手术室管道滑脱风险评估表的研制与应用

目的探讨手术室管道滑脱风险评估表的研制与应用效果。方法根据手术室管道最易滑脱的四个阶段中存在的具体护理问题,综合考量设定相应分值。每个阶段的最高评分为12分,≥8分者视为该阶段的管道滑脱高危风险者,应根据相应阶段的护理措施实施预见性护理。结果使用手术室管道滑脱风险评估表,针对各阶段手术室管道护理中的管道滑脱风险采取相应的护理措施后,大大降低了手术室术后患者管道滑脱的不良护理事件。结论对手术后留置引流管的患者使用管道滑脱风险评估表,根据评估结果,实施相应的预见性护理措施,能有效地预防手术室管道滑脱不良护理事件的发生。     

胰腺癌分子靶向治疗的研究进展

随着对胰腺癌细胞分子生物学特性的深入了解,靶向治疗被认为是很有前景的治疗方法。至今,虽然其在临床前及早期临床试验中显示出较好的抗肿瘤活性,但多数靶向药物治疗胰腺癌的Ⅲ期临床试验结果并不理想。胰腺癌细胞的分子异质性可能是导致药物治疗失败的原因。     

二甲双胍对三阴性乳腺癌细胞作用的实验研究

目的探讨二甲双胍对三阴性乳腺癌的作用及可能机制。方法不同浓度的二甲双胍作用三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231后,采用MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blot技术检测ERK1/2、pERK1/2的表达水平,将肿瘤细胞接种裸鼠后给予二甲双胍治疗,观察肿瘤组织的抑瘤率。结果不同浓度的二甲双胍与乳腺癌MDA-MB-231细胞共培养后,随着二甲双胍浓度的逐渐增加,MDA-MB-231细胞的增殖抑制也逐渐增加。经统计学分析发现,二甲双胍20mM组与对照组比较;二甲双胍30mM组与20mM组、对照组比较;二甲双胍40mM组与30mM组、20mM组、对照组比较;二甲双胍50mM组与40mM组、30mM组、20mM组、对照组比较,差异均有统计学意义(t分别=16.04;4.36、29.24;21.33、23.46、40.61;3.70、31.80、33.16、64.17,P均<0.05)。乳腺癌MDA-MB-231细胞经二甲双胍处理后,细胞凋亡率(27.31%)明显高于对照组(2.36%),两者比较,差异有统计学意义(t=29.93,P<0.05)。经二甲双胍处理的MDA-MB-231细胞,其ERK1/2的磷酸化水平降低。将乳腺癌MDA-MB-231细胞接种于裸鼠,经二甲双胍治疗后,肿瘤组织的抑瘤率明显高于对照组,两者比较,差异有统计学意义(t=37.63,P<0.05)。结论二甲双胍对三阴性乳腺癌细胞有抑制作用,其机制可能是抑制EGFR信号通路的分子活化。     

血管生成素-Ⅱ在胃癌中的表达及其意义

目的：研究血管生成素-Ⅱ（Ang-Ⅱ）在胃癌和癌周正常组织中蹬表达及影响其表达的病理因素。方法：采用RT-PCR和免疫组化法检测72例胃癌组织和癌周正常组织中Ang-Ⅱ和血管内皮生长因子（VEGF）的表达。结果：Ang-Ⅱ在胃癌组织中的表达与癌周正常组织相比有显著差异（P<0.01）。在肿瘤组织中，Ang-Ⅱ和VEGF的表达相关（r=0.996，P<0.05）。Ang-Ⅱ的表达与肿瘤的分期（r=0.792，P<0.01）、血管侵犯（r=0.829，P<0.01）相关，而与肿瘤组织的分化类型（r=0.289，P=0.250）、淋巴结转移程度（r=0.290，P=0.259）、浆膜层侵犯（r=0.374，P=0.126）无关。结论：Ang-Ⅱ在胃癌中的表达与VEGF的表达、肿瘤的分期、血管侵犯相关。     

MAGE-3抗原冲击外周血单个核细胞诱导抗肿瘤免疫应答

MAGE 3基因的表达产物是一种肿瘤排斥抗原 ,在抗肿瘤免疫治疗中可作为靶抗原。本实验以原核表达GST MAGE 3融合蛋白 ,体外观察MAGE 3蛋白抗原冲击外周血单个核细胞 (Pe ripharalbloodmononuclearcells,PBMCs) ,能否诱导特异性的抗肿瘤免疫应答。根据MAGE 3cDNA序列 ,设计引物 ,通过RT PCR从胎盘组织中扩增MAGE 3全部编码序列 ,片段长度 95 7bp ,将该片段克隆至pGEX 4T 2原核表达载体。重组质粒转化大肠杆菌BL 2 1,经IPTG诱导表达 ,表达产物经电泳证实后再用GlutathioneSepharose 4B纯化 ,蛋白纯度在 90 %以上。纯化的蛋…     

结肠癌组织中p16/MTS1基因5′CpG岛甲基化研究

:〔目的〕研究结肠癌组织中p16基因5′端CpG岛异常甲基化现象。〔方法〕采用甲基化特异PCR方法(MSP)检测了28例结肠癌和20例癌旁正常组织标本。〔结果〕28例结肠癌组织中有9例5′端CpG岛异常甲基化(32%),而20例正常组织中均阴性。〔结论〕p16基因5′端CpG岛异常甲基化在人类结肠癌的发生中可能起一定作用。     

