从嗜群血蜱观察到莱姆螺旋体

蜱类是多种疾病的传播媒介、病原体的贮存宿主,对人畜危害极大。因此,开展蜱与疾病关系的研究,在医学上有重要意义。概况:本文介绍的莱姆(Lyme)病,就是以蜱为媒介的一种炎症性、多系统螺旋体病,其病原体为伯氏疏螺旋体(Borrelia burg dorferi)。     

我国东北林区莱姆病的调查

1987~1988年我们在牡丹江和延边林区对莱姆病进行了流行病学调查和临床观察,发现一些林场莱姆病的患病率和自然感染率较高。大青林场共有人口1 030人,在检查的628人中,发现莱姆病患者37例。在小白林场人群中进行了血清流行病学调查,发现伯氏包柔氏体自然感染率为22.5%。从牡丹江林区收集的全沟硬蜱中,分离出了3株包柔氏体,其中M7菌株经单克隆抗体测定和电镜观察,确证为伯氏包柔氏体。在医院收集162份疑似森林脑炎病人血清,其中38份血清抗伯氏包柔氏体抗体阳性。对15例经临床和血清学确诊的莱姆病患者进行了临床观察和治疗,证明大剂量青霉素可以治愈全身性红斑。并从1例慢性游走性红斑患者血液中分离出1株包柔氏体。     

鼠源性单克隆抗体Met4用于检测胃癌组织Met的表达及临床意义

目的:观察研究肝细胞生长因子受体Met在胃癌组织及相对应的淋巴结转移灶中的表达水平,同时比较分析抗Met单克隆抗体Met4和多克隆抗体C28在检测Met表达水平中的差别?方法:采用免疫组织化学间接法检测胃癌组织芯片中Met表达水平,比较Met4与C28的检测效能?结果:Met在细胞膜及胞浆阳性表达率在不同病理分级组间无统计学意义(P > 0.05)?Met4组Met的阳性染色部位于细胞膜(浆),而C28组Met阳性染色部位在细胞浆中,二者在Met亚细胞染色定位上有差别?Met4的阳性检出率(58.3%)高于C28阳性检出率(30.5%),具有统计学意义(P < 0.05)?Met4组21例胃癌原发灶Met阳性病例中14例淋巴结转移灶Met表达阳性,C28组11例原发灶Met阳性病例中6例淋巴结转移灶Met表达阳性?原发灶中Met阳性表达与转移淋巴结中Met的阳性表达有显著相关性(P < 0.05)?结论:Met阳性表达可能在肿瘤的淋巴转移过程起重要作用?Met4用于肿瘤的诊断及靶向治疗,具有良好的临床应用前景?     

探讨不同实验条件对U87细胞体外增殖的影响

目的:探讨RNA干扰肝癌衍生生长因子(HDGF)后,U87细胞增殖抑制的最佳实验条件。方法:用LipofectamineTM2000将HDGF siRNA转染U87细胞后,将细胞接种于96孔板中,分别在无血清、含10%FBS和无血清Matrigel胶预处理细胞培养板条件下,采用MTS法检测细胞增殖能力。结果:HDGF表达水平下调后,U87细胞增殖能力受到抑制。在无血清、含10%FBS和无血清Matrigel胶预处理细胞培养板条件下,细胞增殖抑制率分别是18%、9%和28%。结论:在无血清Matrigel胶预先处理的培养条件下,能最大程度上反映出HDGFsiRNA对U87细胞增殖能力的抑制。     

人源抗Met基因工程抗体scFv的改造与特性分析

目的:将已制备的抗Met单链抗体基因与人IgG Fc基因片段融合,表达有活性的融合蛋白分子,以增强单链抗体的可溶性.方法:从人淋巴细胞提取总RNA,经RT-PCR扩增并制备人IgG的Fc基因片段,并克隆于已构建好的pBAD-scFv原核表达载体中,转化大肠杆菌Top10,经阿拉伯糖诱导表达融合蛋白scFv-Fc.所表达的可溶性蛋白经亲和层析纯化、SDS-PAGE、Western blot分析鉴定,并用ELISA检测抗体效价.结果:序列分析表明重组质粒pBAD-scFv-Fc基因序列正确;SDS-PAGE分析表明,scFv-Fc融合蛋白分子量为60 ku,且为可溶性蛋白;该蛋白经过His亲和层析纯化、ELISA检测,结果表明,该融合蛋白能够与抗原分子Met特异性结合.结论:改造后的抗体融合蛋白scFv-Fc能与人Met特异性结合,增加了抗体蛋白溶解度,有利于抗体的大量制备.     

MET4和C-28检测胰腺癌MET蛋白表达的对比研究

目的:对比研究兔多抗C-28和鼠单抗MET4在胰腺癌组织中检测MET蛋白表达的差异性和相关性。方法:采用免疫组化间接法研究C-28和MET4检测67例胰腺癌组织中MET表达情况,定量图像分析MET4和C-28的检测效能。结果:MET4和C-28检测胰腺癌的阳性率分别为70.1%和71.6%。两种抗体检测MET阳性率无显著差异(χ2=0.980,P=0.387)。相关分析显示两者无显著相关性(r=-0.127,P=0.307),在C-28未检出的病例中有84.2%(16/19)MET4检出,在MET4未检出的病例中有85.0%(17/20)C-28检出。在无MET蛋白表达的胰岛和正常胰腺上皮中,C-28有染色,而MET4无染色。结论:相对C-28抗体,MET4用于检测胰腺癌MET蛋白表达具有较高的特异性。     

福建省莱姆病的发现

血清学调查证实福建省8个县(市)林区人群存在莱姆病感染。根据流行病学、临床学和血清学确诊莱姆病典型病例6例,疑似病例9例。从蜱类中肠涂片见到典型的莱姆病螺旋体。     

城乡学龄儿童贫血患病情况调查及血粉片治疗缺铁性贫血的效果观察

本调查目的是比较河北省城市、农村小学生贫血发院情况及服猪血粉片预防贫血的效果。城市选保定市青年路小学共469人,农村选任邱县城长洋淀小学生共234人。测定血红蛋白及红细胞压积,以血红蛋白低于12克/100ml为标准,其结果如下。两所学校各年龄组(7～11岁)血红蛋白均值及贫血患病率比较发现青年路小学血红蛋白均值在11.97～13.00g/dl,     

血管内皮生长因子及相关促肿瘤血管生成分子及靶向治疗

1971年,Folkman首次提出了"肿瘤生长浸润依赖于肿瘤血管生成"的假说.此后,以肿瘤新生血管为作用靶点的抗血管生成治疗成为重要的抗肿瘤策略之一.     

中国莱姆病螺旋体特异性单克隆抗体的制备及初步鉴定

目的制备特异的莱姆病螺旋体单克隆抗体,为我国莱姆病的诊断和莱姆病螺旋体菌株鉴定提供基础。方法以中国莱姆病螺旋体伽氏疏螺旋体(Borreliagarinii)的代表菌株PD91的全菌蛋白为抗原,免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合,用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)和蛋白免疫印迹方法(WB)筛选,并经过2次或3次克隆,以获得单克隆抗体。结果共制备出10株单克隆抗体,经鉴定为3种,分别针对中国莱姆病螺旋体的外膜蛋白OspA(4株)、OspB(3株)和OspC(3株)。结论成功制备出3种抗莱姆病螺旋体不同蛋白的单克隆抗体,可用于我国莱姆病的病原诊断和莱姆病螺旋体菌株鉴定。