內源性白血病抑制因子在脑室周围白质软化新生大鼠脑组织中的表达

目的 探讨脑室周围白质软化（periventricular leukomalacia, PVL） 新生大鼠脑组织内源性白血病抑制因子（leukemia inhibitory factor, LIF）的表达变化。方法 采用左侧颈总动脉结扎并低氧（6% O2 4 h）处理建立 3 日龄 Wistar 大鼠缺氧缺血（HI）PVL 模型。HI 后 1 d、3 d、7 d、14 d 和 28 d 处死动物, 应用 Real-Time PCR 方法和 Western blot 方法分别检测脑组织 LIF mRNA 和蛋白的表达变化;应用免疫荧光双标染色方法检测 LIF 和胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein, GFAP）的共表达情况。结果 HI 后 1、3、7 d PVL 组脑组织 LIF 蛋白表达量均高于对照组（均 PP结论 PVL 新生大鼠脑组织中星形胶质细胞 LIF mRNA 与蛋白的表达均呈先升高后降低的趋势;LIF 可能参与了 PVL 病变的修复过程。     

实验性变态反应性脑脊髓炎大鼠脑白血病抑制因子的表达

目的 观察白血病抑制因子(LIF)在实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)大鼠脑组织内表达的情况,探讨LIF在EAE疾病中的作用.方法 雌性Wistar大鼠72只,随机分为 EAE组 48只,对照组 24只.以新鲜豚鼠全脊髓匀浆加完全福氏佐剂为抗原,免疫接种雌性 Wistar大鼠,并辅以百日咳原液以增加血脑脊液屏障的通透性,建立 EAE动物模型,符合纳入标准者随机分为第 1、3、7、14天 4个时间点亚组.对照组用 9 g·L-1盐水代替豚鼠全脊髓匀浆,同样随机分为 4个时间点组.对EAE组大鼠依据临床症状进行功能评分.采用免疫组织化学法检测在 EAE发病后不同时期大鼠侧脑室周围白质LIF的表达.结果 EAE组32只大鼠在免疫第11天相继出现临床症状,发病第7天病程进展达高峰,随后病情逐渐恢复.对照组大鼠临床功能评分0分,侧脑室周围白质LIF低水平表达,各组无明显差异.EAE组发病第1天临床功能评分(1.5±0.4)分;侧脑室周围白质内 LIF表达量明显上升,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01).发病第3天临床功能评分(2.5±0.5)分;LIF表达量继续上升,维持于较高水平.发病第7天临床功能评分(4.0±0.5)分;LIF表达量开始较前有明显下降.至第14天时临床功能评分(1.0±0.4)分;LIF表达量接近于正常,但仍高于对照组(P<0.05).结论 LIF在 EAE大鼠的脑组织内表达增加,随EAE病程进展LIF的表达量呈先升高后降低的趋势,LIF可能参与EAE疾病的损伤或修复过程.     

新生期缺氧缺血性脑白质损伤大鼠模型比较研究

目的 探讨3种不同方式建立的新生期缺氧缺血性脑白质损伤大鼠模型的异同,为深入研究早产儿脑白质损伤选择理想的动物模型提供理论基础.方法 对3日龄Wistar大鼠采用3种不同的缺氧缺血方法建立脑白质损伤模型,分别为:左侧颈总动脉结扎伴低氧(6％O2) 30 min、左侧颈总动脉结扎伴低氧(6％O2)4 h和双侧颈总动脉结扎伴低氧(8％O2)30min.比较各组大鼠脑病理形态学变化、胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)和髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)免疫组织化学染色以及眼部变化.结果 左侧颈总动脉结扎伴低氧(6％O2)30min侧脑室周围白质组织结构稀疏模糊但无坏死灶;左侧脑室周围白质区GFAP免疫染色强度[(5 021.63 ±358.92) OD]增加程度最低(P ＜0.000 1),MBP免疫染色强度[(18488.63 ±1 822.62) OD]降低程度最低(P＜0.000 1);左侧睁眼时间延迟.左侧颈总动脉结扎伴低氧(6％O2)4 h侧脑室周围白质区可见坏死灶;GFAP免疫染色强度为[(6 069.13 ±458.61) OD],MBP免疫染色强度为[(15003.38 ±1 559.11) OD];左侧睁眼时间延迟.双侧颈总动脉结扎伴低氧(8％O2)30 min双侧脑室周围白质区见囊性坏死灶;左侧GFAP 免疫染色强度[(6 194.50 ±432.69) OD]增加程度最高(P ＜0.000 1),MBP免疫染色强度[(10119.35±735.16) OD]降低程度最显著(P＜0.000 1);双侧睁眼时间延迟且双眼出现白内障改变.结论 左侧颈总动脉结扎伴低氧30 min方法更适宜轻型脑白质损伤研究;左侧颈总动脉结扎伴低氧(6％O2)4 h及 双侧颈总动脉结扎伴低氧(8％O2) 30 min更适于严重的脑室周围白质软化病例研究.     

