骨肉瘤差异表达基因的生物信息学分析及关键基因筛选

目的筛选成骨型骨肉瘤与正常成骨细胞的差异表达基因, 寻找成骨型骨肉瘤发生、发展的关键基因。方法从Gene Expression Omnibus(GEO)数据库获得正常成骨细胞和骨肉瘤组织的基因表达数据集GSE33382, 采用R语言的limma包筛选正常成骨细胞和成骨型骨肉瘤的差异表达基因, 对差异表达基因进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。采用String数据库构建蛋白交互网络, 应用Cytoscape软件的分子复合物检测(MCODE)插件筛选互作网络中的网络模块, 应用Cytoscape软件中的BiNGO模块对MCODE筛选得到的前3个主要模块所包含的差异表达基因进行基因本体(GO)富集分析。采用MCC算法筛选蛋白互作网络中前10个关键基因。从GEO数据库获得骨肉瘤的基因表达和生存数据集GSE39055, 采用Kaplan-Meier法进行生存分析。选取2005年1月至2015年12月福建医科大学附属第一医院收治的48例成骨型骨肉瘤患者的资料进行验证, 采用免疫组化法测定骨肉瘤组织中STC2蛋白的表达, 结合患者的临床资料进行生存分析。结果从GSE33382数据集...     

四肢骨肉瘤保肢治疗与预后影响因素分析

目的探究四肢骨肉瘤保肢治疗与预后的危险因素。方法 89例四肢骨肉瘤患者行保肢治疗后随访3年,依据3年预后结局分为生存组(71例)与死亡组(18例),比较两组患者临床特征,分析死亡的相关因素,将相关因素代入Cox比例风险模型分析危险因素。结果生存组及死亡组四肢骨肉瘤患者Enneking分期及是否术后肺转移、治疗后病理性骨折、术前乳酸脱氢酶升高、完成化疗情况比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。术后出现肺转移、未完成化疗及Enneking分期为Ⅱ期或Ⅲ期为四肢骨肉瘤保肢治疗后3年内死亡的危险因素(P﹤0.05)。结论尽早确诊、尽早治疗、积极预防病理性骨折、完成规范化疗及预防肺转移的发生能够辅助提高四肢骨肉瘤患者保肢治疗后的生存率。     

KPNA2表达载体的构建及其对骨肉瘤细胞生长的影响

目的:通过分子克隆构建KPNA2过表达载体，探究其对骨肉瘤细胞143B生长的影响。方法:利用Trizol法提取Hela细胞总RNA，而后通过PCR反应扩增KPNA2基因，将扩增产物克隆至表达载体pcDNA3.1+构建KPNA2过表达质粒。通过qPCR实验和Western blot实验检测KPNA2过表达载体转染143B细胞后的表达效率。利用CCK-8、平板克隆形成实验检测143B细胞的增殖状况，利用流式细胞术检测143B细胞的周期分布。结果:qPCR实验和Western blot实验均表明KPNA2过表达质粒转染后，143B细胞内KPNA2表达水平显著上调。CCK-8、平板克隆形成实验结果证实KPNA2上调能够促进143B细胞增殖。流式细胞术结果表明过表达KPNA2能够加快143B细胞周期进程。结论:KPNA2能够促进骨肉瘤细胞系143B生长，为骨肉瘤早期诊断和靶向治疗提供实验依据和理论基础。     

Wnt/β-catenin信号转导通路对骨肉瘤癌干细胞的调节作用

部分骨肉瘤患者对化疗缺乏有效反应,其耐药机理目前尚不明确。骨肉瘤的难治性、复发转移和抗药性与癌干细胞有关。癌干细胞可通过细胞表面特异性标记物、侧群细胞、细胞球形成等进行辨别。多项研究发现,骨肉瘤中存在Wnt/β-catenin信号转导通路的异常表达。通过调控该信号转导通路可改变骨肉瘤癌干细胞的特性,抑制骨肉瘤的增殖、复发和远处转移。该文对Wnt/β-catenin信号转导通路对骨肉瘤癌干细胞的调节作用及治疗前景作一综述。     

骨肉瘤复发性因素的教学研究

目的 探讨在临床医学专业见习生带教过程中结合骨肉瘤复发性因素进行教学的效果。方法 选取陆军军医大学临床医学专业见习生102名，随机分为两组，对照组应用常规教学，研究组联合应用骨肉瘤复发性因素教学。观察比较两组见习生对不同教学模式的自身应用效果评价、满意程度评价情况、理论考核及技能考核评分情况。结果 研究组的自身应用效果评分均高于对照组，满意程度评价情况优于对照组，理论知识及实际操作能力得分均显著高于对照组，上述指标组间比较，差异均有统计学意义（P均＜0.05）。结论 对临床医学专业的见习带教生应用骨肉瘤复发性因素分析模式进行带教，让见习生从根本上了解骨肉瘤复发的影响因素，可显著提高见习生对疾病理论知识及操作技能方面的掌握程度，同时还可显著提高见习生对带教的满意度。     

