液相色谱串联质谱法检测肝癌细胞N6- 甲基腺嘌呤核苷甲基化水平

目的 建立同时测定N⁶-甲基腺嘌呤核苷(m⁶A)和腺嘌呤核苷(A)的液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS),检测肝癌细胞m⁶A甲基化水平。方法 HepG₂和L₀₂细胞mRNA经分离、消化为核苷,再经含对乙酰氨基酚为内标的甲醇沉淀处理。色谱柱为Agilent Proshell 120 EC-C₁₈柱,流动相为0.1 g/dl甲酸水-甲醇(82:18),流速0.4 ml/min,柱温为30 ℃。质谱检测模式为多反应监测(DMRM)模式,测定m⁶A和A的浓度,计算细胞m⁶A甲基化水平。 结果 建立的LC-MS/MS法检测m⁶A和A的浓度分别在0.15～50.00 ng/ml和1.50～500.00 ng/ml浓度范围内线性关系良好(r > 0.999),日内、日间精密度均小于15.00 %,准确度为93.67 %～101.10 %,回收率为91.46 %～97.60 %,基质效应为90.26 %～99.27 %,样品稳定性良好。HepG₂和L₀₂细胞m⁶A甲基化水平分别为(0.73 ± 0.11)%和(1.26 ± 0.22)%。结论 该方法准确、快速、稳定和灵敏,可用于检测肝癌细胞m⁶A甲基化水平。     

银染法和鬼笔环肽染色观察不同发育阶段小鼠骨细胞突触

目的 采用银染法和鬼笔环肽染色方法探究骨细胞突触在不同发育阶段的组织形态并探讨两种染色方法在观察小鼠骨细胞不同发育阶段形态中应用价值。方法 取出生后0 d（P0）、5 d（P5）、15 d（P15）、21 d（P21）、28 d（P28）、35 d（P35）野生型小鼠的肱骨、股骨，制备冰冻切片及石蜡切片。对P35小鼠的股骨切片进行H&E染色，作为观察骨小梁和皮质骨中骨细胞的参照。对其他时期的肱骨组织切片采用银染法染色观察骨细胞和骨小管的形态，并记录各时期小鼠肱骨骨皮质和骨小梁中骨小管的长度。选取P10、P15两个时期小鼠肱骨的冰冻切片进行鬼笔环肽 iFlour-488染色，观察骨细胞的形态，并记录骨皮质中骨细胞突触的长度。结果 通过银染法染色，在P0~P15时期的小鼠肱骨骨小梁中，我们仅能观察到骨细胞轮廓，无法观察到骨小管的形态。在P21后，通过银染法可以观察到骨小梁骨细胞及骨小管的形态，且骨细胞周围骨小管的长度随年龄逐渐变长，P21 vs P28（P<0.05），P21 vs P35（P<0.05），排列整齐。在P15时期的小鼠肱骨骨皮质中，通过银染法即可以观察到骨细胞及骨小管的形态，且骨细胞周围骨小管的长度随年龄逐渐变长，P15 vs P21（P<0.005），P15 vs P28（P<0.0001），P15 vs P35（P<0.0001），排列整齐。采用鬼笔环肽iFlour-488染色，可以观察到P10和P15时期骨细胞的完整形态，骨细胞突触随着年龄增加逐渐变长，P10 vs P15（P<0.01），与周围骨细胞连接。结论 小鼠骨细胞突触随骨骼发育长度逐渐加长、排列逐渐整齐。银染法可以观察成年后骨细胞及骨小管的形态，对生长发育早期的骨小管形态显像不足。鬼笔环肽染色标记细胞骨架的方法适用于生长发育各时期的骨细胞染色，可以实现在发育早期对骨细胞的形态的检测。     

新生儿胃穿孔的临床特点及影响预后的因素

目的探讨新生儿胃穿孔的临床特点及影响预后的相关因素。方法本研究为回顾性研究。研究对象为山西省儿童医院新生儿外科2008年1月至2017年12月手术治疗的49例新生儿胃穿孔病例。分析这些患儿的临床表现、辅助检查、手术情况及预后等临床资料。根据预后将患儿分为存活组和死亡组,探讨影响患儿预后的相关因素。采用独立样本t检验或连续性校正χ^2检验(或Fisher精确概率法)分析数据。结果(1)49例患儿中,男29例(59.2%),女20例(40.8%);早产儿30例(61.2%),足月儿19例(38.8%);体重(2450±700)g,范围为1010~5000 g。29例(59.2%)为低出生体重儿。11例(22.4%)有围产期不良事件;17例(34.7%)术前合并感染性休克;6例(12.2%)合并其他消化道畸形。2例(4.1%)有生后窒息复苏史,2例(4.1%)合并呼吸窘迫综合征行机械通气,12例(24.5%)有留置胃管或洗胃史。(2)49例患儿的发病时间为(3.8±2.0)d,47例(95.9%)于生后1周内发病,其中36例于生后≤4 d发病;25例(51.0%)发病到手术时间≤12 h。(3)首发症状以单纯腹胀最常见[69.4%(34/49)],12例(24.5%)腹胀伴呕吐,39例(79.6%)患儿术前腹部立位X射线片可见膈下大量游离气体,肝脏受压下移,胃泡影减小或消失。(4)所有患儿入院后均急诊行开腹探查、胃壁一期修补术。术中见27例(55.1%)穿孔位于胃大弯,5例(10.2%)位于胃小弯,14例(28.6%)位于胃前壁,3例(6.1%)位于胃后壁。33例(67.3%)穿孔长径≥3 cm。术后3例(6.1%)发生切口感染,2例(4.1%)吻合口漏;1例术后48 h发现大量气液胸,再次手术证实为食道重复并食道穿孔。(5)49例中,35例(71.4%)的病因为先天性胃壁肌层缺损,4例(8.2%)为损伤,10例(20.4%)为自发性穿孔。(6)49例中,8例(16.3%)死亡,36例(73.5%)存活,5例(10.2%)术后放弃治疗。剔除5例放弃治疗的患儿后,存活组中发病到手术时间≤12 h及穿孔长径<3 cm患儿的比例高于死亡组[61.1%(22/36)与1/8,χ^2=4.404;41.7%(15/36)与0/8];死亡组合并感染性休克的比例高于存活组[6/8与22.2%(8/36),χ^2=6.147](P值均<0.05)。结论新生儿胃穿孔病死率较高,先天性胃壁肌层缺损是新生儿胃穿孔的病理基础和主要病因,突然出现的腹胀是其主要的临床表现。尽早手术有助于提高治愈率。     

