铁死亡在压力诱导的椎间盘退变中的作用及机制研究

【摘要】目的 探究铁死亡是否参与异常应力诱导的椎间盘退变及其分子作用机制。方法 将髓核细胞分为对照组、加压组和加压+铁死亡抑制剂（Fer-1）组，采用CCK-8法检测细胞的增殖活力，透射电镜观察细胞内部超微结构，脂质过氧化（MDA）试剂盒检测髓核细胞脂质氧化水平。运用免疫荧光染色和Western blot 检测髓核细胞中谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）蛋白表达水平；运用TargetScan 8.0预测与GPX4靶向结合的miRNA及位点；运用RT-PCR检测髓核细胞中miR-1224的表达水平。结果 异常应力作用导致髓核细胞增殖活力下降，脂质氧化水平升高，线粒体萎缩且膜密度增高，而Fer-1可有效逆转压力对髓核细胞的上述作用。与对照组相比，加压髓核细胞中GPX4蛋白表达降低，miR-1224水平升高（P < 0.05），且生物信息学预测结果显示miR-1224靶向结合于GPX4。抑制髓核细胞中miR-1224可显著升高GPX4蛋白表达并有效逆转压力诱导的髓核细胞退变表型和脂质氧化水平升高，过表达髓核细胞中miR-1224则起到相反作用。结论 异常应力导致髓核细胞中miR-1224水平增高，通过靶向结合抑制了GPX4蛋白的表达，从而促进髓核细胞铁死亡的发生并导致椎间盘退变。