谷云飞从运脾补肾宣肺论治慢性便秘

慢性便秘是临床常见的难治性胃肠疾病之一。谷云飞教授会通古今，指出慢性便秘的发病与脾、肾、肺三脏密切相关，治疗上以运脾、补肾为核心，重视宣肺。他将病证结合，精准用药，首创生白术70g配伍枳实30g的组方应用，临床疗效显著。附验案1则以佐证。     

我国弓形虫Chinese 1优势基因型感染对小鼠脑组织铁代谢影响

目的　探讨我国弓形虫Chinese 1优势基因型感染对宿主脑组织铁代谢及脑损伤的影响。方法　将20只C57BL/6（体质量15～17 g）小鼠随机分为对照组和感染组，每组10只。感染组每只小鼠腹腔注射4 000个弓形虫Chinese 1优势基因型TgCtwh3虫株速殖子，对照组小鼠注射等量无菌PBS，饲养6 d后处死小鼠并取其脑组织。采用电感耦合等离子体质谱法（inductively coupled plasma mass spectrometry, ICP⁃MS）检测小鼠脑组织铁元素水平；采用RNA芯片检测两组小鼠脑组织差异基因数目并对功能基因表达情况进行基因本体论（Gene Ontology, GO）功能富集；采用实时荧光定量PCR（fluorescent quantitative real⁃time PCR, qPCR）技术检测小鼠脑组织中弓形虫表面抗原1（Toxoplasma gondii surface antigen 1，TgSAG1）基因及部分锌铁调控蛋白（Zrt⁃ and Irt⁃like protein, ZIP）家族mRNA表达水平；采用光镜和电镜观察小鼠脑组织海马齿轮回（dentate gyrus, DG）超微结构；采用Western blotting检测谷胱甘肽过氧化物酶4（glutathione peroxidase 4, GPx4）蛋白表达水平；采用硫代巴比妥酸（TBA）法检测丙二醛（malondialdehyde, MDA）水平；采用免疫组化检测血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor, VEGF）蛋白表达光密度（optical density, OD）值。结果　光镜下可见感染组小鼠脑组织海马DG区细胞坏死，电镜下见感染组小鼠脑组织海马区出现胞质空泡化、核皱缩坏死、线粒体嵴断裂消融、自噬小体增加等超微结构变化。与对照组相比，感染组小鼠脑组织中铁元素水平上调[（32.92 ± 0.90） µg/g vs.（37.72 ± 1.10） µg/g；t = 3.397, P < 0.01]；RNA芯片检测感染组小鼠脑组织发现721个基因上调、276个基因下调，差异表达基因在金属离子结合能力上有明显富集。与对照组相比，感染组小鼠脑组织金属元素转运体ZIP2 mRNA表达水平上调（t = 8.659，P < 0.05）、GPx4表达下降[（1.046 ± 0.025） vs. （0.720 ± 0.101）；t = 3.129，P < 0.01]）、MDA水平升高[（4.37 ± 0.33） nmol/mgprot vs.（5.93 ± 0.54） nmol/mgprot；t = 2.451，P < 0.05）]、VEGF蛋白平均OD值上调[（0.348 3 ± 0.017 8） vs. （0.490 6 ± 0.010 5）；t = 6.641，P < 0.01]。结论　Chinese 1优势基因型弓形虫感染后，小鼠脑组织中铁元素蓄积、抗氧化能力下调、氧化应激水平升高，提示弓形虫感染可影响宿主脑组织铁代谢而导致脑损伤。     

