血细胞分离机AutoPBSC程序与MNC程序采集外周血干细胞的效果比较及影响因素分析

本研究旨在分析COBE Spectra血细胞分离机自动采集程序（Auto PBSC程序）与半自动采集程序（MNC程序）在外周血干细胞采集中的效果及影响因素。109例采集按对象不同分为自体患者组（患者）和异基因供者组（供者）,通过对采集物中干细胞数量与质量及采集程序特点的比较,对两种采集程序在两组中的采集结果及影响因素分别进行了分析。结果表明,在全血处理量基本相同的情况下,患者组和供者组两种程序采集物中MNC%与CD34^＋%、CD34^＋细胞数及血红蛋白含量差异无显著性（P〉0.05）;与MNC程序比较,Auto PBSC程序采集物中血小板混入少,采集物体积小,但抗凝剂用量多,采集时间长（P〈0.05）。相关性分析显示,患者组两种程序采集物中MNC数（r=0.314,P=0.015）、CD34^＋细胞数（r=0.922,P=0.000）与采集前对应参数呈正相关,采集物中CD34^＋细胞数与WBC数（r=0.369,P=0.004）及MNC数（r=0.495,P=0.000）呈正相关;供者组Auto PBSC程序采集物中MNC数与采集前呈正相关（r=0.896,P=0.000）,MNC程序采集物中CD34^＋细胞数与采集前呈正相关（r=0.666,P=0.000）。患者组Auto PBSC程序采集物中MNC数与CD34^＋细胞数在男性显著高于女性（P〈0.05）,在年龄40岁以下的患者显著高于年龄在40岁以上的患者（P〈0.05）,而MNC程序年龄在40岁以上患者采集的CD34^＋细胞数显著高于年龄40岁以下患者（P〈0.05）。供者组仅MNC程序采集物中MNC数与CD34^＋细胞数在男性显著高于女性（P〈0.05）。结论：在全血处理量相同时,自体患者和异基因供者PBSC采集中两种程序收获的MNC纯度与CD34^＋细胞纯度及浓度高度一致,但自体患者PBSC采集结果受年龄与性别影响较大。     

中国福建地区类孟买血型个体Fut1基因突变研究

本研究旨在探讨中国福建地区类孟买血型的分子机制。采用血清学方法鉴定研究对象为类孟买血型,采用PCR扩增研究对象的α1,2岩藻糖基转移酶(FUT1)基因编码区序列,并将PCR产物经TA后进行测序,分析fut1基因编码区序列,以证实类孟买血型的发生机制。结果表明,PCR扩增产物电泳分析证实成功扩增fut1基因编码区序列;克隆后测序分析发现本例先证者2条染色体上fut1基因均为第547-552位AG两碱基缺失(CAGAGAG→CAGAG),导致阅读框架发生移码,提前形成终止密码。结论:本例类孟买血型个体fut1基因为h1h1型纯合突变。     

初诊白血病患者溶血磷脂酸酰基转移酶基因表达研究

本研究旨在检测白血病患者溶血磷脂酸酰基转移酶-β（lysophosphatidic acid acyltransferase β,lpaat β）mRNA的表达水平,为lpaatβ靶向治疗在白血病中的应用提供理论基础。采用实时荧光定量PCR方法检测初治白血病患者lpaatβ mRNA的相对表达水平,分析其在各型白血病中的表达情况。结果,急性白血病（AL）患者lpaatβ mRNA的表达高于正常对照组,差异有统计学意义（p〈0.05）;急性髓系白血病（AML）患者lpaatβ mRNA的表达高于正常对照组,差异有统计学意义（p〈0.05）,且lpaatβ mRNA的表达水平与外周血白细胞计数（WBC≥20.0×109/L）、白血病细胞CD34表达呈正相关（p〈0.05）,与患者的髓外侵犯无明显相关性（p〉0.05）。除外急性早幼粒细胞白血病（APL）病例之外,lpaatβ mRNA的表达水平与AML患者的化疗敏感性呈负相关（p〈0.05）。慢性髓系白血病（CML）患者lpaatβ mRNA的表达高于正常对照组,差异有统计学意义（p〈0.05）。急性淋巴细胞白血病（ALL）患者lpaatβ mRNA的表达与正常对照组相比,差异无统计学意义（p〉0.05）。结论：AML、CML患者均存在着lpaatβ基因的超高表达。AML细胞产生的lpaatβ可能在AML细胞的异常增殖及化疗耐药中起着重要作用。     

一个类孟买家系的分子遗传学分析

目的探讨一个类孟买家系的分子遗传学机制。方法采用血清学方法鉴定先证者及其父母的红细胞H抗原。采用高保真PCR扩增先证者及其父母的α1,2岩藻糖基转移酶(FUT1)基因编码区序列。PCR产物经TA克隆后进行测序、比对分析FUT1基因编码区序列。结果凝胶电泳分析证实成功扩增FUT1基因编码区序列;克隆后测序、比对分析发现先证者检出1种已知突变(h1nt547-552△AG),为h1/h1纯合子;先证者父母为H/h1杂合子。结论 FUT1基因突变以常染色体隐性遗传方式导致先证者类孟买血型的形成。     

2-甲氧基雌二醇对白血病细胞周期的影响及其机制

2-甲氧基雌二醇(2-ME2)是17β-雌二醇在体内的生理代谢产物.近来研究发现诱导肿瘤细胞发生周期阻滞是2-ME2发挥其抗肿瘤作用的重要机制.但目前关于2-ME2对白血病细胞周期影响的报道尚少.我们以淋系白血病细胞株CEM和髓系白血病细胞株K562作为研究对象,初步探讨2-ME2对白血病细胞周期的影响及可能的作用机制.     

