聚类分析得到了这些个体的同源树资料。结论　山医群体E家系有较高的遗传纯度