雌二醇通过调控GREB1基因表达促进膀胱癌进展

目的:阐述雌二醇(E2)作用于膀胱癌的潜在分子通路。方法:实时定量PCR(qRT–PCR)法检测膀胱癌及癌旁组织中雌激素应答基因–雌激素受体生长调节结合蛋白1(GREB1)的表达水平。采用CRISPR–Cas13a系统敲低其对应的增强子RNA(eGREB1),通过qRT–PCR法验证eGREB1与GREB1基因表达的关系。运用CRISPR–Cas9系统敲低GREB1,qRT–PCR法检测其在膀胱癌细胞T24和5637的敲低效率,采用CCK–8实验检测GREB1敲低后E2诱导的细胞增殖能力的变化,划痕实验检测GREB1敲低后E2诱导的细胞迁移能力变化,Transwell实验检测GREB1敲低后E2诱导的细胞侵袭能力变化,人胱天蛋白酶3(Caspase–3)实验用于检测GREB1敲低后E2诱导的细胞凋亡能力的变化。结果:qRT–PCR显示相较于癌旁组织,GREB1基因在膀胱癌中表达升高,差异具有统计学意义(P 0.05);eGREB1与GREB1表达水平呈正相关。GREB1基因表达下调后,E2诱导的细胞增殖、迁移及侵袭能力明显下降,细胞凋亡增加,差异均具有统计学意义(P 0.05)。结论:E2可能通过诱导eGREB1的产生来调控GREB1的表达,从而促进膀胱癌的发生发展,该分子通路可作为膀胱癌预防和治疗的潜在靶点。     

基于深圳市云计算公共服务平台的医院影像系统的构建

介绍了国内外医院影像系统的发展现状与趋势,阐述了通过医院影像系统和云平台的对接,将数据库中的影像和文本信息传送到云中心并进行数据分类,给患者提供随时查询、下载自己影像检查结果的功能,从而降低医院开支,方便患者,使患者便捷、快速地获取检查结果成为可能。该项目的成立以及应用将会带动整个医疗行业中云应用的进一步推广,并可以为广大患者带来实在、体贴的便利,让患者真正体会到深圳鹏云存储给人民带来的利益。     

肥胖型支气管哮喘患者合并阻塞性睡眠呼吸暂停综合征临床分析

目的本研究初步探讨了肥胖型支气管哮喘患者合并阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)的临床特点。方法评价95例诊断为肥胖型支气管哮喘患者的年龄、性别、睡眠打鼾史、高血压史、吸烟史、饮酒史、动脉血压。使用多导睡眠监测系统记录睡眠过程中的多次生理事件,评价AHI和最低血氧饱和度(SaO_2),使用哮喘控制测试问卷(ACT)评估哮喘控制情况。结果肥胖型支气管哮喘患者48.4%合并有阻塞性睡眠呼吸暂停,肥胖型支气管哮喘合并阻塞性睡眠呼吸暂停组与单纯哮喘组对比,肺通气功能更差、哮喘控制率更低。结论肥胖型支气管哮喘患者易合并阻塞性睡眠呼吸暂停,导致哮喘不易控制。     

精子顶体小泡蛋白-1(ACRV1)在小鼠睾丸组织中的表达与定位

目的:研究精子顶体小泡蛋白-1(ACRV1)在小鼠睾丸组织发育过程中的表达特征。方法:将4 d、9 d、18 d、35 d、54 d和6月龄小鼠睾丸组织cDNA探针与Affymetrix全基因组芯片进行杂交,筛选出差异表达的ACRV1基因。采用RT-PCR方法检测ACRV1基因在小鼠不同日龄和不同组织中的表达情况,采用免疫组织化学方法检测ACRV1蛋白在小鼠睾丸组织中的定位。结果:对Affymetrix全基因组芯片杂交结果分析后,筛选得到1个差异表达杂交点,通过在NCBI网站与小鼠全基因组序列Blast分析可知该差异表达基因是ACRV1基因。RT-PCR结果表明ACRV1 mRNA呈小鼠睾丸特异性表达,在出生31 d小鼠睾丸开始高表达,在成年前达到高峰。ACRV1蛋白主要定位在睾丸圆形精子和长形精子细胞。结论:ACRV1基因存在发育的表达调控,为小鼠年龄依赖性表达基因,其表达与小鼠精子发生的过程有很强的一致性,且具有睾丸特异性表达的特征,因此推测该基因可能在精子发生中具有关键作用。     

组蛋白H3K9甲基修饰酶在2周、4周和6周龄小鼠肝脏中的表达

目的 探讨不同周龄小鼠肝脏组蛋白H3K9甲基转移酶(KMT)和去甲基化酶(KDM)的表达.方法 取2周、4周和6周龄BALB/c雄性小鼠肝脏组织,分别提取总mRNA和蛋白质,应用实时定量反转录-聚合酶链式反应(RT-qPCR)确定几种H3K9甲基转移酶和去甲基化酶的表达差异,使用Western blotting 检测两...     

Stra8基因启动子逆转录病毒包装细胞株的建立

目的:建立小鼠Stra8基因启动子控制绿色荧光蛋白EGFP表达(P(stra8)-EGFP)的逆转录病毒包装细胞株,以方便地将P(stra8)-EGFP转导到目的细胞,为生殖细胞鉴定分选提供基础.方法:PCR扩增小鼠基因组DNA中的Stra8基因启动子片段,构建Stra8基因启动子控制表达的EGFP报告基因逆转录病毒质粒.将质粒脂质体法转染PT67病毒包装细胞,G418抗性筛选后,梯度稀释法将包装细胞单克隆化并扩增成多个细胞株.以包装细胞培养上清液感染NIH3T3细胞的所形成的G418抗性阳性细胞数定义病毒滴度,确定高滴度病毒包装细胞株.通过染毒小鼠骨髓间充质干细胞(mouse bone marrow mesenchymal stem cells,MSCs)验证该细胞株的P(stra8)-EGFP转导效果.结果:所建立的病毒包装细胞株培养上清液滴度达到1.3×10(6) cfu/ml.MSC经包装细胞培养上清液感染后,在(retinoic acid,RA)诱导下能表达EGFP蛋白.结论:成功构建了将P(stra8)-EGFP转导到目的细胞的PT67逆转录病毒包装细胞株.     

精子形成的调控机制及其进展

精子发生与调控是细胞学最复杂的领域.近年来,对于精子形成的调控机制有了新认识,对既往的一些研究和结论提出了异议,其内容集中于雌激素与精子发生的关系、对睾酮与精子发生再认识、精子成熟的相关研究以及与精子形成有关的细胞因子等领域,本文对此进行综述、总结和分析.雄激素与精子发生的关系复杂,睾酮在两种酶的作用下,分别转化成双氢...     

去甲基酶JHDM2 A的功能研究概况

JHDM2A是一种组蛋白赖氨酸去甲基酶,可特异性催化甲基化H3K9脱甲基,发挥表观遗传学效应,在雄性生殖细胞和于细胞的分化方面有重要功能.     

氧减指数可较好反映阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者夜间低氧血症

目的 对阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(obstructive sleep apnea hypopnea syndrome,OSAHS)患者夜间低氧血症的相关指标与呼吸暂停低通气指数(apnea-hypopnea index,AHI)进行相关性分析,找出反应夜间低氧血症的最佳指标,以便家庭便携式血氧监测仪在初筛中应用....