MicroRNA-193b在初治白血病患者的表达及意义

本研究旨在检测白血病患者microRNA-193b(miR-193b)的表达水平并探讨其意义。采用实时荧光定量PCR方法检测初治白血病患者miR-193b的相对表达水平,分析其在不同类型白血病中的表达差异及其与部分实验室指标和化疗反应的关系。结果表明:慢性髓系白血病(CML)和急性早幼粒细胞白血病(APL)患者与正常对照组miR-193b的表达相比,其差异均无统计学意义(P>0.05);AML(除外APL)、ALL患者miR-193b的表达均低于正常对照组,其差异有统计学意义(P<0.05)。在AML(除外APL)患者中,miR-193b表达水平与患者外周血白细胞计数及细胞CD34表达无明显相关,但是与患者的治疗反应呈负相关(P<0.05)。结论:AML(除外APL)患者中miR-193b表达水平可能与AML细胞的化疗敏感性相关。miR-193b可能是AML(除外APL)治疗的一个新靶点。     

三氧化二砷对骨髓瘤细胞系U266抑制增殖及诱导凋亡的机制研究

本研究探讨三氧化二砷(As2O3)在体外对骨髓瘤细胞系U266的生物学效应及其机制。用MTT法观察As2O3对U266细胞增殖的影响,用流式细胞术、DNA凝胶电泳法分析As2O3对U266细胞凋亡的影响,以RT-PCR法检测2μmol/LAs2O3不同处理时间对U266细胞人端粒酶逆转录酶蛋白催化亚单位(hTERT)mRNA的表达变化,用Western blot法检测As2O3不同处理时间对U266细胞procaspase-3、bcl-2及hTERT蛋白水平的表达变化。结果表明:As2O3能明显抑制U266细胞增殖,半数抑制浓度(IC50)为2μmol/L;As2O3能诱导U266细胞凋亡,呈现剂量和时间依赖性;2μmol/L As2O3不同时间处理U266细胞后procaspase-3蛋白及hTERT mRNA、蛋白表达呈时间依赖性降低,而bcl-2蛋白表达未发生变化。结论:As2O3通过改变线粒体跨膜电位,触发了U266细胞的线粒体凋亡途径,导致了caspase-3的活化,最终诱导U266细胞凋亡;hTERT表达下调也是As2O3诱导U266细胞凋亡的重要作用机制。     

溶血磷脂酸酰基转移酶β与肿瘤关系研究进展

磷脂酸（PA）是一种多功能的生物活性磷脂。研究证实：溶血磷脂酸酰基转移酶β（lysophosphatidic acid acyltransferase β，LPAATβ）催化溶血磷脂酸（LPA）产生的PA与肿瘤细胞内多种信号途径的活化有关，参与了肿瘤细胞的增殖、凋亡、迁移、侵袭、呼吸爆发及细胞因子表达释放。LPAATβ在肿瘤组织中的表达显著增加以及抑制LPAATβ表达在体内外抗肿瘤（实体瘤和血液肿瘤）的作用研究取得的效果，提示以LPAATβ为靶点对肿瘤进行干预将成为重要的抗肿瘤治疗策略之一。本文就溶血磷脂酸酰基转移酶β与肿瘤治疗的相关基础及临床前研究进行综述．     

2-甲氧基雌二醇诱导K562细胞凋亡及机制研究

本研究探讨2-甲氧基雌二醇（2-ME2）对K562细胞的诱导凋亡作用及其机制。采用不同浓度2-ME2处理K562细胞，MTT法检测K562细胞的增殖活性，DNA琼脂糖凝胶电泳和Annexinv／PI双染色法检测K562细胞的凋亡效应，流式细胞术检测细胞线粒体膜电位的变化，RT-PCR和Western blot方法分别检测相关基因mRNA和／或蛋白的表达变化。结果表明：2-ME2抑制K562细胞增殖呈时间和剂量依赖性；48小时的半数抑制浓度（IC。）为2μmol／L；2μmol／L2-ME2作用于K562细胞24、48、72小时，DNA凝胶电泳分析可见典型DNA梯形条带；Annexinv／PI双染色法检测显示，细胞凋亡率分别为13．78％、22．32％和29．43％，而对照组凋亡率仅为1．78％（P〈0．05）；1、2和4μmol／L2-ME2分别处理K562细胞24小时，流式细胞术检测显示细胞线粒体膜电位下降；2μmol／L2-ME2处理K562细胞24、48和72小时，K562细胞中bcr／abl、bcl-2mRNA表达下调，而baxmRNA表达上调，Bcl-2、procaspase-3、procaspase-9、PARP（116 kD）和p-Akt蛋白表达下调，胞浆Cyto-C和PARP活性片段（85kD）表达上调，而对总Akt蛋白表达无影响。结论：2-ME2通过升高bax／bcl-2比值降低线粒体膜电位、促使细胞色素C（Cyto-c）释放入胞浆、触发K562细胞的线粒体凋亡途径，活化caspase-3，导致K562细胞凋亡并抑制其增殖；通过下调bcr／ab1 mRNA表达以阻断P13K／Akt信号通路也参与了该过程。     

2-甲氧基雌二醇的抗肿瘤作用及机制研究

2-甲氧基雌二醇(2-ME2)为雌二醇在体内的生理代谢产物。体外研究表明,2-ME2可通过雌激素受体非依赖性的多样化机制对多种实体瘤和少数血液肿瘤产生良好的抗肿瘤活性,并且其抗肿瘤谱仍有待进一步扩大;体内研究也提供了其抗肿瘤的依据。因此,2-ME2是一种新的具有广泛应用前景的抗肿瘤药物。本文就2ME2抗肿瘤的相关机制及临床前、临床研究进行综述。