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1.
1986年美国食品和药物管理局(Food and Drug Administration,FDA)批准了首个单抗药物。30多年来,抗体药物领域的发展日新月异,截至2019年12月,获得FDA批准上市的单抗药物达79种,用于治疗癌症、自身免疫性疾病、传染病等多种疾病。人源抗体具有特异性强、不良反应小的优点,已经成为新药开发的主流,全球销售额排名前十的药物中,人源抗体药物占据了半壁江山。本文着重对近年来抗体药物研发技术进展,包括抗体人源化、噬菌体展示、转基因小鼠、单细胞PCR等进行述评。  相似文献   
2.
目的构建抗CD40嵌合抗体的真核表达载体,实现在真核细胞中的高效表达。方法采用RT-PCR法,从分泌鼠源抗人CD40抗体的杂交瘤细胞系5C11中钓取其轻、重链基因,进行序列测定。将5C11轻重链可变区基因分别克隆入表达载体pCMV-VH和pCMV-VL,构建成嵌合抗体(c5C11)的轻链真核表达载体5C11L-pCMV及重链真核表达载体5C11H-pCMV。将嵌合抗体的轻重链真核表达载体共转染入293T细胞,利用夹心ELISA法测定上清中c5C11的浓度,通过流式细胞术检测c5C11与膜抗原的特异性结合。通过生物信息学相关方法对c5C11的氨基酸序列进行合理改造,尝试在保持生物学功能的基础上提高c5C11的表达量。结果成功钓取鼠源单抗5C11的轻重链可变区基因并构建了真核表达载体,实现了c5C11的分泌表达;嵌合抗体较好地保留了鼠源母本抗体的抗原识别能力。利用计算机辅助设计,一定程度上提高了c5C11的表达量。结论为后续研究嵌合抗CD40抗体对B淋巴瘤等肿瘤的治疗提供了一定的依据。  相似文献   
3.
<正> 子痫是产科急症,是妊娠中毒症最严重的阶段,随时都威胁着母子生命,如不积极处理产科情况则会再次发生抽搐,而且越来越严重。因此,当发生子痫时,除立即控制抽搐外,还应不失时机地进行产科处理,以保证母子生命的安全。我科从93年4月至96年4月共收治子痫38例,现将处理与护理体会总结如下: 二、临床资料:38例子痫,死亡5例,占13.2%,治愈33例,占86.8%;其中产前子痫24例,占63.2%,产时子痫9例,占23.7%,产后子痫5例,占13.1%;年龄18—31岁;农村29例,占76.3%,城市9例,占23.7%;经产妇4例,占10.5%,初产妇  相似文献   
4.
贾晶  乔春霞  赵秀兰 《卫生研究》2007,36(1):100-101
目的研究茶多酚(TP)对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)损伤的人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)α-微管蛋白和β-微管蛋白的影响。方法将实验分为四组TP组(25μg/ml),ox-LDL(200μg/ml)+TP组(25μg/ml),ox-LDL组(200μg/ml)及对照组(等体积溶剂)。采用四唑盐(MTT)比色法测定细胞活性,免疫组化法测定α-微管蛋白和β-微管蛋白的表达。结果MTT结果显示,ox-LDL可明显抑制HUVEC增殖,与对照组相比,增殖率降低了40%(P<0.05)。TP和ox-LDL共同培养,细胞增殖率明显上升,与对照相比仅降低7.8%(P>0.05)。免疫组化结果显示,ox-LDL下调HUVECα-微管蛋白和β-微管蛋白表达,分别为35%(P<0.01)和40%(P<0.01),TP与ox-LDL共同培养后,α-微管蛋白表达无明显升高(12%,P>0.05),β-微管蛋白表达升高了32%(P<0.05)。结论TP具有抑制ox-LDL诱导的HUVEC生长抑制的作用,且可以逆转ox-LDL引起的β-微管蛋白表达的降低作用。  相似文献   
5.
目的 研究茶多酚(Tea Polyphenols,TP)在同型半胱氨酸(Homocysteine,Hcy)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)粘附分子表达改变中的作用.方法 将处于对数生长期的HUVEC分为对照组、TP组、Hcy组、TP Hcy组,采用四甲基偶氮噻唑蓝法(MTT)测定细胞活性,免疫细胞化学方法分析细胞间粘附分子-1(ICAM-1)和E选择蛋白(E-selectin)的表达.结果 MTT结果显示,Hey可明显抑制HUVEC的生长(36.0%,P<0.05),加入茶多酚后则明显降低Hcy所致的细胞生长抑制(7.9%,P>0.05).免疫细胞化学方法测定结果显示,与对照组比较,Hcy组细胞ICAM-1和E-selectin表达分别升高29.9%和37.7%(P<0.05);茶多酚与Hcy共同培养后,ICAM-1和E-selectin表达分别下降了17.9%和24.6%(P<0.05).结论 TP对Hcy诱导的HUVEC粘附分子ICAM-1和E-selectin表达改变有一定的逆转作用.  相似文献   
6.