温阳解郁颗粒调节BDNF/TrkB/ERK信号通路保护皮质酮诱导损伤型海马神经细胞的作用机制研究＊

目的 观察温阳解郁颗粒（Wenyang Jieyu granule，WYJY）对皮质酮（Corticosterone，CORT）诱导损伤型小鼠海马神经细胞（TH22 cell）的保护作用，基于脑源性神经营养因子（Brain derived neurotrophic factor， BDNF）/酪氨酸激酶B（Tyrosine kinase B， TrkB）/细胞外信号调节蛋白激酶（Extra cellular regulated protein kinases， ERK）信号通路探讨WYJY保护海马神经细胞的作用机制。方法 体外构建小鼠海马神经细胞皮质酮诱导损伤模型，以不同浓度的WYJY和氟西汀（Fluoxetine，FXT）含药血清作用于模型细胞，细胞增殖-毒性检测（Cell Counting Kit-8， CCK-8）法分析细胞活性，倒置显微镜下观察给药前后细胞形态结构的改变，采用蛋白免疫印迹法（Western Blot）、实时荧光定量PCR（Quantitative real-time PCR， qPCR）法检测神经细胞内凋亡因子（BCL2-Associated X， Bax）、抗凋亡因子（B-cell lymphoma-2， Bcl-2）、BDNF、Trkb、ERK以及丝氨酸/苏氨酸激酶（Phospho-p90RSK， RSK）、环磷腺苷效应元件结合蛋白（cAMP-response element binding protein， CREB）蛋白表达水平以及相关基因的表达水平。结果 在浓度为459.5 μmol·L^-1的CORT作用24 h后，HT22细胞的活性抑制率达到50%，在此条件作用下细胞形态结构损伤明显，凋亡程度严重，细胞上清中BDNF的含量显著减少（P<0.05），细胞内凋亡相关因子Bax/Bcl-2的比值明显升高（P<0.01），BDNF、Trkb、ERK、RSK、CREB磷酸化蛋白表达水平和mRNA表达水平明显降低（P<0.01）；以5%的浓度为2.85 g·kg^-1的WYJY和10%的FXT含药血清作用于受损的HT22细胞后，HT22细胞存活率明显提升（P<0.01），细胞结构的损伤明显改善，细胞凋亡程度减轻，细胞外BDNF的含量显著升高（P<0.05），细胞内Bax/Bcl-2比值显著下调（P<0.01），BDNF、Trkb、ERK、RSK、CREB磷酸化蛋白表达水平和mRNA表达水平显著提升（P<0.05，P<0.01）。结论 温阳解郁颗粒可有效保护高浓度CORT造成的小鼠海马神经细胞损伤。调控BDNF/Trkb/ERK通路，放大CREB信号传导，影响Bcl-2、BDNF水平，可能是其保护海马神经元，发挥抗抑郁疗效的重要机制。     

miR-142通过FMRP介导上调APP/PS1小鼠海马神经元PSD95和Synapsin I表达改善学习记忆能力

目的 探讨miR-142通过FMRP介导调控APP/PS1小鼠海马神经元内PSD95和Synapsin I的表达及对学习记忆能力的影响。方法 将10月龄APP/PS1小鼠随机分成AD组、sh-miR-NC组、sh-miR组，同月龄的C57BL/6小鼠作为Control组，利用Morris水迷宫行为学实验检测小鼠的学习记忆能力，用Western blot和免疫荧光方法检测FMRP、PSD95和Synapsin I在各组小鼠海马神经元中的表达情况。结果 APP/PS1小鼠学习记忆能力明显下降；沉默miR-142明显改善APP/PS1小鼠的学习记忆能力，使APP/PS1小鼠海马神经元低表达的FMRP、PSD95和Synapisin I等蛋白逆转上调。结论 miR-142通过结合FMRP上调APP/PS1小鼠海马神经元内PSD95和Synapsin I的表达水平，改善学习记忆能力。     

小鼠肾移植尿路重建术式总结与应用体会

本文总结小鼠肾移植尿路重建方法和技术要点。膀胱瓣和输尿管植入术均是小鼠肾移植中重建尿路的可行术式。膀胱瓣术式主要并发症为术后膀胱瓣及输尿管远端缺血坏死。其发生率受供体小鼠品系和手术技术影响。输尿管植入术式主要并发症为术后尿漏。其发生率受受体小鼠性别和手术技术影响。膀胱瓣术式重点是术中判断膀胱瓣血供并合理修剪缝合膀胱瓣。输尿管植入术式重点是妥善修剪和固定输尿管。输尿管植入术式比膀胱瓣术式快捷。其早期发生的尿路并发症更容易通过二次手术成功修复, 但远期尿潴留发生风险高于膀胱瓣术式。手术干预的及时性是成功修复早期尿路并发症的关键因素。     

勘误说明CSCD

尊敬的各位读者:《毒理学杂志》2022年8月第36卷第4期,有以下勘误及补充:(1)第292页,第10行中的"2000"应为"1710"。(2)第294页,左侧第23~24行,“观察期内未见其他明显中毒体征,无死亡”,应为“24h观察期内未见其他明显中毒体征,无死亡;48h时有1只雄性小鼠死亡;其余动物观察满14d未死亡。”     

