中国HIV-1感染者宿主HLA-B分型与艾滋病疾病进展间的关系

宿主人类白细胞抗原(HLA)分型,与1型艾滋病病毒(HIV-1)感染者的疾病进展密切相关,针对中国不同人群感染HIV-1后疾病进展与宿主HLA分型间的相关关系已有众多报道,包括中部地区HIV-1感染者,北方汉族HIV-1感染者,北京男男同性恋HIV-1感染者,四川彝族HIV-1感染者等。在已报道的HLA分型中,有些HLA分型作用机制已明确,有些尚需要进一步研究。文章主要对目前报道的与中国HIV-1感染者疾病进展相关的HLA-B类分子分型进行综述,以期能更好地对与HIV-1感染者疾病进展相关的HLA分型进行研究提供依据和基础。     

HLA-B宽特异性抗原表位Bw4对HCV特异性T细胞反应影响分析

目的 探讨HLA-B分子宽特异性抗原表位Bw4对丙型肝炎病毒(HCV)特异性T细胞反应的影响.方法 以有偿献血途径感染HCV患者86例为研究对象,采用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)方法,进行HLA分型.采用ELISPOT技术观察HCV非结构蛋白NS3、NS4及NS5诱导T细胞分泌IFN-γ反应.结果 86例HCV感染者中Bw4/4纯合子患者29例(33.7％)、Bw4/6杂合子患者38例(44.2％)、Bw6/6纯合子患者19例(22.1％).Bw4/4纯合子、Bw4/6杂合子、Bw6/6纯合子HCV病毒载量分别为(3.98±0.32) Log(IU/ml)、(5.22±0.29) Log(IU/ml)、(5.04±0.38) Log(IU/ml),3组比较,HCV病毒载量差异具有统计学意义(P=0.0153).24例患者进行HCV非结构蛋白(NS3、NS4、NS5)诱导T细胞分泌IFN-γ反应,Bw4/4纯合子组HCV特异性T细胞反应率为50％ (5/10),反应强度中位数为70 SFU/106 PBMC(0～2020 SFU/106 PBMC),非Bw4/4纯合子组中,HCV特异性T细胞反应率为14.28％ (2/14),反应强度中位数为0 SFU/106 PBMC (0～200SFU/106 PBMC).两组比较,Bw4/4纯合子组反应强度明显高于非Bw4/4纯合子组,差异有统计学意义(P=0.0450),前者HCV特异性T细胞反应频率高于后者,差异接近有统计学意义(P=0.069).在Bw4/4纯合子组,HCV以NS5诱导的T细胞反应为主体,其反应频率为50％ (5/10),非Bw4/4纯合子组,NS5反应频率仅为7.14％(2/14),两者比较差异接近具有统计学意义(P=0.050).结论 携带Bw4/4纯合子HCV感染者,病毒载量较低,HCV特异性T细胞反应较强.Bw4可能通过增强HCV特异性T细胞免疫,进而产生对抗HCV复制的作用.     

公益组织在慢性病随访服务体系工作中的作用

随着我国慢性病患病人数以及慢性病病例谱的快速扩大,慢性病已成为严重威胁人类健康的重要因子,慢性病随访服务体系的作用也日益凸显出来。本文在简要分析了随访服务体系的发展现状及目前存在问题的基础上,进而探索公益组织在慢性病随访服务体系中的作用。     

产气荚膜梭菌α毒素基因片段克隆的测序与应用

目的为了获得A型产气荚膜梭菌C57株α毒素基因片段克隆质粒,作为实时定量PCR检测标本产气荚膜梭菌标准,以备临床应用。方法采用两轮高保真PCR扩增A型产气荚膜梭菌C57株α毒素基因片段(Cpa900),经EcoRⅠ酶切后插入质粒pUC19并连接,构建重组质粒pUC19-Cpa900,转化大肠埃希菌Top10感受态菌株并予以增菌后测序,并提取质粒进行实时定量PCR测试。结果 pUC19下游引物匹配Cpa900上、下游引物双PCR筛选电泳结果表明,116-2株中含单拷贝、反向插入pUC19的Cpa900,并为测序结果所证实;测序结果表明,克隆片段与美国典型菌种保藏中心标准株ATCC 13124的全基因序列CP000246.1中的磷脂酶C(PLC)基因(CPF_0042)相应序列相比,符合率高达99.8%;变异位点不在两实时定量PCR引物和探针区,经实时定量PCR实测对扩增效率无影响,完全可用作实时定量PCR检测标准。结论 A型产气荚膜梭菌α毒素克隆片段序列高度保守,作为模板具有高扩增效率,可作为标准品用于实时定量PCR检测A型产气荚膜梭菌,质粒引物匹配插入片段双引物双PCR筛选转化菌株,不但可鉴定阳性克隆,还能确定重组质粒中插入基因拷贝数量和插入方向、有效避免假阳性,不失为很好的筛选方法。     

