卫氏并殖吸虫囊蚴和成虫抗原的分析及单克隆抗体识别

本文报道卫氏并殖吸虫囊蚴和成虫可溶性抗原（ＰｗＭ和ＰｗＡ）ＳＤＳ－ＰＡＧＥ后银染色及相应单克隆抗体（ＭｃＡｂ）识别免疫酶染色的结果。银染色显示ＰｗＭ有２２条蛋白带，其中主带有１０条，分子量分别为１２～１３、１４、４０、４１、４２、４８、５６、５７、６３和８０ｋＤ。ＰｗＡ有４１条带，其中主带有２１条，分子量分别为１１～１２、１４、１６～１７、１８、１９、２１～２３、２４～２６、３３、３９、４０、４１、４２、４３～４７、４８、５１、５６、８７、９７和１６０～１６４ｋＤ，另外２条主带分子量在２００ｋＤ以上。针对ＰｗＭ的ＭｃＡｂＧ２Ｂ３与ＰｗＭ反应出现３条蛋白带，分子量分别为４２、４８、６３ｋＤ。针对ＰｗＡ的ＭｃＡｂＡ３Ｄ３与ＰｗＡ反应出现１２条蛋白带，分子量分别为２１～２３、５６、７０、８７、９７、９８、１０４、１２０、１２５、１６０～１６４ｋＤ，另外２条带分子量在２００ｋＤ以上。     

混合或单一单抗检测肺吸虫病人血清中循环抗原的研究

本文报道应用由７种抗卫氏并殖吸虫囊蚴和成虫单克隆抗体组成的混合ＭｃＡｂ－ＥＬＩＳＡ法检测辽宁省凤城县肺吸虫病流行区２０８份滤纸血循环抗原，阳性率为３８％。对１００份同时有滤纸血和血清样本者同步检测进行比较，滤纸血ＣＡｇ阳性率为６２％，血清ＣＡｇ阳性率５７％，符合率为９１％，经确切概率法处理两者无显著性差异，说明滤纸血可代替血清作ＣＡｇ检测。     

日本血吸虫虫卵核糖核酸的提取及鉴定

本文采用异硫氰酸胍－酚－氯仿一步法成功地提取了日本血吸虫虫卵总RNA，琼脂糖电泳结果呈现18S一条主带，与日本血吸虫成虫RNA的电泳结果一致。日本血吸虫虫卵RNA的抽提成功为虫卵cDNA库的构建以及虫卵有效抗原的筛选奠定了基础。     

定量透明法检测华支睾吸虫虫卵效果的观察

华支睾吸虫虫卵很小,显微镜下容易为粪便顺粒遮盖,造成检漏。为了提高检出效果,我们试用两种定量透明法检查华支睾吸虫虫卵,并与现用的水洗沉淀法、碘化钾漂浮法和醛醚沉淀消化法进行了效果比较。     

三平正并殖吸虫与卫氏并殖吸虫4种酶的同工酶研究

我们采用聚丙烯酰胺凝胶等电点聚焦(IEF)电泳对三平正并殖吸虫与卫氏并殖吸虫成虫的4种酶的同工酶谱进行研究,观察两者之间同工酶谱的差异程度,为三平正并殖吸虫分类学地位的确立提供生化依据。     

卫氏并殖吸虫成虫重组抗原的表达与鉴定

目的 表达已转化入大肠杆菌的卫氏并殖吸虫成虫抗原(PwAg)基因，并评价其应用于免疫学诊断的价值。方法 用IPTG诱导表达已亚克隆人表达载体pRESETB的卫氏并殖吸虫成虫抗原基因，以SDS—PAGE和Westernblot分析鉴定表达产物。结果 SDS-PAGE电泳可见32ku处有1条明显的蛋白质带，该带只被卫氏并殖吸虫成虫免疫兔、感染犬和病人血清识别。结论 成功构建重组克隆PwAg，其表达产物具有卫氏并殖吸虫成虫期特异性，推测可用于并殖吸虫病的免疫学诊断。     

扁囊并殖吸虫囊蚴全虫蛋白等电点聚焦和盘状电泳分析

应用聚丙烯酰胺盘状电泳和等电点聚焦电泳的方法,对扁囊并殖吸虫和卫氏并殖吸虫囊蚴的全虫蛋白质区带进行比较,结果表明两者无明显差异。     

McAb Dot—ELISA检测卫氏并殖吸虫循环免疫复合物

应用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ法，以抗卫氏并殖吸虫囊蚴单克隆抗体ＩＦ８Ａ３检测了卫氏并及虫感染犬血清循环免疫复合物动态，感染后１～２ｗｋ可以检测免疫复合物，３～４ｗｋ阳性滴度逐渐上升，５～６ｗｋ处于较高汪洋，第８ｗｋ达高峰，然后较快地下降，研究结果表明，卫氏并殖吸虫囊蚴抗原特异的循环免疫复合物具有明显的期特异性；单克隆抗体Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测特异的循环免疫复合物，可用于卫氏并殖吸虫病的早期诊断和活动性感     

混合或单一单抗检测肺吸虫病人血清中循环抗原的研究

本文报道应用由７种抗卫氏并殖吸虫囊蚴和成虫单克隆抗体（ＰｗＭ和ＰｗＡ一ＭｃＡｂ）组成的混合ＭｃＡｂ一ＥＬＩＳＡ法检测辽宁省凤城县肺吸虫病流行区２０８份滤纸血循环抗原（ＣＡｇ），阳性率为３８％（７９／２０８）。对１００份同时有滤纸血和血清样本者同步检测进行比较，滤纸血ＣＡｇ阳性率为６２％（６２／１００），血清ＣＡｇ阳性率５７％（５７／１００），符合率为９１％，经确切概率法处理两者无显著性差异，说明滤纸血可代替血清作ＣＡｇ检测。分别用７种ＭｃＡｂ检测５５份混合ＭｃＡｂ检测为阳性的样本，４种抗囊蚴ＭｃＡｂ中Ｇ＿２Ｂ＿３检出率最高，Ａ＿３Ａ＿７次之，３种抗成虫ＭｃＡｂ中Ａ＿３Ｄ＿３检出率最高，表明用Ｇ＿２Ｂ＿３或Ａ＿３Ａ＿７与Ａ＿３Ｏ＿３混合检测Ｐｗ病人ＣＡｇ更省更好。但在斯氏肺吸虫流行区应首选Ａ＿２Ｅ＿７，因其与斯氏Ａｇ有强烈的交叉反应，对斯氏肺吸虫患者血清ＣＡｇ检出率高达９４．７％（１８／１９）。本研究结果提示上述７种ＭｃＡｂ单独应用或不同组合后应用有助于提高ＣＡｇ的检出率并有助于肺吸虫感染虫种和虫期的判别。