新疆急慢性布鲁菌病患者炎性细胞因子免疫水平研究

目的 探讨新疆急、慢性布鲁菌病患者细胞因子（IL-4、IL-6、IL-10、IL-17、TNF-α、INF-γ）、炎性因子（PCT、hs-CRP）及RF、ESR、ASO、血培养的临床诊断意义。方法 对布鲁菌病住院患者（病例组）和正常对照人群（对照组）采用多重微球流式免疫荧光发光法和生化等技术检测多种细胞因子及炎性因子,并进行统计学分析。结果 病例组和对照组IL-4、IL-6、IL-10、IL-17、TNF-α和IFN-γ分别为2.74(0.97~6.25)和0.56(0.53~0.64)、34.10(13.05~60.8)和0.78(0.41~2.52)、1.83(1.15~2.75)和0.89(0.77~1.13)、6.77(2.48~13.74)和1.03(0.68~1.20)、35.23(5.79~74.98)和1.33(0.80~2.17)、212.96(42.3~436.72) pg/mL和1.69(1.36~1.89) pg/mL,病例组明显高于对照组,差异均有统计学意义（P<0.05）。急性组和慢性组IL-6、IL-10、IL-17、TNF-α、IFN-γ分别为65.32(36.27~68.60)和29.38(11.30~53.09)、2.38(1.51~3.34)和0.89(0.77~1.13)、11.98(3.92~16.49)和5.27(2.24~12.49)、50.88(16.59~96.69)和28.24（5.30~64.40）、319.00（145.14~588.52）pg/mL和160.52（36.5~418.54） pg/mL,PCT和hs-CRP分别为0.08(0.06~0.12) pg/mL和0.04(0.03~0.06) pg/mL、12.60（5.0~30.8）mg/L和3.30（1.2~16.2） mg/L,差异均有统计学意义（P<0.05）;低抗体滴度组和高抗体滴度组IL-6、PCT 、hs-CRP 、RF、ESR、血培养阳性率分别为30.46(11.30~50.02) pg/mL和46.20(17.72~79.69) pg/mL、0.04(0.03~0.06) pg/mL和0.07(0.04~0.11) pg/mL、3.03(0.85~9.70) mg/L和13.65(2.97~31.43) mg/L、3.0（0.8~9.7）IU/mL和13.6（3.0~31.4）IU/mL、15（7~31）mm/h和27（15~46）mm/h、15.3%和33.3%,差异均有统计学意义（P<0.05）。单因素分析显示6种细胞因子均为布鲁菌病患病程度的危险因素,多因素Logistic回归分析显示IL-6和INF-γ水平是布鲁菌病患病程度的独立危险因素。结论 IL-4、IL-6、IL-10、IL-17、TNF-α、IFN-γ及PCT、hs-CRP等指标不仅能及时准确反映布鲁杆菌感染发病程度和临床分期的免疫状况,而且IL-6和INF-γ表达水平具有独立的临床诊断评估作用,血培养在急性期或高滴度组具有重要的临床诊断价值。     

Subcutaneous immunization with a novel immunogenic candidate (urease) confers protection against Brucella abortus and Brucella melitensis infections

Brucellosis is a world prevalent endemic illness that is transmitted from domestic animals to humans. Brucella spp. exploits urease for survival in the harsh conditions of stomach during the gastrointestinal infection. In this study, we examined the immune response and the protection elicited by using recombinant Brucella urease (rUrease) vaccination in BALB/c mice. The urease gene was cloned in pET28a and the resulting recombinant protein was employed as subunit vaccine. Recombinant protein was administered subcutaneously and intraperitoneally. Dosage reduction was observed with subcutaneous (SC) vaccination when compared with intraperitoneal (IP) vaccination. rUrease induced mixed Th1–Th2 immune responses with high titers of specific IgG1 and IgG2a. In lymphocyte proliferation assay, splenocytes from IP and SC‐vaccinated mice displayed a strong recall proliferative response with high amounts of IL‐4, IL‐12 and IFN‐γ production. Vaccinated mice were challenged with virulent Brucella melitensis, B. abortus and B. suis. The SC vaccination route exhibited a higher degree of protection than IP vaccination (p value ≤ 0.05). Altogether, our results indicated that rUrease could be a useful antigen candidate for the development of subunit vaccines against brucellosis.     

