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1.
溴氰菊酯选育淡色库蚊和中华按蚊的研究   总被引:10,自引:1,他引:9  
淡色库蚊经溴氰菊酯选育10代,Le50由0.0402ppm上升至21.2738ppm,抗性高达529.20倍,抗性呈指数曲线上升;中华按蚊被处理8代,Le50由0.0256ppm至第4代(F3)时的0.048ppm,抗性指数为1.88,其后逐比下降至处理起点水平上波动。溴氰菊酯与增效醚混用后,毒效明显增加,表明多功能氧化酶活力增强是拟除虫菊酯类抗性机理之一。  相似文献
2.
由于杀虫剂的广泛、大量和长期使用 ,媒介昆虫对杀虫剂逐步产生了抗药性 (抗性 )。对媒介昆虫抗性的分子机理研究具有重要的理论意义和潜在的应用价值。抗药性和 (或 )敏感性相关基因的分离将为抗性分子机理的深入研究打下基础。近年来 ,国外研究者采用经典的“功能克隆法”克隆到一些抗药性相关基因。然而 ,在事先无目的蛋白或其相应基因定位的情况下分离这些基因是相当困难的。最近建立的抑制性差减杂交法 ( suppression subtractive hybridization,SSH )这一“表型克隆”新策略 ,无需事先知道起作用基因的背景资料 ,仅凭表型直接分离基…  相似文献
3.
淡色库蚊溴氰菊酯抗性的生理生化机理   总被引:4,自引:0,他引:4  
为探讨淡色库蚊溴氰菊酯抗性的生理生化机理,对抗生和敏感品系进行了离体解毒酶测定、活体抑制试验和抗击倒频率测定。结果:抗性品系的多功能氧化酶和羧到酯酶活力分别为敏感品系的1.64倍和1.58倍;增效醚(PB)、磷酸三苯酯TPP)和杀虫脒的增效比分别为152.5、1.1和4.7倍;抗性品系的抗击倒频率高于敏感品系,表明:抗性的主要机理为多功能氧化酶活力增强,其次为靶标下敏感以及羧酸酯酶活力增强。  相似文献
4.
不同引物及数据分析方法对定量PCR结果的影响   总被引:4,自引:1,他引:3  
目的:研究不同引物及数据分析方法对实时荧光定量PCR SYBR Green染料法检测基因表达差异结果分析的影响.方法:通过Primer Express 2.0软件对目的基因CCNDI、C-JUN分别设计4对不同引物进行SYBR Green染料法定量PCR扩增.并分别使用2-△△CT法、Pfaffl法及相对标准曲线法计算肺癌紫杉醇敏感细胞株及耐药细胞株问日的基因的表达差异.分析不同引物和数据计算方法对实验结果的影响.结果:统计学分析表明,引物的扩增效率对定量PCR结果分析有显著影响.不同引物特异性扩增得到的样本间表达倍数有显著差异(P<0.05).3种计算方法中,Pfaffl法与相对标准曲线法无统计学差异(P>0.05),而2-△△CT法与其他2种方法均有显著差异(P<0.05).结论:引物的选择对于定量PCR结果有显著影响;Pfaffl法是更准确,更合理的相对定量计算方法.  相似文献
5.
抗药性相关糜蛋白酶基因真核表达载体的构建和鉴定   总被引:2,自引:1,他引:1  
目的:构建抗药性相关基因真核表达载体。方法:采用PCR方法,以淡色库蚊抗药性品系cDNA文库为模板,扩增出抗药性品系中高表达糜蛋白酶(chymotrypsin)基因,经T/A克隆测序鉴定后,扩增、纯化质粒,经双酶切后纯化目的片段,克隆到真核荧光表达载体pEGFP—C3中。结果:PCR和酶切鉴定表明,构建成功真核荧光表达载体pEGEP—C3/chymotrypsino结论:PCR加双酶切鉴定的方法构建表达质粒,迅速省时,结果可靠。  相似文献
6.
