17-β雌二醇对大鼠成骨细胞β2肾上腺素受体表达的影响

目的探讨17-β雌二醇对大鼠成骨细胞β2肾上腺素受体(β2AdR)表达的影响。方法新生SD大鼠颅骨经多次酶消化、反复贴壁和分离纯化培养得到纯净成骨细胞并进行碱性磷酸酶(ALP)染色。加入不同浓度17-β雌二醇(10-6～10-9mmol/L)培养,在不同时间点采用RT-PCR法检测细胞β2AdR mRNA基因表达,采用Western blot法检测细胞中β2AdR蛋白的表达。结果 RT-PCR和Western blot检测结果表明,随着17-β雌二醇浓度的升高,7、14d培养组成骨细胞β2AdR mRNA和β2AdR蛋白表达水平均逐渐下降,并呈现药物浓度依赖性,对照组表达水平最高。结论 17-β雌二醇可抑制成骨细胞β2AdR的表达,可能是其调控骨代谢的机制之一。     

血清素对体外培养大鼠成骨细胞增殖分化和矿化功能的影响

目的 探讨不同浓度血清素对体外培养大鼠成骨细胞(OBs)增殖、分化和矿化功能的影响. 方法 在新生SD大鼠颅骨OBs培养液中分别加入不同浓度血清素:0 mol/L组(空白对照组)、10-9 mol/L组、10-8 mol/L组、10-7 mol/L组、10-6 mol/L组、10-5 mol/L组,观察不同浓度血清素对OBs的增殖能力(CCK-8法)、分化能力(Western法检测碱性磷酸酶蛋白水平、pNPP法检测碱性磷酸酶活性和ELISA法检测骨钙素蛋白表达水平)和矿化能力(茜素红染色)的影响.并用荧光定量聚合酶链反应方法检测OBs分化早、晚期血清素受体亚型的mRNA表达水平. 结果 不同浓度血清素均可抑制OBs的增殖、分化和矿化,这种抑制作用在低浓度时具有时间依赖性,而在高浓度时作用减弱,呈现“V”形趋势.5-HT1A、5-HT1B、5-HT1D、5-HT2A、5-HT2B、5-HT2C等受体在OBs上均有表达,其中5-HT2A和5-HT1B受体是表达最多的两种受体亚型. 结论 体外OBs表达血清素受体,血清素可抑制OBs的增殖、分化和矿化,提示血清素能够调节骨代谢.     

肠源性血清素对骨代谢的影响

血清素5羟色胺(5-HT)是一种古老的神经递质,表达于全身各组织,具有广泛而复杂的生理功能。近年研究发现,外周血清素可以介导低密度脂蛋白受体相关蛋白5(LRP5),参与动物骨量和骨形成调节。LRP5通过特异性抑制十二指肠嗜铬细胞合成血清素,降低血液血清素水平。血液中血清素可以通过成骨细胞上的5-HT1B型受体,经蛋白激酶A-环磷酸腺苷(PKA-cAMP)途径影响转录因子cAMP反应元件结合蛋白(CREB)的磷酸化,抑制成骨细胞周期蛋白Cyclin D1、D2和E1的表达而抑制其增殖作用,进而抑制骨形成。以此通路的特异性分子为靶点的药物(如抑制血清素合成的药物)可以对骨形成进行调节,为骨质疏松等骨代谢性疾病的治疗提供新的研究方向。     

微型CT检测血清素对雌性小鼠骨皮质和骨小梁参数的影响

目的:探讨不同剂量血清素对雌性小鼠微型CT检测骨皮质和骨小梁参数的影响。方法:给予2月龄雌性C57BL/6小鼠皮下注射不同剂量(0、5、10、20、50、100 mg/kg)的血清素,3个月后通过微型CT定量分析各组小鼠第5腰椎体、股骨远端干骺端和股骨中段的相关骨参数。结果:与对照组相比,10～100 mg/kg血清素处理组小鼠骨小梁数量、骨小梁体积分数和面积分数、骨小梁矿物质密度和骨矿含量明显降低,骨小梁分离度明显升高;50～100 mg/kg血清素处理的小鼠骨皮质体积分数、骨矿含量以及骨皮质厚度明显降低。结论:血清素对小鼠骨代谢具有重要的负性调节作用。