不同直径的骨移植物中骨细胞转归的实验研究

目的观察不同直径的骨移植物修复骨缺损过程中,供体骨内细胞转归的情况。方法近交系DA大鼠174只,其中雄性大鼠58只,作为供体;雌性大鼠116只,作为受体。将受体随机分为块状骨组、颗粒骨组和空白对照组,建立大鼠桡骨骨缺损模型,取雄性大鼠髂骨为供体骨,分别制成直径为2mm的骨块和直径为0．3～0．5mm的颗粒骨,植入骨缺损,分别于术后1、4d和1、2、4、6、10周取材,采用聚合酶链反应技术观察受体骨组织中Y染色体性别决定基因（Sry）的表达情况并观察各组的组织学改变。结果块状骨组在移植早期Sry的表达逐渐减少,至1周消失。4周后再次出现,并且随时间延长表达逐渐增多;颗粒骨组Sty的表达随时间延长逐渐减少,但各时间段均有Sty的表达。在同一时间点,颗粒骨较块状骨有更多的骨细胞存活,其成骨效果优于块状骨。结论不同直径的骨移植物修复骨缺损时均有供体骨细胞参与,但颗粒骨内有更多的骨细胞存活,这些骨细胞参与骨缺损修复的各个阶段,并能加速骨缺损的修复,为临床上修复骨缺损和脊柱融合提供了新的有效的方法。     

野生型p53对纤维肉瘤端粒酶活性及Bcl-2、c-myc基因表达的影响

目的　观察野生型 p5 3 (Wtp5 3 )基因对纤维肉瘤端粒酶活性及B淋巴细胞 /白血病 2(Bcl 2 )、c myc基因表达的影响 ,探讨Wtp5 3抑瘤机制以及纤维肉瘤发病的分子机制。 方法　将 5周龄昆明鼠 90只随机分为单纯肿瘤组 (Ⅰ组 )和Wtp5 3基因注射组 (Ⅱ组 ) ,建立纤维肉瘤动物模型。 5d后 ,Ⅱ组动物于荷瘤局部注射介导Wtp5 3基因的腺病毒液 0 .1ml ,Ⅰ组注射同剂量生理盐水。两组动物于 2次注射后 5、15和 2 5d分批处死 ,聚合酶链反应 酶连免疫吸附 (PCR ELISA )法检测端粒酶活性 ,免疫组织化学法观察肉瘤细胞Bcl 2、c myc蛋白表达。结果　Ⅱ组中 ,端粒酶活性明显低于Ⅰ组 ,Bcl 2蛋白表达强度显著下调 ,c myc基因在 2次接种后 5d出现一过性低表达 ,而后表达强度上升。结论　Wtp5 3明显降低端粒酶活性 ,下调Bcl 2表达 ,改变c myc基因功能。从抑制肿瘤细胞增殖、促进细胞凋亡两方面发挥对纤维肉瘤的治疗作用。     

应用经皮椎体成形术治疗骨质疏松性椎体骨折的研究

目的 探讨椎体成形术（PVP）在治疗骨质疏松性椎体压缩性骨折（OVCF）中的作用.方法 31例骨质疏松性压缩性骨折患者接受了椎体成形术,患者均有背部疼痛.在X线透视引导下,经单侧或双侧椎弓根入路行PVP,每个椎体注入骨水泥量为3～8 ml,平均6.0 ml,完成46个椎体成形术.术后患者随访1～18个月.结果 31例中绝大多数患者术后6 h～2 d疼痛明显缓解或消失.结论 椎体成形术为骨质疏松压缩性骨折经保守治疗无效患者提供了一种安全、微创、有效的治疗方法.     

前臂缺血性肌挛缩中晚期的手术治疗

目的探讨前臂缺血性肌挛缩中晚期的手术方式,并评价其治疗效果。方法对15例前臂缺血性肌挛缩的患者行肌肉神经减压松解术、屈肌起点滑移术、肌腱延长术、肌腱移位术。结果 15例手术者,术后获得3～24个月的随访。评定结果:优6例,良4例,中3例,差2例,优良率为66.7%。结论在前臂缺血性肌挛缩中晚期积极的采取不同的手术方式对手部功能的改善是必要和有效的。     

