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1.
目的:探讨miR-638在肺腺癌中的表达及其与肺腺癌细胞凋亡的关系?方法:应用real-time RT-PCR的方法检测了miR-638在肺腺癌细胞株SPC-A1中的表达情况,并采用脂质体法将miR-638 模拟物瞬时转染入SPC-A1?实验设置空白对照组?无关miRNA阴性对照组和miR-638转染组,转染后在荧光显微镜下观察转染效率,实时荧光定量RT-PCR检测miR-638的表达,流式细胞术检测各组细胞凋亡率?结果:与正常细胞相比,miR-638在肺腺癌细胞中低表达?SPC-A1细胞转染miR-638模拟物后,细胞凋亡率相对于空白组和阴性对照组显著升高(P < 0.05)?结论:miR-638在肺腺癌中低表达,且能够促进肺腺癌细胞凋亡,可作为后续肺癌生物治疗的新分子靶标?  相似文献
2.
目的:检测miR-27a在顺铂(DDP)体外诱导人肺腺癌细胞株SPC-A1凋亡过程中的表达变化,探讨其与细胞凋亡之间的相关性及其检测的临床意义?方法:体外培养SPC-A1细胞,实验组加入终浓度为2.5 μg/ml DDP,同时设置不加DDP的对照组?观察12?24?48和72 h后显微镜下细胞形态学变化,流式细胞术检测细胞凋亡率,real-time PCR检测培养上清液中和SPC-A1细胞内miR-27a的表达变化?结果:DDP(2.5 μg/ml)组SPC-A1细胞形态呈凋亡改变,在48和72 h凋亡率分别为(59.3 ± 2.5)%和(76.4 ± 3.1)%,均显著高于对照组,差异有统计学意义(P < 0.05)?DDP (2.5 μg/ml)组培养上清液中和SPC-A1细胞内miR-27a含量在24?48和72 h均显著高于对照组,差异有统计学意义(P < 0.05)?DDP (2.5 μg/ml)组培养上清液中miR-27a含量在12?24?48和72 h逐渐升高,两两比较差异均有统计学意义(P < 0.05)?结论:miR-27a在DDP诱导的SPC-A1细胞凋亡中表达升高,提示其可能参与细胞凋亡调控;对miR-27a进行定量检测有望用于对肺腺癌化疗疗效的评估?  相似文献
3.
目的:对Roche Cobas e601和Abott Architect i2000 分析系统检测主要乙型肝炎血清标志物HBsAg?抗-HBs和HBeAg的结果符合性和相关性进行评价?方法:分别采用两种分析系统对119份?140份?197份标本的HBsAg?抗-HBs和HBeAg进行检测?结果:两种分析系统对HBsAg?抗-HBs?HBeAg检测的定性结果符合率分别为99.1%?95.7%和90.9%,定量数值的相关系数分别为0.566?0.863?0.964,其中抗-HBs浓度存在显著差异(P < 0.05),Abott Architect i2000显著高于Roche Cobas e 601分析系统?结论:两种分析系统在乙型肝炎标志物的定性结果判断中具有较好的符合率,但抗-HBs浓度之间存在差异?  相似文献
4.
目的:探究免疫球蛋白黏蛋白3(T cell immunoglobulin and mucin 3,Tim-3)在IgA肾病(IgA nephropathy,IgAN)发病过程中的作用及其临床意义?方法:real-time qPCR检测41例IgAN患者及同期21例健康对照者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)中Tim-3 mRNA表达水平?流式细胞术检测IgAN患者和健康对照者PBMC中Tim-3阳性细胞比例?记录肾组织活检前24 h尿蛋白定量?尿常规?尿沉渣?镜下红细胞数及血肌酐等临床相关指标?结果:Tim-3 mRNA在IgAN患者PBMC中表达明显升高(0.64 ± 0.27 vs. 0.18 ± 0.09,P < 0.01),且随疾病严重程度逐渐增高,Lee氏Ⅲ?Ⅳ?Ⅴ级患者Tim-3 mRNA水平明显高于Ⅰ和Ⅱ级患者,差异有统计学意义(P < 0.05);IgAN患者组PBMC中Tim-3阳性细胞比例显著高于对照组[(1.94 ± 0.77)% vs. (0.59 ± 0.24)%,P < 0.01],且随疾病严重程度存在上升趋势,Lee氏Ⅳ?Ⅴ级患者Tim-3阳性细胞比例高于Ⅰ?Ⅱ?Ⅲ级患者,差异有统计学意义(P < 0.05);Tim-3 mRNA和Tim-3阳性细胞比例与尿蛋白定量及血肌酐呈显著正相关?结论:Tim-3在IgAN患者中表达显著上调,并与24 h尿蛋白定量及血肌酐等临床指标相关,提示Tim-3可能参与IgAN的发生发展过程,并可能成为IgAN的潜在预后标志物?  相似文献
5.
