miR-580对乳腺癌细胞系中Twist1的调节作用

目的：探讨miR-580在MCF-10A细胞系中对Twist1的调节。方法：本实验利用生物信息学方法预测Twist1的靶miRNA是miR-580。首先,采用qPCR法检测在MCF-10A系列细胞系中Twist1及miR-580的表达。然后,在MCF-10A细胞系中分别转染miR-580类似物和miR-580抑制物后,利用RT-PCR、Western blot、t检验分析Twist1的表达及细胞迁移能力的变化。最后利用荧光素酶实验验证miR-580通过结合在Twist1的3'UTR调节其表达。结果：1)在MCF-10A细胞系中Twist1与miR-580的表达呈负相关;2)在MCF-10A细胞系中转染miR-580类似物后,Twist1的表达下调;在MCF-10A细胞系中转染miR-580抑制物后Twist1的表达上调;3)在MCF-10A细胞系中引入miR-580类似物后细胞迁移能力降低;4)miR-580直接结合在Twist1的3'UTR。结论：miRNA-580在MCF-10A细胞系中通过结合在Twist1的3'UTR负向调节Twist1的表达从而克制细胞的迁移。     

左心室旋转运动研究进展

左心室旋转运动由左心室收缩期扭转运动和舒张期解旋运动构成.左心室收缩期心内膜与心外膜下心肌纤维向相反方向运动,导致左心室扭转,进而引起左心室收缩射血.舒张期左心室心肌迅速弹性回缩释放扭转时储存的弹性势能,引起左心室早期快速充盈.任何影响心肌状态的生理或病理变化均可使左心室旋转运动发生改变.心肌收缩及松弛程度、前后负荷、心内膜及心外膜下心肌纤维收缩的平衡和心肌纤维的排列方向共同决定和影响左心室扭转运动;左心室扭转峰值、左心室弹性回缩力及心肌松弛特性决定左心室解旋运动,其他相关因素亦可影响左心室旋转运动,如运动、年龄等.该文就左心室旋转运动相关研究进展进行综述,以促进其在临床的推广应用.     

Twist、p53和E-钙黏附蛋白联合检测在乳腺癌中意义

目的 观察乳腺癌中Twist、p53和E-钙黏附蛋白mRNA的表达及其相互关系.方法 选取初次就诊的30例乳腺癌患者行改良根治术的乳腺癌组织和癌旁组织及10例乳腺良性病变患者的正常乳腺组织,分别应用RT-PCR的方法检测Twist、p53和E-钙黏附蛋白mRNA的表达,与临床病理因素关系及其相互关系.结果 乳腺癌组织Twist mRNA表达与分化程度[高中分化93.33％(14/15),低分化53.33％(8/15)]、淋巴管浸润[是93.75％(15/16),否50.00％(7/14)]和TNM分期[Ⅰ～Ⅱ期46.15％(6/13),III～Ⅳ期94.12％(16/17)]有明显相关性(P＜0.05),而与年龄、肿瘤直径、外膜浸润、雌激素受体和孕激素受体无明显相关性(P＞0.05).乳腺癌组织中Twist和p53 mRNA表达较癌旁组织和正常乳腺组织明显升高[(112.36±12.53)％比(101.37±9.12)％和(98.03±9.04)％、(101.73±13.32)％比(91.43±7.43)％和(90.83±6.58)％,P＜0.01],而E-钙黏附蛋白mRNA表达较癌旁组织和正常乳腺组织明显降低[(55.43±12.49)％比(69.39±5.63)％和(72.73±7.93)％,P＜0.01],癌旁组织和正常乳腺组织比较差异无统计学意义(P＞0.05).乳腺癌组织中Twist mRNA表达与p53 mRNA呈正相关(r=0.526,P=0.004),而与E-钙黏附蛋白mRNA表达呈负相关(r=-0.500,P=0.000).结论 Twist和p53在乳腺癌组织中呈高表达,而E-钙黏附蛋白呈低表达.Twist可能通过上调p53的表达,同时下调E-钙黏附蛋白的表达,从而促进乳腺癌的浸润、转移,并在其中起重要作用.     