纳米羟基磷灰石-二氧化锆生物陶瓷材料刀片切割伤口的愈合

背景:羟基磷灰石是一种理想的骨和牙齿的外科医用材料,但其强度低且具有一定的脆性;羟基磷灰石和二氧化锆(3%mol氧化钇稳定的立方相二氧化锆)作为骨替代材料,二者复合后制备生物陶瓷材料对伤口愈合的影响值得研究。目的:观察纳米羟基磷灰石-二氧化锆生物陶瓷刀片材料切割伤口后对其愈合的影响。设计:单一样本观察。单位:哈尔滨医科大学附属第二医院骨二科,哈尔滨工业大学。材料:实验于2006-03/05在哈尔滨医科大学附属第二医院实验动物研究室完成,选用54只4月龄SD大鼠,雌雄不限,体质量120～180g。实验所使用的纳米羟基磷灰石粉体为自行制备,Ca(NO3)2·4H2O(天津市博迪化工有限公司),(NH4)2HPO4(天津市石英钟厂霸州化工分厂),氨水(绥化市化学试剂厂),无水乙醇(天津化学试剂厂)。方法:将纳米羟基磷灰石和二氧化锆粉体经充分研磨后得到纳米羟基磷灰石/二氧化锆复合粉体,以质量比按40%羟基磷灰石 60%二氧化锆比例配制,采用热压烧结技术磨削制成具有一定刃形形状的外形,进行伤口切割实验,即用高压灭菌后的生物陶瓷刃部纵行切开大鼠背部皮肤与皮下组织,切口长为2cm,再用1#丝线缝合切口。分别在术后第3,7,14天将动物断颈处死,每次取18只,切取切口处皮肤与皮下、肌肉组织进行大体观察,同时进行切片、苏木精-伊红染色,光学显微镜观察伤口愈合情况。主要观察指标:大鼠背部伤口大体及组织学观察结果。结果:纳入大鼠54只,均进入结果分析,无脱失值。术后3d,大鼠背部伤口边缘可见到表皮撕裂的微细碎屑,切口未愈合,切口边缘有明显的炎性细胞浸润。术后7d,切口边缘仍可见到表皮撕裂的微细碎屑,但已经开始出现修复反应,碎屑减少,切口变平整,开始愈合,切口皮下组织内有明显的炎性细胞浸润。在高倍光学显微镜下观察,创缘开始愈合,可见到新生的胶原纤维充填于切口间,但胶原纤维较疏松,皮下组织内有大量的浸润的白细胞,为组织修复反应相。术后14d,伤口创缘间被致密的胶原纤维充填,皮下组织内的白细胞浸润明显减轻,新生的毛细血管内可见到正常的血细胞,切口间新形成的胶原纤维致密坚强,为正常创伤修复与和组织。结论:纳米羟基磷灰石-二氧化锆生物陶瓷材料具有无毒、无过敏等特点,具有良好的生物活性。     

脂联素与骨代谢关系的研究现状

脂肪组织已不仅仅是能量储存库，而是一个活跃的内分泌器官，在内分泌代谢、维持机体能量稳定以及调节各项生理、病理活动中发挥重要的作用。脂肪细胞可分泌一系列生物活性物质包括脂联素（adiponectin）、瘦素（leptin）、抵抗素（resistin）、最近报道的内脏脂肪素（visfatin）和ghrelin等，统称为“脂肪细胞因子（adipocytokines）”。     

应用于脊柱融合的骨移植替代物的实验研究

脊柱融合手术中常常遇到骨移植材料缺乏的问题。本文综述了应用于脊柱融合的骨移植替代物的基础研究概况。     

构建外源性重组pcDNA3.1-hBMP-7真核表达载体转染兔骨髓基质干细胞

背景:在细胞获取、培养、移植等体外环境体系下,骨髓基质干细胞能否有效的应用于局部基因治疗尚不清楚.目的:课题创新性提出构建外源性hBMP-7基因真核表达载体,并期望可提高被转染的兔骨髓基质干细胞诱导成骨能力.设计、时间及地点:细胞-基因学体外观察,于2006-07/2007-07在哈尔滨医科大学附属第二医院科研实验中心完成.材料:人健康新鲜胎盘组织由哈尔滨医科大学附属二院妇产科提供,产妇知情同意.健康雄性新西兰大耳白兔1只,由哈尔滨医科大学动物中心提供.方法:从人胎盘组织中克隆出hBMP-7基因,与真核表达载体pcDNA3.1连接,构建重组pcDNA3.1-hBMP-7真核表达载体.从兔骨髓中分离培养骨髓基质干细胞,分为3组:pcDNA3.1-hBMP-7转染组、空载体pcDNA3.1转染组、未转染组.转染前1 d取第2代骨髓基质干细胞5×106个,接种到60 mm3含无抗生素培养基的培养皿中进行转染.主要观察指标:使用RT-PCR、免疫组织化学等方法检测hBMP-7在骨髓基质干细胞中的表达,检测各组细胞碱性磷酸酶、胶原、骨钙蛋白的合成情况.结果:转染72 h后,pcDNA3.1-hBMP-7转染组于1.3 kb处出现特异性条带,细胞胞浆有棕色的颗粒出现,另2组均呈阴性.pcDNA3.1-hBMP-7转染组骨髓基质干细胞碱性磷酸酶活性于转染后第2天显著增高,第8天达峰值,各时间点pcDNA3.1-hBMP-7转染组骨髓基质干细胞碱性磷酸酶活性、羟脯氨酸合成量、骨钙蛋白含量均明显高于其他2组(P<0.05或0.01).结论:实验成功构建了pcDNA3.1-hBMP-7真核表达载体.结局证明了外源性hBMP-7基因可在兔骨髓基质干细胞中充分、高效表达,并且这种外源性hBMP-7基因具备促进兔骨髓基质干细胞向成骨细胞转化的能力.     

复合骨形态发生蛋白(BMP)的微小颗粒骨修复兔桡骨缺损的实验研究

目的探讨自体或深低温冷冻同种异体微小颗粒骨复合胶原、骨形态发生蛋白(BMP)修复节段性兔桡骨缺损的效果。方法将兔自体或同种异体骨研磨成微小颗粒，分别与BMP及Ⅰ型胶原复合，并采用兔桡骨干1．5cm缺损的动物模型，通过X线、组织学、骨密度、生物力学等检测手段，与自体微小颗粒骨复合胶原修复节段性骨缺损的疗效比较。结果自体或深低温冷冻同种异体微小颗粒骨复合BMP胶原比自体微小颗粒骨复合胶原成骨效果优良，其中复合BMP组在8周即可使骨缺损修复，髓腔通畅，在骨缺损修复各时期，其成骨速度及成骨量均好于未复合BMP组。结论自体或深低温冷冻同种异体微小颗粒骨复合胶原BMP均可有效地修复节段性骨缺损，两种方法促进新骨形成无明显差异，异体微小颗粒骨复合胶原BMP是良好的骨缺损修复材料。