新型肝癌组织的体外三维培养模型

目的:利用肝癌组织进行体外的三维（three-dimension，3D）组织块培养，通过添加PD98059和霍乱毒素（cholera toxin，CT）优化培养条件，建立一种高活性的肝癌组织体外培养模型。方法:收集中山大学肿瘤防治中心肝胆科的肝癌组织标本，经清洗、冻存、复苏等处理后分为对照组、PD组、CT组、PD+CT组，同时进行体外的二维（two-dimension，2D）和三维培养。各组组织采用DNA断裂的原位末端标记法（TUNEL）检测组织细胞凋亡情况，qRT-PCR检测BCL-2、BID、Caspase 3、Cyclin D1、CDK2、ELK-1、C-FOS、C-MYC、C-JUN等相关基因的mRNA表达水平，免疫荧光染色检测BCL-2和cleaved caspase-3蛋白表达情况，筛选并确定最优的体外培养方法。结果:3D培养组的组织细胞凋亡均少于2D培养组；PD98059通过上调BCL-2蛋白的表达，下调cleaved caspase-3蛋白的表达，激活MEK/ERK下游基因，从而减少体外培养的组织细胞凋亡，增强其抗凋亡能力；霍乱毒素通过上调Cyclin D1、CDK2的基因表达，促进其增殖。结论:我们开发了一种新型肝癌组织的体外三维培养模型，它可以作为进一步的药物试验和人源性异种移植(PDX)模型的工具。     

毒理功能检测实验室信息管理系统的研发

目的为推动山东疾病预防控制中心毒理功能检验各环节标准化管理,提高工作效率和分析数据质量,降低运行成本,开发了"实验室信息管理系统"。方法通过分析质量管理体系中对"人、机、料、法、环"等要素的要求,结合实际工作,对所有必须采用计算机进行数据管理的要素进行了汇总和统计分析,根据各要素的特点进行有针对性的模块设计。结果成功设计开发了山东疾病预防控制中心毒理功能检测实验室信息管理系统。结论该信息管理系统在山东疾病预防控制中心毒理功能检测工作中起到质量控制和量化管理作用。     

女性绝经后骨质疏松症阿仑膦酸钠联合骨化三醇治疗 的疗效

目的分析女性绝经后骨质疏松症患者应用阿仑膦酸钠联合骨化三醇治疗的效果。方法资料随机选自2009年9 月一2012年12月在本院诊治的PMO患者72例,按照年龄分组为A组、B组与C组,其中A组年龄50 -59岁20例,B组年龄 60 -69岁30例,C组年龄70 -79岁22例,均予以阿仑磷酸钠联合骨化三醇,比较三组治疗前后VAS评分、TRACP-5b、BLAP 骨代谢生化等指标。结果予以药物前三组VAS评分、TRACP-5b、BLAP骨代谢生化指标,随年龄增长呈正相关性（P < 0.05),骨密度值BMD随年龄增长呈负相关性（P <0. 05);治疗后三组VAS评分均有下降,A组下降的幅度均比B、C组多,B 组下降的幅度比C组多（P <0.05);三组骨密度值BMD均有提髙,A组上升幅度,均比B、C组多（P <0.05,P <0. 01),B组上 升幅度比C组多（P <0.05);三组TRACP-5b、BLAP骨代谢生化指标均降低,A组降低幅度,均比B、C组多（P <0.05,P <0..01）, B组降低幅度比C组多（P <0. 05)。结论不同年龄女性绝经后骨质疏松症应用阿仑膦酸钠联合骨化三醇的效果均 较显著,且疗效与年龄增长呈现负相关性。     

以技能竞赛引领中职护生职业行为习惯养成教育

"普通教育有高考,职业教育有大赛",职业技能大赛在更新职业教育教学理念、教学方法和教学手段,提升中职教育吸引力的作用已日益凸显。作为指导教师,笔者在校级、市级、自治区级中等卫生职业学校学生护理操作技能竞赛的过程中,从选手的选拔、培训到带队参赛,将护士职业行为规范即护士的仪表与举止、护士的语言行为和非语言行为等方面[1]贯穿始终。     

山东省居民传染病相关知识调查

目的了解山东省居民对传染病相关知识的知晓情况。方法全省各市各抽取1个县(市、区)作为调查点,共确定17个调查点,其中城市和农村调查点分别为8个和9个。每个抽查点随机抽取2个乡镇或街道办事处,各乡镇或街道办事处再随机抽取2个行政村或居委会进行入户问卷调查。调查对象为17市15～69岁常住人口。每个调查点调查500人。调查数据使用EpiData数据库录入,采用SAS9.2统计软件进行分析。结果山东居民传染病相关知识总体知晓率为59.43%,其中城市与农民居民的知晓率分别为68.70%和52.42%。结论调查结果显示,山东省居民对传染病相关防治知识的了解仍较少,但略高于全国平均水平。     

