腹腔镜辅助低位Ⅰ期直肠癌切除的远端切缘长度对远期预后的影响

目的:探究腹腔镜辅助Ⅰ期低位直肠癌根治性切除术中远端切缘长度对远期预后的影响。方法:回顾分析2011年1月至2013年12月收治的86例Ⅰ期低位直肠癌患者的临床资料,标本福尔马林固定后,根据病理科测量的远端切缘长度,分为A组(远端切缘<1 cm+吻合环)、B组(远端切缘≥1 cm+吻合环)与Miles组,对比分析3组5年无瘤生存率、5年总生存率。结果:Ⅰ期低位直肠癌,Miles组与B组相比,5年无瘤生存率(94.7%vs. 94.7%,P=0.794)、5年总生存率(97.1%vs.94.4%,P=0.446)差异无统计学意义;与B组相比,A组5年无瘤生存率(69.6%vs. 94.7%,P=0.020)、5年总生存率(80.6%vs. 94.4%,P=0.042)较差。结论:远端切缘长度是影响低位直肠癌远期预后的重要因素,低位直肠癌的保肛治疗中需保证远端切缘长度≥1 cm(标本固定后),外科医生术中离断肠管前应预留更长的距离。     

正常人外周血淋巴细胞凋亡受体的表达与细胞凋亡的关系

本研究检测凋亡受体Fas、TNFRⅠ、TNFRⅡ在人外周血淋巴细胞（PBL）增殖过程中的表达情况及其细胞周期特异性,并探讨其与凋亡受体途径介导的细胞周期特异性细胞凋亡的关联性。应用双参数流式细胞术检测人外周血淋巴细胞在G0期和经植物凝集素刺激（PHA）进入细胞周期后Fas、TNFRⅠ、TNFRⅡ的表达情况以及细胞周期特异性,同时检测肿瘤坏死因子-α、抗Fas抗体诱导人外周血淋巴细胞的凋亡。结果表明：经植物凝集素刺激24小时后的外周血淋巴细胞Fas、TNFRⅠ、TNFRⅡ表达率较G0期外周血淋巴细胞分别增加了（35.55±6.63）%,（30.63±2.66）%,（26.62±5.14）%,均具有显著性差异（P〈0.01）,而且主要表达在G1期;未经植物凝集素刺激的外周血淋巴细胞停留在G0期,TNF-α和anti-Fas诱导后没有发生凋亡,而刺激后进入细胞周期的淋巴细胞经TNF-α和anti-Fas诱导后发生凋亡,其凋亡主要在G1期。结论：凋亡受体在外周血淋巴细胞中的表达与凋亡受体途径介导的细胞凋亡有明显的量效关系,凋亡受体途径介导细胞凋亡的细胞周期特异性与凋亡受体表达的细胞周期特异性有关,细胞凋亡的发生与细胞是否进入细胞周期有关。     

腹腔镜胃癌根治术819例术后早期并发症的分析及防治

目的分析腹腔镜胃癌根治术并发症的发生情况,探讨提高手术安全性的方法。方法总结我院2010年1月1日至2013年12月31日819例腹腔镜胃癌根治术患者术后早期1个月内的临床资料,分析并发症发生情况。结果 819例腹腔镜胃癌根治术患者共发生术后早期并发症73例,发生率8.9%,死亡3例,死亡率0.4%。术前合并症、手术者经验、手术时间和淋巴结转移情况与腹腔镜胃癌根治术术后并发症的发生相关。结论腹腔镜胃癌根治术具有较高的安全性,严格掌握手术适应证,术中规范操作,术后细致管理,可有效预防腹腔镜胃癌根治术并发症的发生。     

DNA damage response in resting and proliferating peripheral blood lymphocytes treated by camptothecin or X-ray

DNA damage response (DDR) in different cell cycle status of human peripheral blood lymphocytes (PBLs) and the role of H2AX in DDR were investigated. The PBLs were stimulated into cell cycle with phytohemagglutinin (PHA). The apoptotic ratio and the phosphorylation H2AX (S139) were flow cytometrically measured in resting and proliferating PBLs after treatment with camptothecin (CPT) or X-ray. The expressions of γH2AX, Bcl-2, caspase-3 and caspase-9 were detected by Western blotting. DDR in 293T cells was detected after H2AX was silenced by RNAi method. Our results showed that DNA double strand breaks (DSBs) were both induced in quiescent and proliferating PBLs after CPT or X-ray treatment. The phosphorylation of H2AX and apoptosis were more sensitive in proliferating PBLs compared with quiescent lymphocytes (P<0.05). The expression levels of anti-apoptotic proteins Bcl-2 were reduced and cleaved caspase-3 and caspase-9 were increased. No significant changes were observed in CPT-induced apoptosis in 293T cells between H2AX knocking down group and controls. It was concluded that proliferating PBLs were more vulnerable to DNA damage compared to non-stimulated lymphocytes and had higher apoptosis rates. γH2AX may only serve as a marker of DNA damage but exert no effect on apoptosis regulation.     