目的:探讨生物发光成像早期监测裸鼠肺部转移瘤及定量评估肿瘤大小的价值?方法:利用生物发光成像检测含荧光素酶报告基因的人肺腺癌SPC-A1-luc细胞在体内外的生物发光活性?经尾静脉注射SPC-A1-luc细胞建立裸鼠肺部转移瘤模型,应用生物发光成像实时监测肺部转移瘤的生长状态并定量评估肺部肿瘤大小,同时用micro-CT检测肺部转移瘤?结果:SPC-A1-luc细胞能高水平并稳定表达荧光素酶,生物发光光子数与细胞量呈良好的线性相关(R2=0.996 6),且与皮下肿瘤体积呈良好的直线相关(R2=0.984 9)?生物发光成像监测裸鼠肺部转移瘤,在第1周即可检测到肺部弥漫分布的肿瘤细胞,第3周肺部生物发光信号降至最低,定量分析表明此时肺部约有600个肿瘤细胞?而第3周micro-CT未能检测到肺部肿瘤,直到第6周micro-CT才检测到肺部肿瘤?结论:利用生物发光成像能早期监测肺部转移瘤的生长并定量分析肿瘤大小,其灵敏度高于micro-CT成像?  相似文献
6.
目的:研究肺癌细胞能否直接影响CD4+T 细胞干扰素-γ(IFN-γ)基因启动子甲基化水平?方法:ELISA法检测肺癌组(n = 30)及健康对照组(n = 30)血浆IFN-γ水平;免疫磁珠分选两组外周血CD4+T 细胞(n = 8),提取DNA后经亚硫酸氢盐修饰,PCR扩增 IFN-γ基因启动子进行TA克隆测序,测序结果采用生物信息学软件进行分析;建立健康人CD4+T 细胞与肺腺癌细胞株SPC-A1体外Transwell共培养体系(n = 6),并设健康人CD4+T 细胞单独培养为对照组,培养5 d后分别收集CD4+T 细胞?CD4+T 细胞按上述法进行TA克隆测序?同时CD4+T 细胞经anti-CD3?anti-CD28刺激6?24 h,ELISA法检测两组上清IFN-γ表达水平,RT-PCR检测CD4+T 细胞IFN-γ mRNA表达水平?结果:肺癌组血浆IFN-γ水平显著低于健康对照组[(69.30 ± 38.56) pg/ml vs (92.62 ± 34.75) pg/ml,P = 0.017];肺癌组CD4+T 细胞IFN-γ基因启动子甲基化水平显著高于健康对照组(84.6% vs 68.6%,P < 0.001);肺癌患者血浆IFN-γ水平与其基因启动子甲基化率呈负相关(r = -0.850 3,P = 0.010 7)?体外Transwell共培养实验中,与对照组相比,实验组CD4+T 细胞anti-CD3?anti-CD28刺激6?24 h,IFN-γ表达水平显著下降[6 h:(14.53 ± 7.12) pg/ml vs (36.14 ± 23.51) pg/ml,24 h:(7.81 ± 4.02) pg/ml vs (24.85 ± 15.58) pg/ml],6 h对照组CD4+T 细胞IFN-γ mRNA表达水平为实验组的2.37倍?实验组CD4+T 细胞IFN-γ基因启动子甲基化水平显著高于对照组(85.4% vs 70.9%)?结论:肺癌细胞可诱导CD4+T 细胞IFN-γ基因启动子发生高甲基化,进而导致IFN-γ基因表达下调,可能对肺癌患者的免疫抑制起重要作用?  相似文献
7.
