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1.
目的:探讨小干扰RNA(siRNA)抑制p21表达对低浓度过氧化氢(H_2O_2)诱导的黑素细胞提前衰老的影响,以及黑素细胞提前衰老与黑素传递功能间的关系。方法:p21 siRNA序列转染黑素细胞,采用荧光显微镜、实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)及western blot检测抑制效率。将正常人黑素细胞分为对照组(阴性siRNA转染处理)、p21 siRNA组(p21 siRNA转染处理)、阴性siRNA+H_2O_2组(阴性siRNA转染24 h后加入400μmol/L H_2O_2处理)及p21 siRNA+H_2O_2组(p21 siRNA转染24 h后加入400μmol/L H_2O_2处理)。采用β-半乳糖苷酶染色检测细胞衰老;EdU细胞增殖检测细胞增殖能力;western blot检测各组p21和树突调节蛋白[RhoA、Rac1及细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)]表达;免疫荧光检测细胞骨架蛋白和黑素小体分布。结果:p21siRNA转染黑素细胞后明显抑制p21 mRNA和蛋白表达(P0.05)。与阴性siRNA+H_2O_2组比较,p21 siRNA+H_2O_2组β-半乳糖苷酶染色阳性率降低、细胞增殖能力增加及p21蛋白表达降低(P0.05)。与对照组比较,阴性siRNA+H_2O_2组树突负性调节因子Rho A蛋白表达升高,而正性调节因子Rac1及Cdc42蛋白表达均降低,且细胞骨架蛋白及黑素小体荧光强度均降低(P0.05)。经p21siRNA预处理后,p21 siRNA+H_2O_2组较阴性siRNA+H_2O_2组Rho A蛋白表达降低,Rac1和Cdc42蛋白表达均增高,且细胞骨架蛋白及黑素小体荧光强度均增高(P0.05)。结论:低浓度H_2O_2诱导提前衰老的黑素细胞存在黑素传递功能障碍,p21 siRNA可改善低浓度H_2O_2诱导的黑素细胞提前衰老以及受损的黑素传递功能。  相似文献   
2.
目的:积雪草是一种传统中医药物,具有很多医学作用,如创伤愈合和抗氧化。中医也发现它可用于白癜风复色和炎症后色素沉着。本研究评估羟基积雪草苷对氧化应激下人黑素细胞作用效果及机制。方法:正常的人黑素细胞予 0.01 mmol/L 过氧化氢处理,再予不同浓度的羟基积雪草苷(0、10、50、100 μg/mL)。评估人黑素细胞树突的回缩速率,流式细胞术及细胞内游离钙浓度([Ca2+]i)检测线粒体膜电位(MMP),透射电子显微镜(TEM)观察线粒体超微结构,吖啶橙染色检测自噬,蛋白质印迹检测自噬体形成的指标LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ 的比值。结果:在过氧化氢引发的氧化应激条件中,羟基积雪草苷在一定浓度下抑制了黑素细胞树突的回缩,提高了膜电位并减少了 [Ca2+]i的积累,减弱了线粒体的损伤,增强了自噬活动。结论:人黑素细胞遭受氧化应激损伤时,羟基积雪草苷可通过自噬激活起到抗氧化作用。因此,羟基积雪草苷可成为氧化应激引起的白癜风的有效治疗手段。  相似文献   
3.
目的:探讨α-硫辛酸(α-LA)对体外培养的人黑素细胞氧化损伤的保护作用。方法:以不同浓度的α-LA(100、200及400μmol/L)预处理正常人黑素细胞12 h,再加入500μmol/L H_2O_2处理6 h。采用CCK-8试剂盒检测黑素细胞活力,流式细胞仪分析细胞内活性氧(ROS)含量、钙离子水平及细胞周期,线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)分析线粒体膜电位,图像分析软件测量树突回缩速率,透射电镜观察超微结构以及western blot检测LC3和p62蛋白表达情况。结果:正常情况下α-LA能显著提高黑素细胞的活力,同时还能明显降低氧化应激时黑素细胞内ROS水平,减轻细胞内超微结构的损伤,阻止线粒体去极化及细胞内钙离子的累积,延缓树突的回缩,促进增殖及降低过度激活的自噬水平(P0.05)。结论:α-LA不仅能在正常情况下显著提高黑素细胞的活力,而且可明显降低氧化应激下黑素细胞过度激活的自噬水平,对黑素细胞起保护作用。  相似文献   
4.
患者,女,82岁,因面、颈、胸背部红斑2月,加重伴双上肢肌痛无力1月于我科就诊,根据患者临床表现及辅助检查诊断为皮肌炎,因患者合并全身多发淋巴结肿大,结合组织病理、免疫组化和基因重排检测诊断为皮肌炎伴发血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤。予以甲强龙静滴及化疗,随访2月后去世。  相似文献   
5.
报告1例种痘水疱病样淋巴组织增生性疾病并发噬血细胞综合征。患儿男,13岁。因面部和四肢反复丘疹、丘疱疹、水疱及溃疡伴发热8年,加重2周入院。皮肤科检查:面部及四肢弥漫性肿胀,其上泛发暗红斑、丘疹、丘疱疹及溃疡,溃疡基底部覆有脓苔,其间可见大量痘疮样瘢痕;部分手指肌腱外露。实验室检查:血清Epstein-Barr病毒(EBV)拷贝数明显升高。左下肢皮损组织病理检查:大部分表、真皮坏死结痂,痂内及痂下方血管闭塞,管周淋巴细胞浸润,并可见个别病理性核分裂象。诊断:种痘水疱病样淋巴组织增生性疾病。入院后患儿存在持续发热,肝、脾大以及其他血液指标异常,提示并发嗜血细胞综合征。  相似文献   
6.
目的:本研究旨在探讨氧化应激在人表皮黑素细胞衰老中的作用。方法:以不同浓度的过氧化氢(0、200、400、600、800、1 000 μmol/L)处理人黑素细胞5 d后,检测分析其细胞活力和凋亡。通过评估衰老相关指标β?半乳糖苷酶染色、细胞增殖、细胞周期分析、E?钙黏素以及衰老基因表达等改变,探讨低浓度过氧化氢(0~400 μmol/L)对黑素细胞衰老进程的影响。结果:与对照组比较,当过氧化氢浓度为200 μmol/L和400 μmol/L时,细胞活力和凋亡未见显著性改变;高浓度的过氧化氢(600~1 000 μmol/L)可以明显诱导黑素细胞凋亡;400 μmol/L的过氧化氢则可使黑素细胞出现以细胞树突缩短、增殖减慢、β?半乳糖苷酶蓝染率增加、细胞周期阻滞于G2期、E?钙黏素表达降低及衰老相关蛋白p53和p21的表达增加等改变。结论:400 μmol/L浓度的过氧化氢刺激能诱导黑素细胞提早衰老。  相似文献   
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