MicroRNA-30a通过Sox9调控骨髓间充质干细胞软骨分化的研究

[目的]筛选在骨髓间充质干细胞(MSC)软骨分化过程中调控Sox9表达的microRNA (miRNA),探讨软骨形成过程的基因干预靶点和手段。[方法]经过鉴定的MSC行软骨分化,监测分化过程中候选miRNAs的表达趋势,研究差异表达miRNA对MSC软骨分化的影响及其与Sox9的相互作用关系。[结果]在筛选的4条具有调控Sox9能力的miRNA中,miRNA-30a和miRNA-195在MSC软骨分化过程中呈递增趋势。其中,miRNA-30a mimic转染MSC后细胞存活率无明显变化,在软骨分化21 d后,转染组甲苯胺蓝染色较对照组减弱。荧光素酶报告基因结果显示野生型Sox9 3'UTR报告质粒荧光释放被miRNA-30a mimic转染显著抑制,而突变体无此效果,同时,Western blot结果显示转染miRNA-30a mimic的MSC中,Sox9表达量较对照组降低。[结论] miRNA-30a在MSC软骨分化过程中表达逐渐上升并通过Sox9完成其负调节作用。此研究表明miRNA-30a作为调控MSC软骨分化的潜在靶点,对于软骨再生和软骨发育相关疾病的应用和防治具有重要意义。     

小鼠脊柱结核模型的构建及椎体骨密度改变的初步研究

[目的]构建脊柱结核小鼠模型并分析其椎体的骨密度改变。[方法]60只8周龄雌性C57BL/6小鼠随机分成实验组和对照组,每组30只。实验组小鼠脊柱局部注射浓度为108CFU/ml的H37Rv标准菌株悬液0.1 ml,对照组注射生理盐水0.1 ml。饲养12周后取脊柱标本送Micro-CT扫描。获得三维松质骨图像后,评估两组小鼠椎体骨小梁数量及骨小梁厚度差异。[结果]共6只小鼠在Micro-CT上发现了脊柱破坏的病灶。破坏的椎体骨小梁数及骨小梁厚度显著低于未受累的椎体(t=-5.710,P0.001)和对照组相同节段椎体(t=-6.771,P0.001),脊柱结核小鼠的椎体平均骨小梁数量较对照明显下降(t=-4.716,P0.001)。虽然病灶椎的总体骨小梁数量及厚度降低,但在病灶周围存在大量硬化骨形成,病灶局部骨小梁数量及厚度显著增高(t=8.987,P0.001)。[结论]小鼠脊柱结核病椎平均骨小梁密度下降,但病灶局部骨小梁密度增高。     

后路短节段融合固定合并二期前路病灶清除治疗幼儿腰椎结核

[目的]探讨一期后路短节段融合内固定、二期前路病灶清除椎间植骨治疗幼儿腰椎结核伴后凸畸形的手术方法和疗效。[方法]2006年1月~2014年6月,本院共收治年龄7岁患有腰椎结核并后凸畸形的患儿共17例,其中男性9例,女性8例,年龄4~7岁,平均5.1岁。均采用后路一期钉棒内固定植骨融合,前路二期病灶清除椎间钛网植骨融合术治疗。观察比较患者术前术后及末次随访的节段后凸Cobb角变化,评估植骨融合情况及神经功能情况。[结果]所有病例均获得随访,随访时间10~42个月。Cobb角由术前(24.18±7.15)°减少至术后(0.12±4.24)°,差异有统计学意义(P0.001);末次随访节段后凸(0.65±3.92)°,与术前比较差异有统计学意义(P0.001),但与术后比较差异无统计学意义(P=0.269)。JOA评分由术前(21.53±5.04)分增加至术后(28.06±0.90)分,差异有统计学意义(P0.001)。末次随访时,17例患者ASIA分级均恢复到E级。随访期间均未发现内固定松动、脱出、移位、断裂。[结论]对低龄儿童脊柱结核合并后凸畸形,采用一期后路短节段固定植骨融合合并二期前路病灶清除钛网植骨融合可以取得较好的疗效。     

