形觉剥夺性高度近视豚鼠巩膜形态改变及缺氧诱导因子-1α和氧自由基在高度近视中的作用

目的　观察形觉剥夺性高度近视（form deprivation high myopia，FDHM）豚鼠巩膜形态变化，探讨缺氧诱导因子-1α（hypoxia-inducible factor-1α，HIF-1α）及氧自由基在高度近视中的作用。方法　将豚鼠适应性饲养1周后，随机分为空白对照组（25只）和模型组（25只）。模型组豚鼠右眼行眼睑缝合，所有模型组豚鼠均选择右眼作为FDHM组，对侧眼为自身对照组。空白对照组豚鼠不做任何处理。于造模前及造模后8周采用检影镜测量屈光度，A超进行生物测量。形觉剥夺8周以后处死豚鼠，观察巩膜形态和超微结构的变化，测定巩膜HIF-1α相对表达量，超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）活力及丙二醛（malondialdehyde，MDA）的含量。结果　豚鼠形觉剥夺8周以后，FDHM组屈光度从（+3.59±0.33）D变为（-7.96±0.55）D，明显高于空白对照组（+0.89±0.32）D、自身对照组（-0.55±0.49）D（均为P<0.05）；玻璃体腔深度为（4.12±0.13）mm明显高于空白对照组（3.71±0.23）mm和自身对照组（3.93±0.04）mm（均为P<0.05）；眼轴长度为（8.93±0.22）mm明显长于空白对照组（7.95±0.37）mm和自身对照组（8.01±0.15）mm（均为P<0.05）。巩膜组织明显变薄，细胞外基质增多，成纤维细胞密度降低，胶原纤维平均直径减小。FDHM组巩膜中HIF-1α相对表达量、MDA含量明显高于空白对照组和自身对照组，SOD活力明显低于空白对照组和自身对照组（均为P<0.05）。结论　形觉剥夺8周后，豚鼠FDHM眼近视度数明显增加，玻璃体腔深度增加，眼轴延长，巩膜形态发生病理性变化；HIF-1α、SOD、MDA可能参与了FDHM的形成。     

以蒙医学理论试论氧自由基与线粒体

蒙医基础理论中十分注重消化功能,认为一切内科疾病皆因“消化不良”引起,认为人体是以三根七素相互依赖的协调关系为基础进行生命活动的整体,体内胃火(主要为消化希拉)正常,充足时,可促使饮食消化及清浊生华,滋养三根七素,保持人体正常生命活动。现代生物学研究发现,与生命活动相关的氧自由基是食物消化过程中的中间产物,导致诸多慢性疾病。氧自由基产生的主要场所为线粒体。近几年来氧自由基与线粒体的研究引起了人们的广泛关注,已成为诸多医学研究者的主要研究对象,成为医学界研究热点。氧自由基与线粒体的性质、功能及与疾病关系与蒙医基础理论中的消化不良、胃火功能十分相似。本文试从蒙医学基础理论角度对氧自由基与线粒体进行分析。     

醛糖还原酶和晚期糖基化终末产物受体对糖尿病视网膜病变神经元凋亡的影响

目的　探究醛糖还原酶和晚期糖基化终末产物受体对糖尿病视网膜病变神经元凋亡的影响。方法　Wistar大鼠36只，随机分为对照组、模型组、转染组，后两组建立糖尿病大鼠模型。模型建立成功后，构建含有晚期糖基化终末产物受体siRNA的质粒并利用慢病毒转染入转染组大鼠体内。造模后4周、8周、12周，记录各组大鼠体质量及空腹血糖。造模后9周，禁食6 h，测定口服葡萄糖耐量。造模后12周，处死全部大鼠后，TUNEL法检测各组大鼠视网膜神经元凋亡情况，荧光分光光度计测定醛糖还原酶活性，Western blotting法测定晚期糖基化终末产物受体的表达，RT-PCR检测视网膜中Bcl-2和Bax mRNA相对表达量。结果　造模后4周、8周、12周，转染组和模型组的大鼠体质量均低于对照组（均为P<0.05）；造模后12周，转染组大鼠体质量高于模型组（P<0.05）。造模后4周、8周、12周，各组内大鼠空腹血糖水平均无明显变化（均为P>0.05），转染组和模型组大鼠的空腹血糖水平均高于对照组（均为P<0.05）。模型组和转染组大鼠在口服葡萄糖后30 min时，血糖水平均高于对照组（均为P<0.05）；在120 min时分别下降至最低，但仍高于对照组（均为P<0.05）。模型组和转染组的视网膜神经元凋亡指数、醛糖还原酶活性、晚期糖基化终末产物受体和Bax mRNA相对表达量均高于对照组（均为P<0.05），且转染组均高于模型组（均为P<0.05）。模型组和转染组的Bcl-2 mRNA相对表达量均低于对照组（均为P<0.05），转染组低于模型组（P<0.05）。结论　晚期糖基化终末产物结合受体后产生大量的氧自由基损伤，可能是导致糖尿病视网膜神经元凋亡，进而导致糖尿病视网膜病变发生的机制之一。     