阿魏酸抑制A549肺癌移植瘤生长及其机制研究

目的探究阿魏酸对A549裸鼠肺癌移植瘤的抑制作用及其可能机制。方法将40只构建成功的肺癌移植瘤BALB/c裸鼠采用随机数字表法分为模型对照组、阿魏酸25mg/L组、阿魏酸50mg/L组和阿魏酸100mg/L组4组,每组10只,通过腹腔注射给药。通过计算肿瘤的瘤体积,称重瘤体质量,计算各组抑瘤率;qRT-PCR检测移植瘤组织中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）的mRNA表达水平,Westernblot法和免疫组化法检测移植瘤组织中mTOR、增殖蛋白Ki-67和凋亡蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）的蛋白表达水平。结果与模型对照组相比,不同剂量的阿魏酸（25、50和100mg/L）组裸鼠的移植瘤组织生长受到抑制,抑瘤率分别为32.82%、43.75%和62.51%。与模型对照组相比,不同剂量的阿魏酸组mTOR的mRNA和蛋白表达水平均下降（均P＜0.05）,Ki-67蛋白表达水平均下降（均P＜0.05）,Caspase-3蛋白表达水平均升高（均P＜0.05）。结论阿魏酸对A549肺癌移植瘤生长具有显著抑制作用,可能与下调mTOR表达,抑制Ki-67蛋白表达和促进Caspase-3蛋白表达有关。     

姜黄素抑制Hedgehog信号诱导胃癌细胞凋亡

目的探讨姜黄素对胃癌细胞MKN45的作用及可能机制。方法不同浓度的姜黄素作用胃癌细胞MKN45后,采用MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,Westernblot技术检测索尼克刺猬信号(Shh)、脑胶质瘤相关癌基因1(GLI1)的表达水平。结果不同浓度的姜黄素与胃癌细胞MKN45共培养后,随着姜黄素浓度的逐渐增加,MKN45细胞的增殖抑制也逐渐增加,经统计学分析发现,姜黄素5μmol/ml组与对照组比较,姜黄素10μmol/ml组与对照组比较,姜黄素20μmol/ml组与10μmol/ml组、5μmol/ml组、对照组比较,差异均有统计学意义(t分别=16.24、14.57、21.16、25.00、38.20,P均<0.05)。胃癌细胞MKN45经姜黄素处理后,姜黄素20μmol/ml组的细胞凋亡率与10μmol/ml组、5μmol/ml组、对照组比较,差异均有统计学意义(t分别=57.05、59.93、61.98,P均<0.05)。经姜黄素处理的MKN45细胞,Shh和GLI1表达均明显降低,与对照组比较,差异均有统计学意义(t分别=3.76、3.55,P均<0.05)。结论姜黄素能通过抑制Hedgehog信号通路,抑制胃癌细胞的增殖,诱导其凋亡。     

非小细胞肺癌表皮生长因子受体第19、21号外显子突变研究

目的分析非小细胞肺癌（NSCLC）患者肺癌组织中的表皮生长因子受体（EGFR）第19、21号外显子（exon19、21）的突变率、突变类型及其与患者临床特征的关系。方法从90例可手术的NSCLC患者的肺癌组织中提取DNA,扩增EGFR基因的19和21号外显子基因片段,从正反两个方向对进行DNA测序和分析。结果90例NSCLC患者中检测到29例（32．2％）有EGFR基因的经典突变。29例突变中包括16例（55.2％）发生于exon 19上的缺失突变,13例（44．8％）发生于exon 21上的替代突变。腺癌和细支气管肺泡癌的突变率明显高于鳞癌[13／34（38．2％）,（9／10）90．0％与7／46（15.2％）,P〈0.001];非吸烟者的突变率高于吸烟者[18／36（50．0％）与11／54（20．4％）．P〈0.001];女性突变率也高于男性[15／25（60．0％）与14／65（21．5％）．P〈0．01];而突变率与患者年龄及分期无关（P均〉0．05]。另外,47例（52．2％）患者存在同义突变S749S（A 2244 G）。鳞癌患者突变率高于腺癌或支气管肺泡癌（P〈0．05）,而其突变率与患者性别、年龄、吸烟状况、TNM分期无明显相关（P〉0．05）。结论NSCLC患者EGFR的突变率较高,总突变率为3212％。腺癌（尤其是细支气管肺泡癌）、不吸烟及女性患者是预测突变的四个重要因素。发现同义突变,并且与患者病理类型有关,在鳞癌中多见,与其他因素无关,并探讨其遗传生物学效应,初步猜测可能与EGFR酪氨酸激酶抑制剂（EGFR—TKI）耐药相关。     

姜黄素通过抑制Ras-ERK和Shh-GLI1信号诱导胰腺癌细胞凋亡

目的: 探讨姜黄素对胰腺癌PANC-1细胞的影响及可能机制。方法: 不同浓度的姜黄素作用于PANC-1细胞后,采用MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blotting检测K-Ras、细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)、磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK1/2)、Sonic hedgehog(Shh)和胶质瘤相关癌基因同系物1(GLI1)的表达水平。结果: 不同浓度的姜黄素与PANC-1细胞共培养后,浓度为30 mmol/L的姜黄素组能明显抑制PANC-1细胞的增殖, 与其余各组相比,差异显著(P<0.01)。PANC-1细胞经30 mmol/L姜黄素处理后,其细胞凋亡率(37.57%)明显高于对照组(4.62%)(P<0.01)。经姜黄素处理的PANC-1细胞,其K-Ras、p-ERK、Shh和GLI1表达明显低于对照组(均P<0.01)。结论: 姜黄素通过抑制Ras-ERK和Shh-GLI1信号通路的活化,抑制胰腺癌PANC-1细胞增殖,并诱导细胞凋亡。