噬菌体生物扩增法快速检测脊柱结核脓液中结核分枝杆菌

[目的]探讨噬菌体生物扩增(PhaB)法快速检测脊柱结核脓液中结核分枝杆菌的临床应用价值.[方法]应用直接涂片法,BACTEC MGIT-960法及PhaB法分别检测56例脊柱结核患者的56份脓液标本以及10株结核分枝杆菌标准株,15株非结核分枝杆菌及5株非分枝杆菌.[结果]PhaB法检测10株结核分支杆菌标准株均为阳性,15株非结核分支杆菌和5株非分支杆菌均为阴性.46份BACTEC MGIT-960培养阳性和10份BACTEC MGIT-960培养阴性的标本中,PhaB法分别有42份(91.3%)、3份(30.0%)阳性,检出率分别为82.1%和80.4%(P＞0.05).涂片检查阳性仅13份(23.2%),阴性43份(76.8%),而应用PhaB法可以检测出45份(80.4%)阳性,其中有33份为涂片阴性的标本(P＜0.05).用PhaB法能在18～24 h内得出结果,较BACTEC MGIT-960法提前5～17 d.[结论]PhaB法与直接涂片法、BACTEC MGIT-960法相比,可以简便、快速地检测结核分支杆菌,全程只需1 d,并且具有较高的敏感性和特异性.     

一期后路病灶清除植骨融合内固定矫形治疗成人腰骶段结核

目的:探讨一期后路病灶清除植骨融合内固定矫形治疗成人腰骶段结核的临床疗效.方法:回顾性研究2004年3月～2010年10月收治的17例腰骶段结核患者,男9例,女8例;年龄23～68岁,平均46.4±16.0岁.17例患者中有16例出现不完全瘫痪,神经功能Frankel分级:B级4例,C级5例,D级7例.入院时血沉(ESR)33～95mm/h,平均57.4±16.8mm/h.术前腰骶角18°～23°,平均20.5°±1.7°.均采用一期后路病灶清除、内固定矫形、植骨融合治疗,应用腰骶角测量、血沉检测和神经功能Frankel分级评定来评论临床疗效,随访观察治疗结果.结果:全部病例手术均安全完成,手术平均用时145min(130～200min),术中平均出血约700ml (500～850ml);无脊髓及血管损伤及其他严重并发症.全部患者随访17～71个月,平均47.5±17.1个月.末次随访腰骶角为25.9°～30.3°,平均28.3°±1.5°,术后ESR恢复正常(9.2±3.1mm/h),均较术前明显改善(P＜0.05).术后6～8个月,复查X线、MRI提示所有患者植骨融合,神经压迫完全解除.除2例术前Frankel分级为B级的患者术后恢复至D级,其余患者术后Frankel分级均为E级.结论:一期后路病灶清除植骨融合内固定矫形治疗成人腰骶段结核疗效确切,安全可靠.     

融合至L3的后路TSRH治疗KingⅣ型青少年特发性脊柱侧凸

[目的] 评价融合至k的后路TSRH治疗King Ⅳ型青少年特发性脊柱侧凸的效果。[方法]前瞻性研究分析本院收治的9例King Ⅳ型青少年特发性脊柱侧凸病人，采用后路TSRH矫形、下终椎L3置入两枚椎弓根螺钉、植骨融合的临床资料及治疗结果。[结果] 手术时间平均为150min，矫正率为81．2％，全部病例随访平均23(4～38)个月，最后一次随诊时，矫形丢失率1．1％，腰椎未融合区无代偿性弯曲，无曲轴现象。[结论] 融合至L3的后路TSRH治疗KingⅣ型青少年特发性脊柱凸效果满意，同时，可最大范围的保留腰椎活动度；只要病例选择恰当，该方法是确实有效、可行的。     