高渗盐水联合依达拉奉治疗外伤性脑水肿的疗效及对患者神经功能的影响

目的探讨高渗盐水联合依达拉奉治疗外伤性脑水肿的疗效及对患者神经功能的影响。方法选取我科收治的90例外伤性脑水肿患者为研究对象,随机分为2组各45例。常规治疗基础上,对照组给予高渗盐水治疗,观察组在对照组基础上联合应用依达拉奉治疗。采用脑卒中神经功能缺损评分(NIHSS)评定神经功能。比较2组治疗后脑水肿体积、神经功能、氧自由基指标水平及不良反应发生情况。结果与对照组相比,观察组治疗后3d、7d和14d时脑水肿体积显著缩小,治疗后7d、14dNIHSS评分显著降低,差异均有统计学意义(P均0.05)。氧自由基指标方面,与对照组相比,观察组治疗后NO、LPO水平显著降低,SOD水平显著升高,差异均有统计学意义(P0.05)。治疗过程中,2组均未出现严重不良反应。结论高渗盐水联合依达拉奉治疗外伤性脑水肿疗效可靠,能够显著缩小脑水肿体积,减轻神经功能损害,降低体内氧自由基水平,且不良反应少,临床上值得进一步研究。     

氧化应激条件下克癃胶囊对PC-3细胞内GSH、ROS水平的影响

目的:研究克癃胶囊对双氧水诱导的PC-3细胞氧化应激反应的保护作用。方法:体外培养PC-3细胞,建立双氧水诱导PC-3细胞氧化应激的模型,给予克癃胶囊进行干预。分为4组:正常组、模型组(H_2O_2 100μmol/L)、阴性对照组(tBHQ50μmol/L+H_2O_2100μmol/L)、克癃胶囊组(克癃方100μg/m L+H_2O_2 100μmol/L)以DCFH-DA为荧光探针,利用流式细胞仪检测细胞内活性氧自由基(ROS)含量,利用化学显色法测定PC-3细胞内还原型谷胱甘肽(GSH)含量,评价细胞氧化应激水平。结果:ROS、GSH水平模型组与正常组比较,阳性对照组、克癃胶囊组与模型组比较,差异均有统计学意义(P0.01);ROS水平阳性对照组与克癃胶囊组比较,差异有统计学意义(P0.01),但两组GSH水平比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论:克癃胶囊对双氧水诱导的PC-3细胞氧化应激具有保护作用。     

氧自由基对口腔粘膜损伤的动物实验研究(Ⅲ)——氧自由基对动物粘膜酶活性的影响

为了了解甲基紫精诱导的氧自由基造成金黄地鼠口腔粘膜急性非特异性坏死性溃疡性炎症发生的机制,对6种线粒体酶、2种胞液酶,1种溶酶体酶和3种膜相结构酶进行了酶组化染色观察,结果证实:甲基紫精通过与亚细胞结构中的 NADPHD 作用而诱导组织细胞产生氧自由基,而氧自由基又反过来损伤这些亚细胞结构的酶活性,从而产生粘膜损伤。     