目的:制备并评价针对相思子毒素(Abrin)的具有中和活性的特异性人源化嵌合抗体。方法:从鼠源单抗中钓取抗体可变区轻重链序列4条,两两配对载入人源化IgG1表达载体pFRT-KIgG1,经表达、纯化等步骤得到4株人源化嵌合抗体;间接ELISA测定嵌合抗体与Abrin的结合力;ForteBio测定嵌合抗体与Abrin的亲和力;体外细胞学实验鉴定抗体的中和功能;无细胞体系评价抗体是否阻碍Abrin抑制荧光酶合成;选择6~8周雌性BALB/c小鼠,腹腔注射Abrin和不同浓度抗体,观察抗体的体内保护效应;流式细胞术分析抗体是否阻断Abrin与细胞的结合。结果:ELISA和ForteBio结果显示,4株嵌合抗体中仅H1L1嵌合抗体与Abrin的结合[EC_(50)=(0.1212±0.0040)μg/ml和亲和力(亲和常数3.97×10^(-10)M)]与母本抗体[EC_(50)=(0.15825±0.00235)μg/ml,亲和常数5.59×10^(-10)M]相似;体外细胞保护试验显示,H1L1[EC_(50)=(3.7455±0.0575)ng/ml]约为母本抗体[EC_(50)=(1.5825±0.5335)ng/ml]中和作用的42%;无细胞体系荧光素酶合成试验显示,H1L1[EC_(50)=(0.6729±0.0755)μg/ml]与母本抗体[EC_(50)=(1.0365±0.0045)μg/ml]接近,均能逆转Abrin抑制蛋白合成的作用;BALB/c小鼠体内中和保护实验结果显示,H1L1与10D8均能提供良好的体内保护作用;流式细胞术分析发现,H1L1并不能通过抑制Abrin黏附或进入细胞抑制其毒性。结论:4株嵌合抗体中,仅H1L1是轻、重链正确配对且拥有良好中和活性的候选抗体,有潜在的用于Abrin中毒救治的开发价值,应用前景良好。  相似文献   
7.
8.
西妥昔单抗对人肝癌细胞HepG2的体外效应   总被引:2,自引:0,他引:2  
目的探讨西妥昔单抗(爱必妥,cetuximab,Erbitux)对人肝癌细胞HepG2的体外效应。方法流式细胞术检测HepG2细胞表面表皮生长因子受体(EGFR)的表达。细胞划痕及Transwell实验检测西妥昔单抗对HepG2细胞迁移能力的影响。Western印迹检测西妥昔单抗对HepG2细胞EGFR、AKT及ERK表达及活化的影响。碘化丙啶(propidium lodide,PI)染色检测西妥昔单抗对细胞周期的影响。结果流式细胞分析结果显示,HepG2细胞表面存在较高水平的EGFR表达;细胞划痕及Transwell结果表明,西妥昔单抗对HepG2细胞迁移能力具有明显的抑制效应;Western印迹结果证明西妥昔单抗能显著降低HepG2细胞内EGFR、AKT及ERK的磷酸化水平;细胞周期分析显示西妥昔单抗作用24 h剂量依赖性影响HepG2细胞周期进程,并将其阻抑在G0/G1期。结论西妥昔单抗可以抑制高表达EGFR的肝癌细胞系HepG2胞内关键信号蛋白的活化,阻滞其细胞周期,抑制肝癌细胞的迁移能力。  相似文献   
9.
目的开发基于TNF功能表位的新型人源单链抗体。方法利用自主研制的鼠抗TNF-α中和单抗Z12能特异性识别TNF-α的141~146位功能表位特性,通过理论模拟构建TNF/抗体Z12相互作用的复合物模型设计获得功能性拮抗肽(PT2、PT3、PT4、PT7)以及单域抗体PTVH5(以人抗体可变区重链框架VH5为支架合理展示PT2、PT3、PT4),利用计算机辅助分子设计以及同源模建、分子对接方法,进一步合理选择人抗体可变区轻链框架(Vκ1)作为展示支架,通过构象判别、作用能比较以及识别区域确认并选择合适的连接肽设计新型单链分子ScFv_AB1。结果理论分析发现,ScFv_AB1稳定性较好,识别TNF-α的141~146功能位点(即Z12识别的位点)。生物学实验证明,ScFv_AB1能与TNF-α结合、抑制TNF-α与TNFR的结合、抑制TNF-α介导的细胞毒作用。结论初步验证了"借助计算机模建,基于人抗体可变区的框架结构和拮抗肽设计单链抗体分子"的策略是可行的,从而为人源小分子抗体的制备提供了一条可供选择的途径。  相似文献   
10.
目的:分析总结关于高血压脑出血患者各项并发症的有效护理预防措施。方法:自2014年9月至2015年8月期间该院接受治疗后发生并发症的高血压脑出血患者42例作为本次研究对象,了解分析并发症发生原因,并结合专业医学及护理经验,探讨有效预防治疗并发症的护理措施。结果:42例并发症患者中,15例治疗后再次出血,8例上消化道出血,17例感染,4例肾功能不全,5例脑水肿,11例心律失常。结论:针对并发症发生原因进行有效预防与护理,对高血压脑出血并发症发生率的降低具有实质性意义。  相似文献   
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