表皮生长因子诱导人胰腺癌细胞SW1990中人宫颈癌基因的表达及其机制

目的研究表皮生长因子（EGF）诱导人胰腺癌细胞SW1990中人宫颈癌基因（HCCR）蛋白表达的分子信号通路机制。方法 100 ng/ml EGF作用SW1990细胞不同时间后,用Western blot检测其磷酸化AKT和HCCR蛋白表达情况;用LY294002（PI3K/AKT抑制剂）预处理SW1990细胞后用EGF作用SW1990细胞,观察其HCCR蛋白表达情况。结果 Western blot结果显示,与对照组相比,细胞内磷酸化AKT表达水平在4h时明显升高（P〈0.05）,而HCCR表达水平则随着EGF处理时间增加而升高（P〈0.05）;LY294002（PI3K/AKT抑制剂）可阻断EGF诱导的HCCR蛋白表达。结论 EGF通过PI3K/AKT通路诱导人胰腺癌细胞SW1990中HCCR蛋白的表达,这一通路可被PI3K/AKT抑制剂阻断。     

siRNA干扰人宫颈癌基因(HCCR)的表达对胰腺癌PANC1细胞增殖?凋亡和侵袭的影响

目的:建立稳定转染人宫颈癌癌基因(human cervical cancer oncogene,HCCR)siRNA真核表达质粒的人胰腺癌PANC1细胞株,探讨siRNA干扰HCCR的表达后对人胰腺癌PANC1细胞增殖、凋亡和侵袭的影响.方法:通过脂质体转染法将含HCCRsiRNA的真核表达质粒pGCsi-HCCR稳定转染至人胰腺癌细胞株PANC1,抗生素G418筛选获得稳转细胞株;Western blot检测PANC1细胞中HCCR的表达,同时检测肿瘤相关基因p53蛋白表达的变化;流式细胞仪检测PANC1细胞的细胞周期和凋亡率变化;MTT比色法检测siRNA干扰后对PANC1细胞增殖能力的影响:Transwell侵袭实验观察siRNA干扰后对PANC1细胞侵袭能力的影响.结果:Western blot证实siRNA稳转组的PANC1细胞株和空载体稳转组比较HCCR蛋白表达水平下调,稳转细胞株建立成功.siRNA稳转组p53蛋白表达下降.siRNA稳转组的S期细胞数目减少而G0/G1期细胞数目增加,细胞凋亡增加.MTT结果显示siRNA稳转组1和稳转组2细胞吸光度分别为空载体组细胞的0.65倍和0.68倍,细胞增殖能力下降.Transwell侵袭实验显示siRNA稳转组细胞和空载体组细胞穿膜数分别为24.4±9.9和49.1±15.4(P＜0.01),稳转组细胞侵袭能力下降.结论:siRNA干扰HCCR的表达后能抑制胰腺癌PANC1细胞增殖和侵袭,促进其凋亡.     

人宫颈癌基因RNA干扰真核表达载体的构建及其稳定转染胰腺癌细胞株的建立

目的:构建针对人宫颈癌基因2(HCCR2)有效靶点的RNA干扰真核表达载体,鉴定获得干扰质粒稳定转染的人胰腺癌PANC1细胞株.方法:设计并合成多个针对HCCR2基因的RNA干扰序列,并将其插入真核表达慢病毒载体pGCsi-H1/Hygro/NEGative,通过测序和与HCCR过表达载体共转染293T细胞后行West...     

规范化多模式镇痛在肝切除术后加速恢复中的临床应用

目的:评价规范化多模式镇痛治疗在肝切除围手术期的临床效果。方法:采用随机对照的方法,选取2014年1月—2016年6月行开腹肝部分切除的患者60例,分为多模式镇痛组和静脉镇痛组各30例。多模式镇痛组采用胸段硬膜外布比卡因加吗啡持续泵入,切口注射罗哌卡因,术后使用针剂非甾体类抗炎药丙帕他莫,口服双氯芬酸钠序贯镇痛;静脉镇痛组采用舒芬太尼加羟考酮持续泵入。术后测定48 h内视觉模拟评分(VAS),记录术后排气时间、口服半流质饮食时间、术后住院时间、恶心呕吐、感染、出血等不良反应及并发症。结果:多模式镇痛组疼痛评分在术后12 h时低于静脉镇痛组[(4.2±1.2)vs.(5.1±1.6)],总体镇痛效果好于静脉镇痛组;与静脉镇痛组相比,多模式镇痛组术后排气时间[(35.7±8.9)h vs.(48.6±10.8)h],下床时间[(30.6±9.8)h vs.(36.0±10.4)h],饮食恢复时间[(3.7±0.6)d vs.(5.9±0.9)d]均优于静脉镇痛组(均P0.05),且围手术期镇痛费用较静脉镇痛组更低[(520±35)元vs.(660±38)元,P0.01]。两组患者在恶心呕吐、尿潴留、切口及肺部感染、消化道出血、深静脉血栓发生率方面均无统计学差异(P0.05)。结论:多模式镇痛治疗能够更有效的控制肝切除术后疼痛,加快肠道功能恢复,减轻不良反应,促进快速康复。