外泌体在骨肉瘤侵袭转移及耐药性中的研究进展

骨肉瘤(osteosarcoma)是一种具有高度侵袭性的恶性肿瘤，已成为青少年人群中导致癌相关死亡的首要疾病。但由于其早期高发的肺转移率以及广泛的对化疗药物耐药性问题，骨肉瘤在临床上的治疗仍存在巨大挑战。目前，骨肉瘤的早期诊断及基因治疗已经在国内外的基础研究和临床应用中取得了一定的进展，其中外泌体(exosomes)在骨肉瘤中的诊断治疗具有极大的应用前景。外泌体是一种可由多种活细胞分泌的纳米级(40~100 nm)微囊泡，它具有传递mRNA、miRNA、DNA和蛋白质等各种信息和功能性物质的功能。它可由多种活性细胞产生和分泌，存在于多种体液和细胞间液中。由于其特殊的存在和传递形式以及所搭载的信息和物质，因此，骨肉瘤来源的外泌体可通过多种途径和方式促进骨肉瘤的发生、侵袭转移、耐药性及免疫逃逸。利用这些特点，外泌体可被人为搭载靶向药物或治疗性基因等物质，或通过多种方式对其分泌和释放进行调控来治疗多种肿瘤。近年来，关于外泌体在骨肉瘤方面作用和应用的研究成为热点，但仍停留在基础研究且尚未在临床的诊断及治疗中进行应用。本文旨在对外泌体在骨肉瘤侵袭转移及耐药性上的作用机理、临床诊断、治疗方面的研究进展进行总结，望有助于为利用外泌体诊断、治疗和改善骨肉瘤预后提供参考。      

微小RNA-125a-5p负性调控基质金属蛋白酶11对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的检测微小RNA-125a-5p(miR-125a-5p)在骨肉瘤细胞及正常成骨细胞(NHOst)中的表达特征,并探讨其通过负性调控基质金属蛋白酶11(MMP-11)对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法采用荧光定量PCR分析骨肉瘤细胞及正常成骨细胞中miR-125a-5p的表达情况。体外转染miR-125a-5p模拟物(mimics)至骨肉瘤细胞系(HOS和Saos-2),并观察其对细胞增殖及凋亡的影响。通过双荧光素酶报告基因试验及Western blot验证miR-125a-5p对MMP-11的负性调控作用。结果 miR-125a-5p在HOS和Saos-2细胞中的表达均显著低于NHOst细胞(P 0. 05)。HOS和Saos-2细胞中转染miR-125a-5p mimics可显著升高细胞内源性miR-125a-5p表达水平(P 0. 05)。过表达miR-125a-5p抑制HOS和Saos-2细胞的增殖,并促进细胞凋亡(P 0. 05)。miR-125a-5p与MMP-11信使RNA(mRNA) 3'-非编码区(3'-UTR)存在互补结合位点,其通过与MMP-11结合而抑制骨肉瘤细胞中MMP-11蛋白的表达(P 0. 05)。结论 miR-125a-5p在骨肉瘤细胞中呈现低表达,过表达miR-125a-5p可通过负性调控MMP-11抑制骨肉瘤细胞的增殖,并促进细胞凋亡,提示miR-125a-5p可作为骨肉瘤新的分子治疗靶点。     

围术期心理护理干预对骨肉瘤手术患者应激状态的影响

目的探讨围术期心理护理干预对骨肉瘤手术患者应激状态的影响。方法选取2017年1月至2018年6月间陕西省安康市中心医院收治的72例拟进行手术治疗的骨肉瘤患者进行回顾性分析,将采用常规围术期护理干预的36例患者纳入对照组,采用常规围术期护理干预基础上强化开展心理护理干预的36例患者纳入干预组。比较两组患者生理应激、心理应激状态及手术治疗情况。结果干预后,干预组患者的血压控制水平和心率水平均优于对照组患者,且干预组患者的抑郁评分量表(SAS)、焦虑自评量表(SDS)和症状自评量表(SCL-90)评分均低于对照组患者,干预组患者卡氏功能状态评分高于对照组患者,差异均有统计学意义(均P <0. 05)。结论开展围术期心理护理干预能有效降低骨肉瘤手术患者的生理和心理应激状态,提升治疗依从性,改善预后。