小鼠B7-H3增强体外脂多糖介导的单核细胞活化

目的利用已成功构建的小鼠B7-H3融合蛋白通过体外实验研究B7-H3对单核细胞活化及功能的调节作用。方法采用磁珠法从小鼠脾脏中分离得到CD11b＋单核细胞,经脂多糖活化后通过融合蛋白结合实验检测单核细胞表面B7-H3受体的表达;加入不同剂量小鼠B7-H3融合蛋白培养,ELISA法检测单核细胞IL-1β、TNF-α与IL-6的分泌,并通过吞噬实验分析其对单核细胞吞噬功能的影响。结果活化的小鼠单核细胞表面可能存在B7-H3的未知受体;与对照相比,小鼠B7-H3可以增加活化的单核细胞IL-1β、TNF-α与IL-6的分泌（均P〈0.01）,并增强单核细胞的吞噬能力。结论小鼠B7-H3分子在感染免疫中具有重要作用,可参与疾病的抗感染功能的发挥。     

小鼠B7-H3对T细胞的体外正性协同刺激作用

小鼠B7-H3作为协同刺激分子的生物学功能至今尚未明确.本文拟通过构建小鼠B7-H3基因的真核表达载体,获取稳定表达小鼠B7-H3基因的细胞株,并进一步通过体外实验研究其对T淋巴细胞体外活化及功能的调节作用.作者运用RT-PCR技术从小鼠肝脏组织中获得全长小鼠B7-H3基因,并构建真核表达载体pIRES2-B7-H3,...     

负性分子B7-H4在乳腺癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨负性分子B7-H4在乳腺癌组织中的表达情况及其与临床病理参数之间的关系?方法:通过免疫组织化学技术分析68例乳腺癌组织和30例良性纤维瘤中B7-H4的表达情况,并结合临床资料统计分析B7-H4表达与乳腺癌患者临床特征之间的关系?结果:免疫组织化学结果显示,乳腺癌组织中B7-H4的阳性率为75%,明显高于纤维瘤组织(17%)(P < 0.05),并与雌激素受体(estrogen receptor,ER)表达呈负相关?与人类表皮生长因子2(human epidermal growth factor receptor2,HER-2)呈正相关,而在年龄?肿瘤大小?病理类型等其他变量之间不存在显著差异?结论:乳腺癌组织中B7-H4异常表达,与乳腺组织良性病变存在差异(P < 0.05),并与ER?HER-2的表达相关,提示B7-H4分子在乳腺癌的发生发展过程中起了重要作用?     

CD4单抗选择对于流式细胞术分析Th1/Th2极化的有效性评价

选择13B8.2和S3.5两株商品化的CD4单克隆抗体用于Th1/Th2极化的流式细胞术评价,分析PMA、Ionomycin和BFA单独或联合作用于外周血CD4抗原表达水平的变化,以确定Th1/Th2极化评价时有效的CD4设门单抗,并试图揭示CD4抗原降调的机制。结果表明,13B8.2可作为CD4的设门单抗。PMA和Ionomycin联合刺激会导致外周血CD4抗原的明显降低,而PMA单独刺激不能,且BFA与PMA和Iononmycin同时加入外周血中可部分抑制PMA和Ionomycin刺激引起的CD4抗原内吞和降解。     

孵育时间不同对嗜麦芽窄食单胞菌药敏结果的影响

嗜麦芽窄食单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia)药敏试验方法至今尚无统一标准。美国国家临床实验室标准委员会(NCCLS)推荐采用琼脂稀释法或微量稀释法,并将嗜麦芽窄食单胞菌的药敏判断标准归入铜绿假单胞菌外的其他非肠杆菌科细菌中,日常工作我们常在16～20h中判断结果。为了解药敏判断时间对结果的影响,对24株嗜麦芽窄食单胞菌在16h和24h分别判读药敏结果,并作初步探讨。     

铜绿假单胞菌在重症监护病房分离株氨基糖苷类修饰酶基因研究

目的 了解分离自重症监护病房（ICU）患者的铜绿假单胞菌中氨基糖苷类修饰酶基因存在状况。方法 对21株铜绿假单胞菌（PAE），采用聚合酶链反应（PCR）检测aac（3）-Ⅰ、aac（3）-Ⅱ、aac（6＇）-Ⅰ、aac（6＇）-Ⅱ、ant（3＂）-Ⅰ、ant（2＂）-Ⅰ等6种氨基糖苷类修饰酶基因。结果 本组21株PAE菌中aac（3）-Ⅱ阳性4株（19．0％）、aac（6’）-Ⅰ阳性5株（23．8％）、aac（6＇）-Ⅱ阳性2株（9．5％）、ant（3＂）-Ⅰ阳性1株（4．8％）和ant（2＂）-Ⅰ阳性4株（19．0％），aac（3）-Ⅰ为阴性，共有9株检出氨基糖苷类修饰酶基因（42．8％）。结论 分离自ICU患者的铜绿假单胞菌氨基糖苷类修饰酶基因携带率高。     

