七氟醚处理后的低温缺氧-复氧心脏成纤维细胞培养液对心肌细胞的影响

目的观察七氟醚对低温缺氧-复氧心脏成纤维细胞(CFs)培养液中心肌细胞搏动及缝隙连接蛋白43(Cx43)表达的影响。方法培养4 d的正常原代CFs随机分为三组:对照组(C组)、缺氧-复氧损伤组(IR组)和七氟醚组(Sev组),每组约5×10~5个细胞。C组CFs持续培养5 h;IR组和Sev组CFs低温缺氧1 h(4℃,95%N_2+5%CO_2),复氧(37℃,5%CO_2+95%空气)4 h,Sev组复氧过程中加入含2.5%七氟醚的培养液培养。培养结束时分别收集各组培养液,加入正常心肌细胞培养16 h。免疫细胞化学SP染色法鉴定CFs与心肌细胞;HE染色观察CFs与心肌细胞形态;磁带式录像机观察并记录心肌细胞搏动频率;台盼蓝染色法测心肌细胞死亡率;Western blot法测定Cx43蛋白及p-Cx43蛋白相对含量。结果与C组比较,IR组心肌细胞搏动频率明显减慢,IR组和Sev组心肌细胞死亡率明显升高,Cx43蛋白和p-Cx43蛋白相对含量明显降低(P0.05)。与IR组比较,Sev组心肌细胞搏动频率明显加快,心肌细胞死亡率明显降低,Cx43蛋白和p-Cx43蛋白相对含量明显升高(P0.05)。结论七氟醚可加快低温缺氧-复氧CFs培养液中心肌细胞搏动频率,上调Cx43和p-Cx43蛋白表达,降低心肌细胞死亡率,增强心肌细胞活性。