胚胎期骨髓间充质干细胞移植对先天性脊柱裂大鼠脊髓NGF和BDNF的表达及细胞凋亡的影响

目的 研究胚胎期骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMSC)移植对显性脊柱裂胎鼠脊髓组织中神经生长因子(nerve growth factor,NGF)和脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)的表达及细胞凋亡的影响.方法 建立全反式维甲酸致畸的显性脊柱裂大鼠模型,妊娠16d通过胎仔外科与显微注射相结合的方法将BMSC移植入胎鼠脊髓缺损部位,待胎鼠成活至妊娠21 d取脊髓,免疫荧光染色检测移植BMSC后脊髓缺损部位NGF和BDNF的表达,同时TUNEL染色法检测细胞凋亡的变化.结果 显性脊柱裂胎鼠BMSC移植后脊髓内BDNF、NGF的表达增强,而且BMSC移植区表达升高最显著,TUNEL染色显示BMSC移植组细胞凋亡明显减少.结论 胚胎期BMSC移植后改变脊柱裂病变区微环境,可能通过上调神经营养因子的表达,抑制细胞凋亡,从而促进脊柱裂神经损伤的修复.     

由左颈总动脉导管经肾动脉的大鼠肾脏无创伤给药法探讨

目的 建立一种大鼠肾脏无创伤性局部血管给药的新方法,并对其给药后成活率和损伤性进行观察.方法 16只Wistar大鼠,用PE10导管经大鼠左侧颈总动脉-降主动脉-胸主动脉-腹主动脉,抵达肾动脉直接给药.统计其成活率并对给药的肾动脉血管行病理学观察.结果 大鼠成活率可达87.5%,且不会造成肾动脉血栓或血管内皮损伤.结论 该法可以成功的实现大鼠肾动脉远距离插管,零距离无创伤性局部血管给药,同时还可以推广用于腹腔的某些其它脏器甚至更远的后肢.     

椎旁肌失神经支配能产生脊柱侧凸畸形吗?

目的:应用兔脊神经后支切断,椎旁肌失神经支配动物模型,观察是否形成凸向失神经支配侧脊柱侧凸畸形。方法:日本大耳白兔96只,雌雄各半,体重500～700克,兔龄4～6周,随机分为实验组及对照组,实验组按照单、双侧椎旁肌分离与否分为实验组A及B两组,此两组根据右侧脊神经根后支切除节段(4、6、8个节段)不同再分为3个亚组。对照组内各亚组手术操作同实验组,但不切断神经根后支。术后1、2、3个月摄片观察脊柱侧凸变化。术后3个月椎旁肌HE染色观察神经根切断侧肌肉是否萎缩。结果:术后3个月椎旁肌裸视下观察及HE染色观察肌纤维均见神经切断侧肌肉明显萎缩,但各实验组均未发现有凸向失神经支配侧的脊柱侧凸畸形。结论:通过该方法造成幼兔单侧椎旁肌失神经支配,不易诱发脊柱侧凸畸形。     

脑不对称性对大鼠局灶性脑缺血模型的梗死体积及行为功能的影响

目的 探讨不同时间点应用线栓法制作不同侧别大脑中动脉闭塞（middle c erebral a rtery o cclusion, MCAO）模型对大鼠神经功能和脑梗死体积的影响。 方法 参照Zea-Longa法制作大鼠局灶脑缺血模型,1.5 h后进行缺血再灌注（I/R）。36只SD大鼠随机 分为经左、右侧插线组,并对两组大鼠I/R后不同时间点（1、3、7 d）的神经功能缺损评分、平衡木试 验、水迷宫试验及脑梗死体积进行测定和比较。 结果 经左侧MCAO组大鼠的肢体运动平衡能力在I/R后1、3、7 d均显著低于右侧组,而记忆功能显 著高于右侧组,以I/R后7 d差异更明显。两组脑梗死体积在I/R后3 d时最大,7 d时最小;在I/R后1 d及 3 d时两组脑梗死体积无明显差异;而I/R后7 d时,左侧组梗死体积高于右侧组。 结论 栓塞左右侧对大鼠MCAO模型早期梗死体积影响不大,而后期左侧栓塞的梗死体积大于右侧。 并且左侧半球梗死引起的运动功能损害更重,右侧半球梗死引起的记忆功能缺损更严重。提示大鼠 左右脑半球可能存在结构和功能的不对称,从而影响局灶性脑缺血的结局。