流式样本保存时间对肝癌患者外周血T淋巴细胞和NK细胞的影响

目的观察样本保存时间对流式细胞仪检测肝癌患者外周血T淋巴细胞亚群的影响。方法随机选取肝癌患者16例,采血后6 h内分离外周血单核细胞,将细胞分成五组,包括立即上机组、4℃PBS保存1 d、2 d、3 d及5 d检测组,分别进行流式检测。结果样本保存3 d组淋巴细胞的物理参数发生变化;样本保存3 d组CD3+T淋巴细胞百分比显著降低(P 0. 05);样本保存3 d组NK细胞百分比显著降低(P 0. 05)。结论临床样本在收集后进行外周血单核细胞分离,将细胞用PBS于4℃条件下保存3 d内进行淋巴细胞和NK细胞的上机检测结果比较稳定。     

HCV/HIV共感染者T细胞表面CD38分子的表达水平

丙型肝炎病毒（HCV）/人类免疫缺陷病毒（HIV）共感染对丙型病毒性肝炎的病情进展有影响,其机制尚不清楚。CD38分子是T细胞表面活化标志之一[4,5],在HCV/HIV共感染者中T细胞的活化是否发生变化尚无定论。我们于2012-2013年通过对比分析单独HCV感染组和HCV/HIV共感染组患者T细胞表面CD38分子的表达水平,了解HCV/HIV共感染者的T细胞活化的变化,报告如下。     

样本资源库中肝病患者和HIV感染者外周血单个核细胞分离效果比较

目的样本资源库中不同患者分离的外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cell,PBMC）保存效果不同,从而影响后续科学研究。对肝病患者和人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)感染者PBMC分离效果进行分析比较,有助于更好的对患者PBMC细胞质量进行控制。方法121例标本根据疾病诊断分为肝病患者35例,HIV感染者51例,对照组35例。淋巴细胞分离液密度梯度离心法分离PBMC,吖啶橙/碘化丙啶双染色法检测PBMC的活细胞、总细胞和细胞活性。结果3组人群PBMC总细胞数结果显示对照组分离细胞最多（1.54×106, 9.03×105～3.53×106）,其次为HIV感染者人群（1.08×106, 3.72×105～2.82×106）,最后为肝病患者（8.49×105, 3.61×105～2.30×106）,3组之间差异具有统计学意义（P＜0.05）。活细胞结果显示对照组分离后活细胞浓度最高（1.53×106, 8.79×105～3.51×106）,其次为HIV感染者人群（1.06×106, 3.46×105～2.77×106）,最后为肝病患者（8.44×105, 3.54×105～2.25×106）,3组之间差异具有统计学意义（P＜0.05）。细胞活性结果显示对照组细胞活性（98.40±0.39）高于肝病患者（97.28±0.33）和HIV感染者（96.86±0.37）,3组之间差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论肝病患者和HIV感染者在分离PBMC活细胞、总细胞和细胞活性方面均要低于正常对照组。     

原发性肝癌患者外周效应功能T细胞的保护意义北大核心CSCD

目的:探讨原发性肝癌(HCC)患者外周循环中T细胞的表型特点及意义。方法:收集并分离北京佑安医院肝病介入中心收治的39例HCC患者的外周血单个核细胞。合成5种肿瘤相关抗原(TAA)多肽,采用酶联免疫斑点测定法(ELSPOT)及流式细胞术分析T细胞反应及表型。结果:TAA特异性T细胞免疫反应阳性率为56.41%;阳性患者消融治疗后无复发生存期显著优于阴性患者(P<0.01),其CD4+和CD8+T细胞中TTE的百分比显著高于阴性患者[CD4:0.83%(0.34%,1.33%)vs 0.36%(0.24%,0.58%),P=0.02;CD8:7.57%(3.46%,11.29%)vs 4.76%(2.42%,6.77%),P=0.03];在阳性患者中,进展期患者CD8+PD1+和CD8+CD152+T细胞百分比显著高于早期患者[(40.65±4.39)%vs(27.66±2.64)%;(17.96±1.72)%vs(11.84±0.89%)],差异有统计学意义(P=0.01;P<0.01)。结论:HCC患者外周血中存在的TAA特异性T细胞免疫反应具有保护作用,诱导特异性效应T细胞免疫反应并阻断T细胞耗竭是HCC免疫治疗的重要方向。     

非编码RNA在肝细胞癌诊断及预后中作用的研究进展

肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是原发性肝癌的主要类型.非编码RNA (noncoding RNAs,ncRNAs)在HCC发生发展中有重要作用,并能用于HCC的诊断及预后判断.本文综述了新近发现的可用于HCC诊断和(或)预后判断的ncRNAs.