铜绿假单胞菌临床分离株β-内酰胺类抗菌药物耐药相关基因研究

目的 了解临床分离的铜绿假单胞菌（PAE）中β-内酰胺类药物耐药相关基因存在状况.方法 对33株铜绿假单胞菌,采用PCR检测β-内酰胺类药物耐药相关基因（TEM、SHV、OXA-10群、PER、VEB、GES、CARB、IMP、VIM、SPM、GIM、DHA、FOX、MOX和OprD2）.结果 33株PAE中TEM阳性33株（100.0%）、SHV阳性2株（6.1%）、GES阳性2株（6.1%）、CARB阳性3株（9.1%）、VIM阳性4株（12.1%）,oprD2基因缺失22株（66.7%）,其余基因均阴性;2株CARB基因扩增产物经测序、BLASTn比对分析为CARB-3型;2株VIM基因为VIM-2型.结论 临床分离的铜绿假单胞菌携带多种β-内酰胺酶基因,oprD2基因缺失率高.     

93株酵母样真菌药敏分析

为了解该院2003年度临床标本中分离酵母样真菌对抗真菌药物的敏感性，采用纸片扩散法测定93株酵母样真菌对5种抗真菌药物的敏感性。结果93株酵母样真菌对5种抗真菌药物两性霉素B、氟咆嘧啶、伊曲康唑、酮康唑、氟康唑的敏感率分别为96．7％、93．5％、77．4％、45．2％、25．8％。     

铜绿假单胞菌氨基糖苷类修饰酶基因与耐药表型的研究

目的探讨临床分离的22株铜绿假单胞菌（Pa）氨基糖苷类修饰酶（AMES）基因与耐药表型的关系。方法对22株铜绿假单胞菌采用稀释法检测庆大霉素、阿米卡星、奈替米星、妥布霉素4种抗菌药物的最低抑菌浓度（MIC），并用聚合酶链反应（PCR）法检测6种氨基糖苷类修饰酶基因。结果本组22株Pa菌庆大霉素耐药15株（68．2％）、阿米卡星耐药3株（13．6％）、奈替米星14株（63．6％）、妥布霉素15株（68．2％），检出aac（3）-Ⅰ阳性14株（63．6％）、aac（6’）-Ⅰ阳性5株（22．7％）、aac（6’）-Ⅱ阳性3株（13．6％）、ant（3”）-Ⅰ阳性1株（4．5％）和ant（2”）-Ⅰ阳性7株（31．8％），aac（3）．Ⅰ为阴性。共有18株检出氨基糖苷类修饰酶基因（81．8％）。结论分离自临床的铜绿假单胞菌氨基糖苷类修饰酶基因检出率高，且与耐药表型一致。     

人小细胞肺癌细胞株H446侧群细胞的生物学特征

背景与目的:肿瘤干细胞学说的提出为肿瘤治疗提供了新的靶点和方向,但肿瘤干细胞的分离纯化一直是个难题。本研究拟从人小细胞肺癌细胞株H446中分离并鉴定出具有干细胞特性的侧群(SP)细胞,研究其生物学特征,为肿瘤干细胞的分离纯化奠定基础。方法:采用荧光激活细胞分选(FACS)技术分选得到H446细胞中SP细胞和非侧群(NSP)细胞,并检测纯度。观察形成悬浮肿瘤细胞球的能力,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及荧光定量PCR检测这两种细胞亚群中CD133、ABCG2、NucleosteminmRNA水平。MTT法比较SP细胞、NSP细胞及未分选细胞体外增殖能力及耐药性差异,流式细胞仪检测体外分化能力,裸鼠成瘤实验检测体内成瘤能力。结果:荧光显微镜下H446细胞中Hoechst33342阴性细胞约为(5.1±0.2)%。流式细胞分选结果显示,H446中SP细胞比例为(6.3±0.1)%。SP细胞在无血清培养基中形成悬浮肿瘤细胞球的能力强于NSP细胞。CD133、ABCG2在SP细胞中的表达是NSP细胞的(21.60±0.26)倍、(7.10±0.14)倍,差异有统计学意义(P<0.01);Nucleostemi...