氧自由基在皮瓣组织静脉瘀血／再灌流损伤中作用的实验研究

本研究采用大鼠腹部岛状皮瓣静脉瘀血模型，观察不同静脉瘀血期组织中氧自由基的生成情况，用超氧化物歧化酶（Ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅｄｉｓｍｕｔａｓｅ，ＳＯＤ）治疗。结果表明，皮瓣组织静脉瘀血８小时、１２小时丙二醛（Ｍａｌｏｎｙｌｄｉａｌｄｅｈｙｄｅ，ＭＤＡ）含量均高于（Ｐ＜０．０５）或显著高于（Ｐ＜０．０１）对照组。瘀血再灌流各组ＭＤＡ含量均显著高于（Ｐ＜０．０１）对照组。瘀血再灌流组与相同时间瘀血组相比，４小时、８小时组ＭＤＡ含量显著高于瘀血组。用ＳＯＤ（２０００ｕ／ｍｌ）在再灌流发生前动脉注射、能使皮瓣存活率从２８．６％（４／１４）提高到７８．６％（１１／１４）。提示：随着瘀血时间延长及再灌流的发生，氧自由基对皮瓣组织的损伤作用逐渐增强，ＳＯＤ在皮瓣组织静脉瘀血８小时后再灌流前动脉注射，能非常显著的提高皮瓣组织的存活率。     

依达拉奉和1,6-二磷酸果糖联合应用对心脏瓣膜置换手术患者的心肌保护作用

目的探讨氧自由基清除剂依达拉奉和能量代谢调节剂1,6-二磷酸果糖(FDP)联合应用在CPB下行心脏瓣膜置换手术患者的心肌保护作用。方法选取ASAⅡ或Ⅲ级、拟在CPB下行二尖瓣置换、主动脉瓣置换和联合瓣膜置换术患者40例。随机均分为对照组(A组)、依达拉奉组(B组)、FDP组(C组)和联合用药组(D组)。A组给予等容量生理盐水;B组将依达拉奉0.5mg/kg一次性加入CPB预充液中;C组于主动脉阻断前15min静脉滴注FDP 200mg/kg;D组为将依达拉奉0.5mg/kg一次性加入CPB预充液中,并于主动脉阻断前15min静脉滴注FDP 200mg/kg。分别于麻醉后切皮前(T1)、主动脉阻断前(T2)、CPB停止后2h(T3)、CPB停止后6h(T4)和术后24h(T5)采集桡动脉血,测定血浆超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)浓度;血浆肌酸激酶同工酶(CK-MB)活性、肌钙蛋白I(cTnI)的浓度并记录两组临床效果。结果与T1时比较,T2～T4时A组血浆SOD活性明显降低(P<0.05或P<0.01);T3～T5时四组血浆MDA浓度明显升高、CK-MB活性明显升高(P<0.05或P<0.01);T2～T5时四组血浆cTnI浓度明显升高(P<0.05或P<0.01)。与A组比较,T2～T4时B、C、D组血浆SOD活性明显升高(P<0.05);T3、T4时B、C、D组血浆MDA浓度、T3～T5时B、C、D组血浆CK-MB活性明显降低,T3时B、C、D组和T4时B、D组cTnI浓度明显降低(P<0.05或P<0.01)。与D组比较,T3、T4时B、C组血浆cTnI浓度明显升高(P<0.05)。术中多巴胺最大用量、术后24h引流量A组明显多于D组(P<0.05)。结论依达拉奉或FDP单独用药可以减轻心肌缺血-再灌注损伤,两者联合用药作用更加明显。     