Relevance of autoantibody detection to the rapid diagnosis of brucellosis

The rose bengal test is often used for rapid diagnosis of human brucellosis in endemic areas. However, autoantibodies have never been investigated as a reason for false-positive or false-negative results. Therefore, the aim of this study was to show the effect of autoantibody detection on the rapid diagnosis of human brucellosis in an endemic area. The study included 2 groups: antinuclear antibody (ANA)-positive and ANA-negative groups. Diagnosis of brucellosis was established by isolation of Brucella spp. from blood culture. The overall sensitivity and specificity of the rose bengal test were 100% and 90.8%, respectively. The specificity (100% versus 89%) and positive predictive value of the test (100% versus 8%) fell markedly from the ANA-negative to the ANA-positive group. As a conclusion, this study verified our suspicion about the effect of autoantibodies on rose bengal test results to the diagnosis of human brucellosis. However, to have definite decisions, extensive studies with larger populations are needed.     

浙江省中部地区布鲁菌病六例临床分析

布鲁菌病是由布鲁菌引起的人畜共患性传染病,又称地中海弛张热、马尔他热、波浪热或波状热,属自然疫源性疾病,主要以牛、羊、猪为传染源,人主要是接触病畜而感染。布鲁菌病临床表现复杂,病情轻重不一,可侵犯全身多个系统,常表现为发热、乏力、多汗、关节痛、肝脾肿大等,但症状缺乏典型性。该病一般在内蒙古等北方牧区流行,南方地区很少有该病流行。我们分析了浙江省金华市6例布鲁菌病的流行病学、临床特征、治疗等情况,旨在提高对该病的认识。     

慢性布氏菌病骨关节病的CT观察

分析了２７例慢性布病性骨关节病在脊柱及骶髂、髋、膝、肩和肘等部位的ＣＴ所见，其特点为：１．基本稳定或缓慢进展的多部位，多关节，多组织受累；２．大关节骨端骨性关节面下松质骨的多发、局灶性破坏，且周边有明显硬化环绕是其典型表现；３．骨破坏灶有显著的反应性骨和／或骨膜增生，新生骨内可有新的破坏灶；４．受累关节可见间隙变窄、增宽、融合、关节软骨骨化，游离体及滑囊钙化。     

酶联免疫吸附双抗原夹心法检测人畜布氏菌抗体的研究

目的 为人畜布氏菌病血清学诊断、监测及流行病学调查提供实用和简便的一种酶免疫试验技术。方法 在制备高滴度布氏菌抗原辣根过氧化物酶结合物及其冻干制品基础上，应用酶联免疫吸附双抗原夹心法即双抗原夹心酶联免疫吸附试验（DAgS－ELISA）、试管凝集试验（SAT）及虎红平板凝集试验（RBPT）对从山西省布氏菌病疫区收集的布氏菌病患、布氏菌感染羊、牛、猪以及健康人、羊、牛、猪共计290份血清进行对比检测。结果 上述3种试验对健康人、羊、牛、猪共计140份血清检查均为阴性反应，用DAgS-ELISA对布氏菌感染人、羊、牛、猪共计150份血清检查，其阳性率分别为91．4％、74．6％、66．7％及66．7％，从总体而言，检查的特异性及敏感性，以DAgS-ELISA优于SAT及RBPT。结论 双抗原夹心酶联免疫吸附试验检测人畜布氏菌抗体，不仅特异、敏感、简便，而且制备一种布氏菌抗原酶结合物及其冻干制品，可用于人及各种动物布氏菌抗体的检测，值得推广应用。     

神经型布氏杆菌病6例临床分析

目的 探讨神经型布氏杆菌病的临床特点.方法 回顾性分析我科2013年4月至2014年7月收治的6例神经型布氏杆菌病患者的流行病学、临床表现、实验室检查结果及影像学资料.结果 6例患者均为男性,布氏杆菌血清凝集试验均为阳性;6例均有脑膜炎表现,3例表现为脑膜脑炎,2例伴脊髓损害,4例伴听神经损害.5例应用米诺环素、利福平及头孢曲松3种药物联合治疗,1例应用多西环素、庆大霉素治疗,均预后良好.结论 神经型布氏杆菌病临床表现多种多样,脑膜炎型最常见.来自布氏杆菌病流行区患者表现为原因不明的神经系统症状时,需考虑鉴别神经型布氏杆菌病.     