小鼠丘脑室旁核至边缘系统部分区域的分支投射参与痒信息的传递

目的:观察小鼠丘脑室旁核(PVT)向边缘系统部分区域的分支投射，并为其参与痒信息的传递提供形态学证据。方法:小鼠分为两组。将荧光金(FG)分别注入第1组动物的内侧前额叶皮质(mPFC)、岛叶(IC)或杏仁中央核(CeA);将FG和霍乱毒素B亚单位(CTB)分别注射到第2组小鼠的两个不同核团(mPFC/IC、mPFC/CeA和IC/CeA);灌注固定前2 h再给予动物急性痒刺激。结合免疫荧光组织化学染色技术观察小鼠PVT内向mPFC、IC或CeA投射、分支投射神经元的分布及其表达FOS蛋白的状况。结果:PVT内存在向mPFC、IC和CeA投射、分支投射并表达FOS的神经元，这些标记神经元在PVT内的分布和比例存在差异。结论:PVT内具有定位分布倾向的部分神经元借助分支投射同时向边缘系统的不同区域传递痒信息。     

基层医生的儿童功能性便秘诊疗能力研究

背景 功能性便秘（FC）是儿童常见健康问题，也是儿童父母在基层医疗卫生机构门诊就诊中咨询频率较高的问题。尽管便秘不是急症，但如果处理不当，可能会引起严重的并发症，进而影响儿童及其家庭的生活质量。 目的 了解基层医生的儿童FC诊疗水平，为针对性提高基层医生的儿童FC诊疗与管理能力提供依据。 方法 于2020年7月，在北京市西城区基层医疗卫生机构中选取在日常诊疗中能接触到儿童患者的医生130例。采用本研究组自行设计的问卷对纳入医生开展调查，内容包括对≥6个月儿童FC诊断中常见症状的认知，以及对儿童FC的推荐治疗方法、推荐治疗药物、药物治疗时机及治疗持续时间等。 结果 108例（83.1%）基层医生的问卷被有效回收，其中全科医生34例（31.5%）、儿科医生30例（27.8%）、中医科医生30例（27.8%），平均每月门诊接触儿童患者（10.1±4.4）例。对于儿童FC的诊断：当≥6个月患儿出现排便次数少、大便坚硬、排便时出血、大便失禁、排便困难、排出稠便前哭泣症状时，分别有40.7%（44/108）、39.8%（43/108）、23.1%（25/108）、9.3%（14/108）、39.8%（43/108）、23.1%（25/108）的基层医生会考虑将其诊断为FC；51.9%（56/108）的基层医生认为同时存在排便次数少、排便困难两种症状时可诊断为FC；25.0%（27/108）的基层医生认为，同时存在排便次数少、大便坚硬、排便时出血、排便困难4种症状时可诊断为FC。对于儿童FC的治疗：37.0%（40/108）的基层医生推荐将药物治疗作为儿童FC的首选治疗方法；63.0%（68/108）的基层医生推荐将非药物治疗作为首选治疗方法，其中88.2%（60/68）推荐腹部按摩，85.3%（58/68）推荐高纤维饮食，82.4%（56/68）推荐如厕训练，72.1%（49/68）推荐增加液体摄入量。75.9%（82/108）的基层医生推荐使用乳果糖治疗；27.8%（30/108）的基层医生推荐联合应用柠檬酸钠、十二烷基磺基乙酸钠、山梨糖醇的微灌肠为直肠治疗方法，64.8%（70/108）的基层医师建议在患儿排便特别困难时进行直肠给药。基层医生认为，患儿开始治疗到有阳性反应的平均时间为（4.1±2.6）d；基层医生对儿童FC的平均治疗时间为（21.2±4.3）d；88.9%（96/108）的基层医生认为，便秘平均平均治疗（46.0±9.3）d可终止；当排便频率和/或稠度恢复正常/患者不再有不适时，88.9%（96/108）的基层医生会考虑停止治疗。 结论 尽管基层医生对儿童FC的诊断和治疗有一定认识，但总体认知水平有待提高。建议进一步提升现有基层医生对儿童FC的认知和综合管理能力，并制定基层医疗卫生机构的儿童FC综合管理模式，以提高对儿童FC的管理水平，从而降低患病率、提升治愈率。