基于层次分析法（AHP）的保健食品原料评价体系构建及分析

目的建立保健食品原料评价体系(Functional Food Crude Materials Evaluation System,FUFMES),为保健食品原料目录排名提供科学依据与技术保障。方法首先,利用文献调研和多轮专家访谈方法筛选FUFMES的指标并确定其层级关系;第二,使用层次分析法(Analytic Hierarchy Process,AHP)计算指标权重,具体方法是依据专家打分构建判断矩阵,利用R语言进行一致性检验与最大特征根检验,得出各级指标权重;第三,使用极值法计算原料的单个指标值;第四,利用线性加权综合法得到每种原料的评价指数并据此进行排名;最后,将获得的分析结果与专家评价结果进行比较。结果 FUFMES包括6个一级指标、39个二级指标、11个三级指标。利用FUFMES对9种保健食品原料进行评价,获得的评价指数依次是:西洋参(0.49)、人参(0.48)、银杏叶(0.21)、灵芝孢子粉(0.08)、鱼油(0.06)、螺旋藻(0.03)、辅酶Q10(0.02)、褪黑素(0.01)、大蒜油(-0.03)。基于该评价指数的排名结果与专家评价结果显示了较高一致性。结论构建了科学、完整的FUFMES,FUFMES将成为保健食品原料目录评价与排名的有力工具,为推进保健食品原料备案制提供科学依据与技术保障。     

赤芝FPS基因酵母单杂交文库构建及其上游转录因子的筛选

目的筛选赤芝三萜合成途径中法尼基焦磷酸合酶(farnesyl diphosphate synthase,FPS)基因的上游调控转录因子。方法首先克隆了FPS基因启动子,并连接至pAbAi质粒构建诱饵载体pAbAi-FPS。将pAbAi-FPS转化Y1H酵母感受态细胞构建诱饵菌。采用SMART技术构建赤芝酵母单杂交cDNA文库,再将纯化的双链cDNA、pGADT7-Rec共转化诱饵菌株,筛选FPS上游的转录调控因子。结果构建了含pAbAi-FPS的诱饵载体并筛选出诱饵菌株,构建了cDNA文库并转化诱饵菌株,筛选出阳性克隆37个,得到作用FPS基因上游的转录调控因子18个,包括转录因子3个、核糖体蛋白5个及其他家族蛋白10个。结论筛选出转录因子GlSNF2、GlMHR和GlZn2Cys6为调控FPS表达的候选基因,为深入研究FPS基因的表达调控机制奠定了研究基础。     

灵芝多糖结构特征及药理作用的研究进展

灵芝多糖是灵芝提取物中最关键的药效成分之一,具有免疫调节、抗肿瘤、抗氧化、降血糖、抗糖尿病及其并发症、抗炎、抗菌等药理作用。在药用资源和保健食品添加物方面具有很大的开发利用价值。此外,该成分在化学结构和组成上有很大的多样性,对其药理作用也有一定影响。本文将对灵芝多糖结构特征及药理活性方面的研究进行综述,为其进一步开发利用提供理论依据。     

芝芪菌质提取物免疫活性研究

目的 探究芝芪菌质及其各部位免疫活性。 方法 芝芪菌质为灵芝菌丝-黄芪药渣的固体发酵复合体。通过小鼠碳粒廓清实验,鸡红细胞吞噬功能实验,小鼠血清溶血素、免疫球蛋白M(IgM)和免疫球蛋白G(IgG)的含量检测,以及小鼠脾淋巴细胞增殖实验,筛选了芝芪菌质水提液,芝芪菌质水浸液,芝芪菌质水提液经大孔树脂分离的部位(水洗脱液、40%乙醇洗脱液和95%乙醇洗脱液)的非特异性和特异性免疫活性。 结果 碳粒廓清实验中,K值最高为水浸液和水提液组的0.23,α值最高为水提液组的2.44。吞噬指数最高为水浸液和水提液组的0.36,鸡红细胞吞噬百分率最佳为水浸液组的47.25%。小鼠溶血素含量最高为水洗脱组的0.4。IgM含量最高为水提液组的34.19 mg·L-1,而IgG最高则是水浸液组的44.50 mg·L-1。淋巴细胞增殖指数最高为40%乙醇洗脱液组的1.23。 结论 芝芪菌质水提液、芝芪菌质水浸液和40%乙醇洗脱液具有显著的免疫增强功效,为芝芪菌质制成增强人体抵抗力的功能性食品及药品提供实验数据和理论参考。     