Twist蛋白在胃癌中的表达及其临床意义

目的 观察Twist蛋白在胃癌中的表达情况及其与预后的关系.方法 采用免疫组化PV-900法对110例患者的胃癌组织和癌旁组织分别进行检测.结果 Twist蛋白在胃癌组织和癌旁组织中的表达率分别为67.3％和9％;Twist蛋白的表达与肿瘤浸润深度（T）（P=0.03）、淋巴结转移（N）（P=0.02）、TNM分期（P=0.009）及肿瘤的复发或远处转移（P=0.009）有关;Twist蛋白阳性是胃癌患者术后预后不良的指征（P=0.003）,且是独立预后因素,具有比其他临床指标更强的预测作用（HR：2.893,95％CI：1.385～6.044）.结论 Twist蛋白是胃癌患者的独立预后因素,提示预后不良,并可应用于临床,以助于胃癌患者的早期诊断、有效治疗和预后判断.     

Twist基因逆转录病毒载体的构建及其诱导正常乳腺上皮细胞发生上皮间质转化

目的 构建Twist基因逆转录病毒载体,研究其对人正常乳腺上皮细胞MCF10A的影响.方法 酶切pcDNA3/myc-Twist获得myc-Twist,克隆到逆转录病毒载体pBABE-puro中,构建重组质粒pB AB E-myc-Twist.通过酶切、测序鉴定Twist基因正确后,在体外将质粒pBABE-myc-Twist和其对照分别与包装质粒pAmpho共同转染人胚肾上皮细胞系293T细胞,进行逆转录病毒的包装,并感染人正常乳腺MCF10A上皮细胞,用嘌呤霉素(puromycin)筛选,获得成功转入Twist的MCF10A-Twist细胞和MCF10A-Vector对照细胞.通过RT-PCR和Western blot法验证Twist细胞在MCF10A-Twist和MCF10A-Vector细胞内的表达.免疫荧光技术和Western blot法检测细胞内上皮间质转化(EMT)标志蛋白的表达.Transwell(R)法检测细胞的迁移和侵袭能力.结果 重组逆转录病毒载体质粒pBABE-myc-Twist经酶切和测序鉴定构建正确;Twist基因被逆转录病毒成功导入MCF10A细胞,并在靶细胞内稳定表达,RT-PCR检测到Twist mRNA在MCF10A-Twist细胞中表达,Western blot法检测发现myc-Twist蛋白在MCF10A-Twist细胞中表达;免疫荧光和Western blot法检测显示在MCF10A-Twist细胞中E-cadherin表达显著下调、vimentin表达明显上调;与MCF10A-Vector细胞相比,Transwell(R)法检测发现MCF10A-Twist细胞迁移和侵袭能力明显增加(P＜0.01).结论 Twist诱导MCF10A细胞发生EMT转化,并促进其迁移和侵袭.     

乳腺癌细胞Twist和Trkb的表达及其意义

目的:探讨乳腺癌细胞Twist和Trkb的表达及其意义.方法:培养人类乳腺癌细胞系MCF-7,并注射到裸鼠体内,3-4周后收集鼠移植瘤标本14例;同时收集了乳腺癌患者的标本86例.使用RT-PCR检测Twist和Trkb的表达,并回顾性分析二者与患者无疾病进展时间的关系.结果:在裸鼠体内,肺转移组织的Twist和Trk...     

癌基因Twist在骨肉瘤中的研究进展

Twist属于高度保守的碱性螺旋-环-螺旋结构的转录因子家族,在动物和人胚胎发育、诱导细胞移动及组织塑形中起主要作用。Twist是一种癌基因,与许多肿瘤有密切关系,其中与骨肉瘤发生、侵袭和转移也有重要关系。骨肉瘤是一种最常见的原发性恶性骨肿瘤,恶性程度高,愈后差,以截肢术为主的手术治疗是过去标准的治疗手段,随着近年来新辅助化疗、基因靶向治疗等非手术治疗的发展,保肢手术为骨肉瘤患者带来了新的希望。癌基因Twist的深入研究将为骨肉瘤的诊断、治疗及预后提供了一个新的靶点。