结核分枝杆菌MPT64蛋白适配子的筛选与鉴定

目的 利用指数富集配体系统进化(SELEX)技术筛选能与结核分枝杆菌分泌蛋白MPT64特异性结合的寡核苷酸适配子,寻找早期诊断结核病的方法.方法 体外合成随机单链DNA(ssDNA)文库,以MPT64蛋白为靶物质,采取SELEX技术进行12轮筛选,将适配子库克隆、测序后,用DNAMAN软件对其结构进行分析,经生物素-链亲和素-辣根过氧化物酶显色系统测定亲和力,并利用捕获适配子与检测适配子组成的"三明治"夹心法对获得的适配子进行初步验证.将13个非结核分枝杆菌菌株和BCG菌株作为阴性组计为0,将结核分枝杆菌和牛结核分枝杆菌组作为阳性组计为1,采用MedCalc软件分析受试者操作特征曲线,确定最佳阳性判定值,并构建散点图.结果 经12轮筛选后,随机挑选15个适配子与MPT64蛋白的亲和性进行分析,吸光度值为0.492～1.243,73.3％的适配子的吸光度值在1.0以上;二级结构分析显示,适配子与MPT64蛋白亲和性的基础主要是大口袋茎环结构,口袋与环之间的茎桥含有不同数量的GC碱基对;"三明治"夹心法对阴性组[非结核分枝杆菌标准菌株及卡介苗(BCG)株]和阳性组(结核分枝杆菌实验室H37Rv株及临床株、牛结核分枝杆菌标准株)共47个菌株培养上清的检测结果显示,在临界(cut-off)值为0.61时,H37Rv、牛结核分枝杆菌组为阳性,BCG株为阴性;阴性组标本的阴性检出率为85.7％,阳性组标本的阳性检出率为87.9％,表现出一定的检测价值.结论 已初步筛选到与MPT64蛋白具有高亲和性的DNA适配子.     

孤雌胚胎干细胞来源的诱导多能干细胞的建立及对印记基因表达的影响

目的通过诱导多能干细胞(i PSCs)技术重编程孤雌胚胎干细胞,探讨i PSCs技术对孤雌胚胎干细胞的多能性及印记基因的影响。方法从孤雌激活的囊胚中建立了孤雌胚胎干细胞;利用反转录病毒将多能性转录因子转入孤雌胚胎干细胞中,建立孤雌i PS细胞。结果建立的孤雌来源的i PS细胞体内外分化能力与孤雌胚胎干细胞的差别无显著性;Real-time PCR结果显示,孤雌i PS细胞母源印记基因的表达明显高于孤雌胚胎干细胞,父源印记基因表达下降,多能性基因表达升高。结论 i PSCs技术能影响基因的表达,尤其是印记基因,印记使其更接近于正常受精来源的胚胎干细胞中印记基因水平。     

游离胸腹联合皮瓣修复全足皮肤缺损1例

病例 男性，38岁。2008年12月21日，因工作时被机器绞伤，致右足皮肤严重毁损撕脱伤1h急诊入院。局部检查：右足自踝关节平面前上方约4cm斜向后下至足跟后上方约3cm以远全足皮肤缺损，第4、5跖趾关节脱位伴骨外露，第1、2、3趾骨外露，伸趾肌腱外露软组织挫伤。入院后经积极术前准备，急诊行清创术：将右踝关节皮肤创缘修整，直至皮缘有新鲜渗血，将创面污染及挫伤严重组织清除，彻底止血，切除1—5趾趾骨，于足踝部寻找出胫前动脉、胫后动脉及其伴行静脉断端待用。     

两种剂量辛伐他汀治疗急性脑梗死的疗效及安全性比较

目的 比较两种剂量的辛伐他汀治疗脑梗死的临床疗效及安全性.方法 将180例脑梗死患者随机均分为对照组和观察组.均予降低颅内压与改善脑水肿、调整血压、降纤、抗凝、神经保护、溶栓、对症、支持等治疗,同时对照组睡前顿服辛伐他汀20mg/d,观察组睡前顿服辛伐他汀40 mg/d,疗程均为4周.结果 两组患者治疗后神经功能缺损程度评分均有所改善,观察组效果更加显著(P＜0.05).总有效率为88.89%,优于对照组的77.78%(P＜0.05),但两组不良反应差异无统计学意义(P＞0.05).结论 大剂量辛伐他汀治疗急性脑梗死比常规剂量有更好的疗效且安全,建议对无他汀类药物禁忌证患者在严密监测下增大药物剂量,以取得更好的疗效.     

利多卡因在无痛人流术中应用的护理心得

目的探讨利多卡因在无痛人流术中的应用。方法针对无其他系统疾病的1000余例行无痛人流术的患者随机分为观察组和对照组。结果能有效地减少注射痛的发生。减少麻药的使用量,减少对神经系统的损伤。患者清醒时间缩短,有效的减少了术后的不安全因素,降低术后子宫收缩痛的敏感性。差异有统计学意义。结论利多卡因在无痛人流术中应用值得进一步推广及探讨。