淡色库蚊抗药性相关基因--NYD-MLC2基因的克隆与分析   总被引:2,自引:0,他引:2  
目的:获取淡色库蚊抗药性相关基因NYD-MLC2的cDNA全长序列并鉴定其在抗性品系和敏感品系中的表达差异。方法:根据抑制性差减杂交(SSH)结合cDNA芯片分离获得的淡色库蚊抗药性相关NYD-MLC2基因片段序列设计引物,采用快速扩增cDNA末端法(rapidamplificationofcDNAends,RACE)扩增NYD-MLC2基因3′、5′端,经对位拼接获得全长序列,并进行生物信息学分析;荧光定量PCR验证此基因在抗性和敏感品系的表达差异。结果:获得淡色库蚊NYD-MLC2cDNA全长序列,开放阅读框为630bp(GenBank/NCBIDQ140391),编码210个氨基酸。蛋白质序列分析显示,NYD-MLC2与冈比亚按蚊(Anophelesgambiae)一个未知功能的蛋白同源性最高,为91%;实时荧光定量PCR结果显示,NYD-MLC2在淡色库蚊溴氰菊酯抗性品系中的表达量是敏感品系的4.08倍。结论:获得淡色库蚊抗药性相关NYD-MLC2基因cDNA全长序列,并证实其在淡色库蚊溴氰菊酯抗性品系中高表达,提示NYD-MLC2与淡色库蚊溴氰菊酯抗药性相关,值得进一步研究。  相似文献
7.
淡色库蚊溴氰菊酯抗性治理的初步研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的:为了延缓和克服抗性的发生和发展,更好地选用卫生杀虫剂,控制卫生害虫,测定抗溴氰菊酯淡色库蚊对常用杀虫剂混用的敏感性。方法:采用幼虫浸液法,以Finney机率分析软件计算LC_(50)结果:对溴氰菊酯 辛硫磷,溴氰菊酯 DDT,溴氰菊酯 PB 二氧威,二氯 马拉硫磷,二氯 巴沙 胺菊酯,二氯 PB DDT,氯氰 丙体六六六,氯氰 残杀威,氯氰 PB 敌百虫,苄呋菊酯 辛硫磷 DDVP,苄呋菊酯 残杀威和苄呋菊酯 PB 丙体六六六的抗性系数分别为4.1125,6.3457,3.7274,11.2170,9.9935,16.1454,9.2030,7.7504,4.4743,3.9096,4.8611,6.5618。结论:当淡色库蚊对溴氰菊酯产生抗性后,拟除虫菊酯与有机磷或氨基甲酸酯类进行混用能取得较好的防治效果。  相似文献
8.
淡色库蚊抗溴氰菊酯品系和敏感品系的生物学特性研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
在实验室条件下,对淡色库蚊抗溴氰菊酯品系和敏感品系的生物学特性作了对比性研究。抗性品系的产卵力、化蛹率和羽化率分别比敏感品系下降44.8%、17.63%和8.9%,散卵率增加22.%,羽化前期时间延长1.32天,雌、雄成虫体重分别增加0.202mg和0.231mg,雌、雄成虫寿命分别缩短3.93天和4.74天。以上指标均有显著性差异(P〈0.01)。表明淡色库蚊溴氰炙酯抗性与繁殖不利有关。  相似文献
9.
抗溴氰菊酯淡色库蚊RNA电泳图谱初步分析   总被引:1,自引:0,他引:1  
采用酸性异硫氰胍-酚-氯仿-步法提取了抗溴氰菊酯淡色库蚊成虫RNA。经琼脂糖凝胶电泳,该RNA呈现5S、18S和25S三条主带。对25SrRNA进行了讨论。  相似文献
10.
淡色库蚊对溴氰菊酯抗性和敏感品系差异表达蛋白的研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的:获取淡色库蚊对溴氰菊酯敏感和抗性品系的差异表达蛋白,为蚊虫抗药性分子机理的深入研究奠定基础。方法:应用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)获取敏感和抗性蚊虫水溶性蛋白的电泳谱,并用Labworks^TM分析软件对电泳结果进行分析。结果:淡色库蚊对溴氰菊酯敏感和抗性品系表达蛋白间存在质和量的差异,其中,敏感品系4龄幼虫较抗性品系有1条分子质量为60.3ku的特异带。敏感品系雌性成蚊有1条分子质量为36.1ku的特异带,而抗性品系则有分子质量为97.2ku和36.9ku的2条特异带,在蛋白表达量的差异方面,共有8条蛋白带存在2倍以上的差异。结论:这些质和量的差异表达蛋白可能与淡色库蚊对溴氰菊酯的抗药性有关。  相似文献
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