消退素D1通过影响小胶质细胞代谢抑制神经炎症改善阿尔茨海默病认知功能

目的：观察消退素D1（reslovin D1,RvD1）对Aβ诱导的小胶质细胞炎性激活和代谢紊乱的影响以及对阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）转基因小鼠认知功能的影响。方法：培养小胶质细胞株BV2,予以脂多糖（LPS）、淀粉样蛋白（amyloid β,Aβ）和RvD1处理,使用RT?PCR方法观察Nod样受体热蛋白结构域相关蛋白3（Nod?like receptor pyrin domain?containing protein 3,NLRP3）炎症小体的表达,使用共聚焦显微镜观察细胞线粒体形态学改变。通过给予AD转基因小鼠腹腔内连续10 d注射RvD1 5 mg/（kg·d）,分别使用免疫组织化学染色（IHC）、免疫荧光（IF）、实时荧光定量PCR（RT?PCR）方法观察AD小鼠海马区NLRP3炎症小体通路、小胶质细胞标记物（Iba1）以及线粒体代谢调控相关因子的表达变化,并通过条件恐惧测试（FCT）探究其对于AD小鼠行为学的影响。结果：RvD1抑制了小胶质细胞NLRP3炎症小体激活。RvD1处理后小胶质细胞线粒体形态结构由异常的点状碎片状变为正常的条索状。RvD1治疗后,AD小鼠海马区NLRP3以及Iba1表达水平显著降低,同时线粒体代谢紊乱得到改善,并且认知功能得到恢复。结论：RvD1可能通过改善小胶质细胞线粒体代谢紊乱,抑制神经炎症,最终提高AD小鼠的认知功能。     

miR-30a在心肌梗死大鼠心肌纤维化中的作用机制及对心功能的影响

目的探讨miR-30a在大鼠心肌梗死后对心肌纤维化的作用机制及对心功能的影响。方法构建携带大鼠miR-30a基因的载体,在HEK293细胞中包装病毒载体r AAV9-miR-30a及阴性对照r AAV9-miR-30a-NC,提取纯化后通过冠脉注射方法分别传导PBS缓冲液、r AAV9-miR-30-NC和r AAV9-miR-30a至大鼠心脏,再建立大鼠心肌梗死模型,分别设为PBS组、miR-30-NC组和miR-30a组,同时设立假手术组(sham组)。用心脏彩色多普勒超声检测心功能指标,包括短轴缩短率(FS)及左室射血分数(LVEF);Masson染色观察心肌胶原容积分数(CVF);免疫组化法检测Ⅰ、Ⅲ型胶原表达;实时荧光定量PCR(real-time PCR)检测心肌miR-30a及TGF-β1和CTGF mRNA表达;蛋白印迹法(Western blot)检测TGF-β1及CTGF蛋白的表达。结果 miR-30a组心功能较PBS组及miR-30-NC组显著改善(P0.05)。miR-30a组的心肌CVF及Ⅰ、Ⅲ胶原表达水平、Ⅰ/Ⅲ型胶原比值较PBS组及miR-30-NC组显著降低(P0.01);miR-30a组心肌TGF-β1 mRNA及蛋白表达水平与PBS组及miR-30-NC组比较显著下降(P0.001);CTGF mRNA及蛋白表达水平较PBS组及miR-30-NC组显著降低(P0.001)。结论 miR-30a过表达能下调心肌梗死后心肌TGF-β1、CTGF mRNA及蛋白水平,从而减少心肌胶原产生,抑制心肌纤维化,进而改善心功能。