目的:探讨肿瘤转移与血浆DNA水平之间的关系,评价早期诊断肿瘤转移的方法。方法:将人肺腺癌SPC-A1细胞接种到BALB/c小鼠腹腔,每周定期检测血浆DNA水平,7周后处死小鼠,观察肿瘤形成及转移情况。结果:小鼠血浆DNA水平呈升高趋势的占75.6%(34/45只);其中接种后第3周起血浆DNA水平均比接种后第1周显著升高(P﹤0.05)。血浆DNA水平升高及持续升高组小鼠中有肺转移瘤形成的占73.5%(25/34只)。无升高组小鼠中有肺转移瘤形成的占27.3%(3/11只)。血浆DNA水平升高组及持续升高组均显著高于无升高组(P﹤0.05)。血浆DNA水平与肿瘤负荷正相关(R2=0.8703)。结论:形成肺转移瘤的BALB/c小鼠血浆DNA水平在早期即显著升高,血浆DNA水平可用于肿瘤转移的早期监测。  相似文献
8.
目的:探讨低水平HBV-DNA乙肝患者乙肝病毒外膜大蛋白(hepatitis B virus large surface protein,LHBs)的表达及其意义,从而探讨LHBs是否可以用作乙型肝炎e抗原(hepatitis B e antigen,HBeAg)阴性乙型肝炎患者病毒复制程度的判定指标?方法:对83例HBeAg阴性的慢性乙型肝炎患者血清,采用ELISA进行LHBs检测,全自动免疫分析仪检测HBeAg,实时荧光定量PCR方法检测HBV DNA?分析HBV DNA无拷贝数组?低拷贝数组及高拷贝数组中LHBs的检出率以及HBV DNA不同拷贝数组与LHBs的相关性?结果:在HBV DNA无拷贝数组,LHBs的阳性率为6.38%;低拷贝数组,LHBs的阳性率为56.25%,吸光度值与拷贝数对数值没有显著的相关性(r = 0.25,P = 0.36);高拷贝数组,阳性率为95%,吸光度值与拷贝数对数值有良好相关性(r = 0.90,P < 0.0001)?结论:检测HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者血清LHBs,有助于判断患者体内HBV的复制程度,但是否能够作为HBeAg阴性乙型肝炎抗病毒治疗终点的有效判定指标,尚有待进一步探讨?  相似文献
9.
目的:调查南京地区81例儿童变态反应性疾病患者血清中变应原的种类及其分布特点。方法:收集儿童变态反应性疾病患者血清81例,采用德国Mediwiss公司的变应原定量检测系统,以免疫印迹法检测血清中变应原特异性IgE抗体。结果:81例儿童变态反应性疾病患者血清中,有61例(61/81,75.3%)患者检测出阳性结果。阳性率最高的变应原是户尘螨,有44例(44/81,54.3%),其次是猫狗皮屑、羊肉、柏和霉菌等。有11例(11/81,13.4%)患儿检出3种以上变应原。吸入性变应原阳性率4~6岁组和7~14岁组均显著高于0~3岁组(P<0.05),而食入性变应原阳性率4~6岁组和7~14岁组则显著低于0~3岁组(P<0.05),且食入性变应原阳性率男性显著高于女性(P<0.05)。变应原阳性率夏秋季显著高于冬春季(P<0.05)。结论:通过南京地区81例儿童变态反应性疾病血清变应原检测,了解变应原的种类及其分布特点,对变态反应性疾病儿童的病因诊断、预防和治疗都有着十分重要的意义。  相似文献
10.
目的:使用蛋白芯片技术检测患者血清中的抗ENA抗体谱,评价蛋白芯片技术检测抗ENA抗体谱的性能.方法:收集249例患者血清,用自身抗体IgG检测蛋白芯片进行抗ENA抗体谱检测,应用PBT型生物芯片识别系统进行图像分析,以免疫印迹方法作为对照.结果:自身抗体IgG检测蛋白芯片与免疫印迹法方法相比,符合率分别为:抗SS-A/Ro抗体82.2%、抗SS-B/La抗体88.2%、抗Scl-70抗体94.7%、抗Jo-l抗体95.9%、抗Sm抗体92.5%、抗ulRNP抗体88.5%、抗Rib-P抗体82.2%结论:自身抗体lgG检测蛋白芯片可应用于抗ENA抗体谱检测,与免疫印迹技术相比,检测结果无显著性差异.  相似文献
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