45例布鲁菌病患者实验室诊断指标特征

目的分析布鲁菌病患者不同病期实验室指标变化特征，为布鲁菌病诊断及预后评估提供参考。 方法对天门市第一人民医院确诊的45例布鲁菌病患者的降钙素原（PCT）、超敏C-反应蛋白（hsCRP）、白细胞（WBC）、血小板（PLT）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、肌酐（Crea）、尿微量白蛋白（mALB）和红细胞沉降率（ESR）等指标以及血培养阳性率和试管凝集试验阳性率进行回顾性分析。根据临床分期分组：急性期患者23例，亚急性期患者8例和慢性期患者14例。 结果急性期与亚急性期布鲁菌病患者感染性指标WBC、PCT、hsCRP、ALT、Crea和mALB水平差异均无统计学意义（t_WBC = 2.04、P = 0.082，t_PCT = 1.98、P = 0.093，t_hsCRP = 2.18、P = 0.081，t_ALT = 0.94、P = 0.18，t_Crea = 2.31、P = 0.088，t_mALB = 2.02、P = 0.085）。急性期布鲁菌病患者AST水平显著低于亚急性期患者（t = 7.59、P = 0.023），且急性期布鲁菌病患者WBC、PCT、hsCRP、ALT、Crea和mALB水平较慢性期患者差异有统计学意义（t_WBC = 8.43、P = 0.021，t_PCT = 18.36、P = 0.013，t_hsCRP = 12.35、P = 0.020，t_ALT = 5.38、P = 0.024，t_Crea = 4.81、P = 0.036，t_mALB = 10.87、P = 0.020）。亚急性期与慢性期布鲁菌病患者感染性指标WBC、PCT、hsCRP、ALT、Crea和mALB水平差异均无统计学意义（t_WBC = 1.12、P = 0.096，t_PCT = 2.19、P = 0.082，t_hsCRP = 2.03、P = 0.084）。随着病期延长，布鲁菌病患者从急性期进展为慢性期，PLT降低、ESR增快、血培养阳性率逐渐降低，但试管凝集试验阳性率一直较高。急性期、亚急性期和慢性期布鲁菌病患者治疗前后PCT和hsCRP差异均有统计学意义（t_PCT = 7.85、16.31、27.60，P = 0.018、0.0023、0.003；t_hsCRP = 9.98、12.14、7.88，P = 0.021、0.036、0.031）。 结论WBC、PLT、ALT、AST、Crea和ESR等指标变化可反映布鲁菌病患者病情的动态变化，血培养和试管凝集试验阳性为布鲁菌病诊断标准；PCT和hsCRP可作为治疗前后患者病情监测及预后的参考依据。     

兔布鲁杆菌病性脊柱炎动物模型的建立

目的 探讨使用构建兔脊柱结核模型的相同方法用以构建新西兰兔布鲁杆菌病性脊柱炎动物模型,并对其可行性进行评价。方法 48只新西兰兔采用数表法随机分为实验组16只、对照组16只、空白组16只。实验组于第6腰椎(L6)上终板下方钻孔,填入明胶海绵,在其中浸注种植M5羊种布鲁杆菌弱毒苗混悬液0.1ml(3×10 ⁸CFU/ml);对照组浸注0.9% NaCl溶液0.1ml;空白组不做任何处理。 结果 术后8周兔存活率实验组为75.0% (12/16)、对照组为87.5% (14/16),空白组为100.0% (16/16)。实验组术后4周CT扫描三维重建结果显示5只出现椎间隙变窄,MRI检查结果显示7只有椎旁软组织脓肿形成;对照组未出现椎旁软组织脓肿形成,椎间隙无变化。实验组术后8周行CT扫描三维重建复查,结果显示8只出现椎间隙变窄,MRI检查结果显示10只出现椎旁软组织脓肿形成及椎间盘信号改变;对照组未见椎旁软组织脓肿形成及椎间盘信号改变。实验组术后8周进行组织病理学检查,显示兔椎旁软组织均有病变组织细胞增生及以淋巴细胞为主的炎性细胞浸润;对照组与空白组未出现病变组织细胞增生及炎性细胞浸润。结论 在新西兰兔腰椎椎体的上终板下钻孔、明胶海绵填塞、浸注种植M5羊种布鲁杆菌弱毒苗、石蜡封闭孔道的方法,可成功构建兔布鲁杆菌病性脊柱炎动物模型。