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目的 探讨新城疫病毒(Newcastle disease virus, NDV)毒株FMW(NDV/FMW)对恶性黑色素瘤维罗非尼(vemurafenib)耐药细胞株WM3248/vemurafenib免疫原性死亡相关分子表达的影响。方法 通过病毒滴度检测考察病毒复制情况;采用CCK8试剂盒检测细胞存活率;Western印迹法检测细胞凋亡蛋白、细胞和上清液中高迁移率族蛋白1(HMGB1)和热休克蛋白90(HSP90)变化;流式细胞术和激光共聚焦技术检测细胞膜上钙网蛋白(calreticulin, CRT)的表达;荧光素酶法检测细胞上清液中的三磷酸腺苷(ATP)的释放。结果 NDV/FMW在WM3248/vemurafenib细胞株内复制,降低耐药细胞存活率并增加细胞凋亡(P<0.001);NDV/FMW诱导WM3248/vemurafenib细胞膜CRT表达增加(P<0.01),ATP分泌、HMGB1和HSP90释放(P<0.05)。结论 NDV/FMW促进WM3248/vemurafenib细胞株死亡,免疫原性死亡是其死亡机制之一。  相似文献
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目的 探讨新城疫病毒(NDV)能否诱导人前列腺癌细胞LNCaP免疫性细胞死亡(ICD)标志物的表达。方法 病毒滴度和蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)检测NDV在细胞内的复制情况;CCK-8法检测细胞增殖情况;蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)检测细胞上清中的热休克蛋白70/90(HSP70/90)及高迁移率族蛋白1(HMGB1);流式细胞术和免疫荧光检测细胞膜上钙网蛋白(calreticulin,CRT)表达量;荧光素酶法检测细胞外ATP的释放。结果 NDV可以在LNCaP细胞内发生复制,并随着时间的增加而增加,P<0.05。NDV感染细胞的增殖能力较未感染组随时间逐渐降低,P<0.001。NDV感染细胞较未感染细胞,细胞上清中HSP90的表达明显增加,并呈时间依懒性,在细胞上清中可以检测到HSP70和HMGB1的表达。两组细胞的裂解液中HSP70/90和HMGB1的表达未有统计学差异,P>0.05。NDV感染后,细胞表面CRT表达阳性率较未感染组显著增加,差异有统计学意义,P<0.001。另外,病毒感染细胞较未感染组向外释放ATP增加,差异有统计学意义,P<0.05。结论 NDV可诱导人前列腺癌细胞发生免疫性细胞死亡,为溶瘤病毒NDV结合当前免疫疗法和化疗治疗前列腺癌提供了理论依据。  相似文献
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