多指标综合加权评分法优选复方夏枯草洗剂提取工艺研究

[目的] 优选复方夏枯草洗剂的提取工艺。[方法] 采用L₉（3⁴）正交设计，以迷迭香酸、丹酚酸B的含量及出膏率的综合评分为指标，考察料液比、提取时间、提取次数对提取效果的影响，优选复方夏枯草洗剂的最佳提取工艺。[结果] 根据综合评分的结果，优选出最佳提取工艺为加8倍水，提取3次，每次0.5 h。[结论] 该工艺准确可靠，可行性好。     

局部神经阻滞麻醉下普理灵疝装置无张力修补腹股沟疝

目的 总结局部神经阻滞麻醉下应用普理炅疝装置治疗腹股沟疝的经验。方法 应用美国强生公司聚丙烯成型疝装置（PHS）在局部神经阻滞麻醉下对184例腹股沟疝行开放式无张力疝修补术。结果184例全部治愈，麻醉效果好．手术过程中。患者无明显疼痛感，术后疼痛轻微。均未使用止痛药。未出现特殊并发症。随访5～12个月（平均8个月）无复发，无明显异物感。结论 对于腹股沟疝局部神经阻滞麻醉是安全可靠的；按Gilbert分级Ⅲ～Ⅶ型病例，更加适合应用PHS。     

动力髋螺钉内固定治疗股骨粗隆间骨折

目的探讨DHS治疗股骨粗隆间骨折的疗效。方法对我院1998年12月～2004年12月收治的股骨粗隆间骨折46例,均为新鲜骨折,使用DHS内固定,进行手术方法、术后结果分析。结果所有患者均获得随访,骨折均愈合,髋关节功能优良率93%。结论DHS内固定治疗股骨粗隆间骨折,固定牢固,可以早期行关节功能锻炼,减少并发症,降低病残率,疗效满意。     

潍坊市食品药品监督管理局开展“安全用药知识进社区”服务活动

8月13日，潍坊市食品药品监督管理局在市区“北海花园”小区开展现场服务咨询活动，宣传食品药品监管部门职能、监管知识、政策法规、用药常识等，摆设展板30多块，发放宣传材料10000多份，解答群众咨询500多人次。面对面交流贴近群众，切合监管工作实际，深受市民欢迎。到场参观阅览、提出咨询和送交过期药品的市民达1000多人次。     

睾丸网腺癌(1例报告并文献复习)

目的了解睾丸网腺癌的发病和临床特点，提高其早期诊断和治疗水平。方法分析1例睾丸网腺癌患者的临床资料，并结合文献对睾丸网腺癌的临床病理特点、早期诊断和治疗进行讨论。结果术前诊断为左睾丸鞘膜积液、左睾丸肿瘤待排，遂行左高位睾丸切除术，术后病理检查诊断为睾丸网腺癌。免疫组化：AFP（-），PLAP（-），CK（＋），CD30（-），CK20（＋）。术后CT示肝内多发转移瘤、左肾和左肾上腺转移改变。结论睾丸网腺癌是原发于睾丸网纵膈的恶性肿瘤，极为罕见，其临床表现独特，基本治疗是根治性睾丸切除术辅以根治性腹膜后淋巴结清扫术，放疗和化疗效果欠佳。该病预后差，文献报道5年生存率仅为13％。     

腰椎间盘人工髓核置换术后翻修一例

人工髓核假体置换是近年来开展的一项新技术，目前国内一些医疗单位已开展了此项技术。对于腰椎间盘突出症手术病例，是否需要做人工髓核植入，目前尚有较大争议。从现有资料看，人工髓核置换术后假体移位的发生率较高，并发症严重，说明在假体设计，材料的生物相容性以及手术操作技术等方面尚欠成熟，因此，临床上开展上项技术应十分慎重，特别是对于手术适应征的掌握应当十分严格。     

口腔颌面软组织气性坏疽1例

1病例报告患者男,53岁。因左面部外伤后出现弥散性肿胀、疼痛4天,门诊以“左侧颌面间隙感染”收入院。查体:神志恍惚,左侧颌面弥散性红肿,皮肤张力增高,有波动感,其中央有一3cm×7cm黑色坏死区,边缘呈不规则糜烂,有较多灰褐色粥样渗出物、恶臭,重度张口受限。血常规:白细胞11.7