通心络对再灌注心肌细胞凋亡的影响

背景传统中药对心肌缺血-再灌注的治疗作用日益受到重视,以虫类药物为主的中成药通心络在临床抗心肌缺血的治疗中取得了明显的疗效.目的探讨中药通心络对抗缺血再灌注诱发的心肌细胞凋亡的作用.设计随机对照观察.单位中山大学附属第一医院中医科.材料各项实验于2002-11/12在中山大学分子医学研究中心进行,选择72只雄性昆明种小鼠.方法72只昆明小鼠随机分成6组,每组12只.通心络2g/kg组、通心络1.5g/kg组、通心络1.0g/kg组(每天灌胃1次,第5天灌药1 h后用垂体后叶素和硝酸甘油联用复制心肌缺血再灌注模型方法进行造模)、消心痛组(剂量为3.9 g/kg,余处理办法同上)、模型组和空白对照组(用生理盐水代替各药物).实验结束时取小鼠的心肌,观察小鼠缺血再灌注模型心肌组织超氧化物歧化酶活性、丙二醛水平,分析心肌细胞凋亡指数和凋亡相关蛋白bcl-2,bax表达水平.主要观察指标[1]各组小鼠超氧化物歧化酶活性、丙二醛水平比较.[2]各组小鼠心肌细胞凋亡及凋亡相关蛋白的比较.结果72只小鼠实验过程中状态符合实验要求,无死亡.[1]超氧化物歧化酶活性、丙二醛水平与模型组和消心痛组比较,通心络1 g/kg组、通心络1.5g/kg组、通心络2 g/kg组的超氧化物歧化酶活性升高(1.37928±140.03),(1 223.91±109.02),(1 789.19±155.20),(2 267.79±216.04),(2 387.55±229.71)nkat/L、丙二醛的水平降低(16.58±2.59),(20.40±2.66),(12.73±1.98),(9.65±2.03),(7.56±1.67)nmol/L,而且随着剂量的增大其效率进一步增强.[2]心肌细胞凋亡及凋亡相关蛋白与模型组和消心痛组比较,通心络1 g/kg组、通心络1.5 g/kg组、通心络2 g/kg组的心肌细胞凋亡指数和Bax蛋白表达指数明显降低[(13.84±1.97)%,(11.56±1.43)%,(3.34±0.96)%,(0.82±0.12)%,(0.42±0.06)%;(17.44±6.18)%,(15.45±3.72)%,(10.85±2.73)%,(6.46±1.88)%,(5.57±1.49)%],Bcl-2蛋白表达指数明显升高[(6.22±0.50)%,(8.73±0.63)%,(11.38±1.38)%,(16.22±2.36)%,(19.45±2.92)%],且呈量效关系.结论通心络胶囊具有抗氧自由基损伤、抗细胞凋亡保护缺血后再灌注心肌细胞的作用,而且呈剂量依赖性.     

异丙酚对颅脑围手术期患者一氧化氮影响的研究

目的 :观察异丙酚对颅脑围手术期患者血浆一氧化氮 (NO)、一氧化氮合酶 (NOS)、氧自由基 (OFR)、脂质过氧化物 (L PO)、内皮素 (ET)和降钙素基因相关肽 (CGRP)的影响。方法 :择期行脑瘤手术患者 2 0例 ,急性颅脑损伤 (ACI)患者 40例 ,根据麻醉方法不同随机分为异丙酚组、异氟醚组和γ羟基丁酸钠 (γ OH )组。用电子自旋共振 (ESR)方法测定 OFR;用化学方法测定 NOS活性和 NO、L PO含量 ;用放射免疫分析及化学分析方法测定 ET和 CGRP含量。观察时间为麻醉诱导前及开颅手术去骨瓣后 1、3、6、12和 2 4小时 (分别用 T0 ～ T5表示 ) ;并以 40例健康者作为术前对照。结果 :ACI患者异丙酚组开颅去骨瓣后 (T1 ～ T5) NO和 NOS较 T0 降低 ,且分别于 T4、T1 达到正常水平 ;ET于 T2 和 T1 时均较 T0 明显降低 (P<0 .0 1) ,而 CGRP于 T2 时明显升高(P<0 .0 1)。脑瘤患者异丙酚组 OFR和 L PO(T1 、T2 )较 T0 显著降低 (P<0 .0 5和 P<0 .0 1) ;异氟醚组 OFR、L PO于 T1 、T2 时较 T0 明显升高 (P<0 .0 5和 P<0 .0 1) ,T2 时较异丙酚组同时间点显著增高 (P均 <0 .0 1)。γ OH组 :NO于 T1 时异常升高 (P <0 .0 1) ,而后开始下降 ,T4时接近 T0 时 ,T5时又异常升高 (P <0 .0 1)。NOS术后开始下降 ,后逐渐上升 ,至 T5时异常