经皮椎体成形术治疗胸腰椎血管瘤的临床分析

[目的]探讨经皮椎体成形术治疗胸、腰椎血管瘤的手术方法及疗效.[方法]2000～2005年收治18例22个椎体血管瘤患者,均行经皮椎体成形术治疗.所有患者均经临床、影像学及术后病理检查确诊并排除禁忌证.患者术前疼痛视觉模拟评分(visual analogue pain scale,VAS)为(7.5±1.6).[结果]随访1～4.5年,平均2.3年.术后24 h患者疼痛基本消失6例,明显缓解9例,部分缓解2例,未缓解1例,优良率为83.3%,术后48 h疼痛视觉模拟评分(VAS)为(1.5±0.8).3个月后患者疼痛等症状基本消失,椎体高度未继续丢失,肿瘤未见复发.发生骨水泥渗漏3例4椎,均未引起患者症状加重.[结论]经皮椎体成形术治疗脊椎血管瘤能凝滞病变、固化椎体、稳定脊柱、解除症状,是一种安全有效的微创治疗方法.     

再发骨质疏松性椎体压缩骨折保守治疗患者出院后生存质量

目的：对比初次和再发骨质疏松性椎体压缩骨折(osteoporotic vertebral compression fractures,OVCFs)患者保 守治疗的生存质量,了解再次骨折对此类患者生存质量各方面的影响。方法：回顾性观察治疗OVCFs后出现再骨折 的患者30名(再骨折组)和同时期行保守治疗OVCFs后未发生再骨折的基本条件相似的患者30例(对照组),比较两组出 院后3个月时SF-36简明健康健康状况调查表的调查结果。结果：再骨折组治疗后的8个维度均不同程度较对照组变差 (均P<0.01)。结论：再骨折组患者的生存质量明显低于对照组,并且会进一步影响患者的心理预期、情绪和社会活动 的各个方面。     

单纯一期后路病灶清除椎体间植骨融合内固定治疗胸椎结核的临床研究

[目的]评价一期后路病灶清除、椎体间植骨、钉棒系统内固定治疗胸椎结核的临床疗效及可行性.[方法]回顾性分析60例单节段胸椎结核患者,男34例,女26例;平均年龄37.5岁.合并脊髓功能障碍者24例,合并明显脊柱后凸畸形(SI＞15°)者38例.CT或MRI显示所有患者病灶有明显的骨质破坏和不同程度脓肿形成,无巨大脓肿的患者.术前给予2周以上的抗结核化疗.研究观察的指标包括手术情况(手术时间、出血量、卧床时间)、并发症、神经功能的恢复、成角畸形的矫正及植骨融合率等.[结果]所有病例均得到随访,平均随访时间27.5个月.平均手术时间251 min,平均失血量780 ml.后凸畸形矫正率79％,矫正角度平均25°,末次随访矫正角度丢失1.2°.神经功能改善率90.1％.术后3个月内ESR及CRP恢复至正常水平.植骨融合率100％,治愈率为100％.无脊髓功能损伤,无严重并发症发生.[结论]该术式能满意地清除病灶,安全地进行椎体间植骨,脊柱稳定性能得到有效重建,临床效果良好,是一种值得推广的手术方式.     

雌激素受体基因ERβ与小鼠成骨细胞的增殖和分化

背景:雌激素受体ERs表达于所有关系到骨形成和骨吸收的细胞成分中。目的:观察雌激素受体ERβ对成骨细胞增殖、分化能力的调控作用。方法:以小鼠成骨细胞株MC3T3-E1为对象,设立3组:实验组转染雌激素受体ERβ RNAi载体、阴性对照组转染ERL RNAi载体、空白对照组不进行转染,3组在相同条件下培养。采用MTT法绘制各组细胞的生长曲线;流式细胞仪分析各组细胞的细胞周期。结果与结论:实验组成骨细胞的增殖能力明显高于空白对照组和阴性对照组,G1期细胞百分率明显少于空白对照组和阴性对照组,而S期和G2期细胞百分率明显高于空白对照组和阴性对照组(P均<0.05)。根据雌激素受体ERβ沉默后检测的结果可以反向推断,ERβ的表达对成骨细胞的增殖、分化具有抑制作用。