富硒灵芝对妊娠期糖尿病大鼠脂代谢的调节作用

【摘要】 目的 探讨富硒灵芝对妊娠期糖尿病（GDM）大鼠脂代谢的作用,为富硒灵芝可安全用于孕妇提供参考依据。 方法 选取100只SD大鼠（20只雄性,80只雌性）,随机选取12只雌鼠作为正常组,其余68只雌鼠给予高脂饲料喂养8周后,将雄鼠与雌鼠按1∶4同笼过夜,次日确定妊娠后的所有高脂饲料喂养的雌鼠给予腹腔注射链脲佐菌素 (STZ,35 mg/kg)制备GDM模型,模型构建成功后,将其随机分为模型组、盐酸二甲双胍组,以及富硒灵芝（低、中和高剂量）组,每组各12只。分别于治疗0、7 d和处死前尾静脉取血法收集大鼠血糖,检测血糖变化,药物治疗14 d后处死,收集血液检测血脂［总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL-C）、低密度脂蛋白（LDL-C）］及肝功能［天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）］,收集肝脏组织采用苏木精-伊红（HE）染色检测肝脏病理学,酶联免疫吸附法（Elisa）检测肝脂,同时蛋白免疫印迹法（Western Blot）检测肝脏脂代谢酶固醇原件调节蛋白-1c（SREBP-1c）、乙酰辅酶A羧化酶α（ACCα）、硬脂酰辅酶A去饱和酶1（SCD1）和过氧化物酶体增殖物激活受体α（PPARα）蛋白表达特点。 结果 HE染色结果可见正常组肝细胞清晰可见,纹理清晰,模型组则呈明显脂肪颗粒浸润,与模型组相比,各治疗组均有一定好转;与正常组相比,模型组AST、ALT、TC、TG和LDL-C明显升高 (P＜0.05),HDL-C明显降低(P＜0.05),富硒灵芝和盐酸二甲双胍组均可以明显降低AST、ALT、TC、TG和LDL-C含量（P＜0.05）,升高HDL-C (P＜0.05);与正常组相比,模型组血糖明显升高 (P＜0.05),与模型组相比,在治疗1周和2周后,盐酸二甲双胍组血糖明显降低 (P＜0.05),治疗第14天,富硒灵芝高剂量组血糖低于模型组 (P＜0.05);与正常组相比,模型组肝脏组织中SREBF1 及 ACCα 蛋白表达明显升高 (P＜0.05),SCD和PPARα明显降低 (P＜0.05),与模型组相比,各治疗组均改善 (P＜0.05)。 结论 富硒灵芝对妊娠期糖尿病大鼠脂代谢具有明显的调节作用,今后或许可用于妊娠期糖尿病孕妇的辅助治疗。     

基于HPLC-MS/MS技术快速鉴定灵芝化学成分

〔目的〕采用高效液相色谱-串联质谱法(HPLC?MS/MS)对灵芝的化学成分进行快速鉴定.〔方法〕采用色谱柱Hypersil GOLD aQ(100 mm×2.1 mm,1.9μm),流动相为含0.1％甲酸的水溶液(A液)和含0.1％甲酸的乙腈溶液(B液).采用梯度洗脱方式,流速0.3 mL/min,柱温40℃,进样量为5μL.质谱分析采用电喷雾离子源(ESI)正负离子检测模式,质量扫描范围m/z 150～1500μ.使用Compound Discoverer 3.1(Thermo Fisher Scientific,USA)软件进行HPLC?MS/MS数据处理.〔结果〕从灵芝中鉴定了85个化合物,主要包括黄酮类、有机酸类、核苷类、氨基酸类、脂肪酸类、糖苷类、萜类、甾类、酚类、苯丙素类和生物碱类等.〔结论〕本研究方法快速鉴定了灵芝醇提物化学成分,为进一步研究灵芝的药效基础和作用机制提供理论基础.     

虎乳灵芝栽培品和野生品的脂溶性成分分析

目的比较虎乳灵芝栽培品和野生品脂溶性化学成分的差异。方法采用回流提取法提取虎乳灵芝野生品和栽培品(包括大米和木屑培养)菌核的脂溶性成分,用气相色谱-质谱联用(GC-MS)法分析栽培品和野生品的化学成分,并计算各化学成分的相对百分含量。结果虎乳灵芝大米、木屑栽培品及野生品分别鉴定出11种、10种、14种化合物。主要为烃类化合物,三者共有成分为2,4-二叔丁基苯酚、二十五烷和三十一烷等,并且二十五烷和三十一烷在大米栽培品、木屑栽培品和野生品中相对百分含量分别为15.85%、17.36%、16.43%和12.01%、11.58%、19.29%。三者成分差异表现为:大米栽培品含有麦角甾醇、二十九烷;木屑栽培品含有二十二烷、二十三烷、二十四烷;野生品还含有二十四烷、芥酸酰胺、邻苯二甲酸二丁酯、亚油酸乙酯。结论栽培品和野生品的脂溶性成分中含有2,4-二叔丁基苯酚、二十五烷和三十一烷等相同的化学成分,但又存在明显的差异,可为虎乳灵芝栽培品的质量评价和开发利用提供参考。     

团状雪灵芝化学成分及其抑制TGF-β1活性

目的研究团状雪灵芝的化学成分及其抑制TGF-β1活性。方法团状雪灵芝90%乙醇提取物采用D101大孔吸附树脂、硅胶、微孔树脂和C₁₈反相制备型高压液相进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。利用脂多糖诱导RAW264.7细胞模型,测定其对TGF-β1的抑制作用。结果从中分离得到16个化合物,分别鉴定为1,2,3,4-四氢-1,3,4-三羰基-β-咔啉(1)、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷(2)、β-咔啉-1-羧酸(3)、蚤缀碱A(4)、3,3′,4′-三-O-甲基鞣花酸(5)、木犀草素(6)、咖啡酸(7)、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷(8)、芹菜素(9)、柚皮素(10)、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖(11)、鼠李秦素(12)、salcolin A(13)、1-O-feruloylglycerol(14)、4-羟基苯甲醛(15)、dibutyl-phthalate(16)。化合物1、3~4、6、11、13对TGF-β1的IC₅₀值分别为4.95、5.79、7.76、11.55、18.89、15.65μg/mL。结论所有化合物均为首次从该植物中分离得到,化合物1、3~4、6、11、13对TGF-β1有较强的抑制作用。