Effect and Comparison of Sodium Butyrate and Trichostatin A on the Proliferation/Differentiation of K562

Thereisampleevidence ,bothinvitroandinvivo,thatHDACinhibitorsblocktheenzymaticac tivityofdeacetylasesandinducehyperacetylationofhistones[1] Furthermore ,aplethoraofculturedtu morcellshasbeentestedforsusceptibilitytoHDACinhibition UpontreatmentwithHDACinhibitors ,thesecellsshowsignsofapoptosis ,growtharrest,differentiationandaltered geneexpression HDACinhibitorsare potentially promisingcandidatedrugsfordifferentiationtherapyofcancer ButyratewasthefirstHDACinhibitortobei dentified[2 ] a…     

一种新的双向电泳蛋白样品制备方法

目的探讨双向凝胶电泳（2-DE）样品裂解液对蛋白质分离和双向凝胶电泳结果的影响。方法以MOLT-4细胞为例，采用3种溶解性能不同的裂解液提取细胞中的蛋白质组，并分别进行双向聚丙烯酰胺凝胶电泳。结果通过对2-DPAGE图谱的比较分析，发现采用8mol／L Urea，2mol／L Thiourea，4％CHAPS，1％NP-40.4％Triton X-100，65mmol／LDTT，0．5mmol／LPMSF，0．5％pharmalyte3-10，能获得质量较高的2-DE图谱。结论采用高浓度脲、三去污裂解液有利于获得优质的蛋白质样品，从而提高蛋白质提取率和双向电泳分辨率等。     

人雌激素和孕激素受体的流式细胞术检测及几种不同抗体的应用

目的　建立人类雌激素受体 (ER)和孕激素受体 (PR)的流式细胞术检测方法 ,并比较几种不同抗体的应用情况。方法将乳腺癌细胞株MCF 7、T 4 7d用不同方法固定处理 ,比较它们与抗体特异性结合的差异 ,挑选最佳细胞固定方法。同时 ,以与MDA MB 2 31(MM2 31)细胞反应阳性率不大于 5 %为标准 ,对不同浓度的ER抗体 1D5和MA1 310、PR抗体 1A6和PgR6 36的反应特异性进行分析比较 ,并用于临床样本的检测。结果　经 0 .2 5 %多聚甲醛 (PFA)预固定、75 %乙醇固定、核分离液处理后的细胞 ,与抗体特异性反应的荧光强度最大 ;在 1～ 4 μg/ 10 0 μl浓度范围内 ,1D5与MM2 31反应阳性率低于 5 % ,与MCF 7反应阳性率大于 95 %。同浓度的MA1 310与MM2 31和MCF 7反应时的阳性细胞率相当 ;1A6 1∶10 0稀释 ,PgR6 36 1∶10～ 1∶2 0 0稀释 ,与MM2 31反应阳性率低于 5 % ,与T 4 7d反应阳性率大于 95 % ;用 1D5 (2 μg)、1A6和PgR6 36 (1∶10 0 )对 12例临床乳腺癌样本ER、PR检测结果分别为 (6 4 .36± 2 7.92 ) %、(5 3.95± 2 8.17) %和 (5 5 .6 3± 2 6 .93) %。结论　细胞经 0 .2 5 %PFA预固定、75 %乙醇固定、核分离液处理后 ,用一定浓度范围的 1D5、1A6和PgR6 36可分别对ER、PR进行流式细胞术定量检测。本研究方法可用于     

细胞凋亡与细胞增殖协同作用的研究

在S期,砷剂在G1/S期,TNF-α或抗Fas抗体在G1/S期), PBLs不存在这种打击依赖性的差异.未经PHA刺激的PBLs对凋亡打击无应答,PBLs经PHA刺激后进入凋亡, 在外界打击作用下凋亡明显增加,在用咖啡因废除细胞周期检测点后对打击敏感性降低.拥挤或饥饿的PBLs同样对凋亡诱导无应答.结论:大多数细胞凋亡具有周期特异性,细胞周期改变可导致凋亡模式和时相的改变.细胞凋亡与增殖的协同作用是细胞周期和凋亡信号整合的重要机制.     

不同乳腺癌细胞株雌激素和孕激素受体的Western blot检测

目的　建立人类雌激素受体 (estrogenreceptor,ER)和孕激素受体 (progesteronereceptor,PR)Westernblot检测方法 ,并对不同乳腺癌细胞株ER、PR表达情况进行测定。方法　取不同乳腺癌细胞株对数生长期细胞提取总蛋白 ,分别用ERα单克隆抗体 1D5和PR单克隆抗体PgR6 36以Westernblot方法对ER、PR的表达情况进行检测 ,并与同期固定细胞的流式细胞术 (FCM)检测结果进行比较。结果　T 4 7d、MCF 7、ZR 75 1细胞ERα的Westernblot检测可得到清晰且分子量正确的条带 ,T 4 7d、ZR 75 1细胞可见清晰且分子量正确的PR条带 ,同期固定细胞ER、PR阳性表达的FCM检测结果与Westernblot检测结果一致。结论　Westernblot检测ER、PR的方法是可行的。