褪黑素对急性睡眠剥夺大鼠记忆的影响

背景:睡眠剥夺可引起动物或人学习记忆受损,还可引起大鼠脑组织一氧化氮含量升高。褪黑素具有抗自由基、抗氧化作用。有报道褪黑素对氯化铝、吗啡戒断等因素致动物学习记忆损伤有改善作用,但褪黑素是否对睡眠剥夺致动物学习记忆损伤有影响?目的:观察褪黑素对睡眠剥夺大鼠记忆的影响及并分析其可能的作用机制。设计:随机分组对照观察的动物实验。单位:解放军第四军医大学基础部基础医学教学实验中心和护理系。材料:实验于2005-01在解放军第四军医大学基础医学教学实验中心完成。选择成年雄性SpragueDawley大鼠24只,随机数字表法分为3组,对照组、褪黑素小剂量组、褪黑素大剂量组,每组8只。方法:小剂量褪黑素组和大剂量褪黑素组,采用褪黑素剂量分别为5mg/kg和15mg/kg,配制成2mL溶液,每天下午17:00腹腔注射,对照组在相同时间腹腔注射生理盐水2mL。1次/d,连续7d,后给予睡眠剥夺3d。此间依然按分组每日给予褪黑素或生理盐水。采用小平台水环境法建立大鼠睡眠剥夺模型,睡眠剥夺48h和睡眠剥夺72h后用水迷宫测试大鼠的记忆,用逃避潜伏期(s)作为大鼠的学习记忆水平变化的指标,逃避潜伏期时间越短,说明大鼠的空间记忆越好。各组睡眠剥夺结束后大鼠立即处死,于冰浴中取出海马与大脑皮质。用硝酸还原法检测大鼠大脑皮层和海马中一氧化氮含量,用硫代巴比妥法检测丙二醛含量。主要观察指标:睡眠剥夺48h和睡眠剥夺72h后逃避潜伏期测评结果。大鼠大脑皮质和海马中一氧化氮和丙二醛含量。结果:在实验过程中无动物死亡,全部进入结果分析。①各组大鼠睡眠剥夺48h、72h的水迷宫逃避潜伏期差异有显著性意义(F=11.886,P=0.000)和(F=5.440,P=0.012),睡眠剥夺48h、72h小剂量褪黑素组和大剂量褪黑素组的逃避潜伏期均较对照组显著减小,且睡眠剥夺48h大剂量组逃避潜伏期比小剂量组减小。②各组大鼠脑内一氧化氮和丙二醛含量差异都非常显著,大脑皮质一氧化氮(F=14.038,P=0.000)、丙二醛(F=27.414,P=0.000)和海马一氧化氮(F=22.692,P=0.000)、丙二醛(F=14.316,P=0.000)。与对照组比较,两个实验组大鼠大脑皮质和海马一氧化氮和丙二醛含量降低都非常显著,且大剂量组与小剂量组海马一氧化氮含量相比差异也有显著性,呈现出量效关系。结论:褪黑素对睡眠剥夺大鼠记忆障碍有改善作用,这种作用可能与抑制睡眠剥夺大鼠大脑皮质和海马中一氧化氮及丙二醛的升高作用有关。     

《基础医学概论》教材编写的实践与探索

基础医学概论是针对医学院校非临床医学专业学生使用的一门贯通基础医学各学科、廓清基础医学整体脉络的综合性教材。以＂分子-细胞-器官-系统＂为主线,从＂正常-异常-康复＂方面重组、融合了基础医学10余门课程的内容,突破了传统按分科编写教材的思路,编写顺序独特,内容整体优化,使用对象明确,针对性强。     

实验基础医学考试质量分析与思考

实验基础医学是第四军医大学在教学改革中为医学本科生设置的一门新课程.在考试内容及策略思想、各考试项目内容及分数权重、考试的难度分析、考试各项内容失分的主要原因等方面,对2001-2005级学员实验基础医学课程的考试进行质量分析,以检查教师教学和学生学习的情况,总结教学的成功经验.在此基础上制定和修改下一个阶段学习目标的管理计划.     

一种四环素严紧控制的真核表达系统

目的构建一种严紧调控的表达系统,用于在真核细胞内表达外源性兴趣基因。方法融合四环素诱导元件、人工细菌染色体(BAC)以及Gateway技术,建立了一种新的表达体系。并且将该体系进行了测试。结果兴趣基因编码的β-catenin-ERα融合蛋白经荧光素酶活性检测和Western杂交分析,其表达被四环素或强力霉素严紧控制,在表达载体pE11-IGR-β-catenin-ERα中,EGFP的表达量恒定,可以作为流式细胞术有效的筛选标记。结论该系统可以作为一种有效的工具,用于在真核细胞中表达外源性兴趣基因,并且实现严紧的表达调控。     

星状神经节后心下交感神经同步电活动的记录及预处理方法

目的:建立提取心下交感神经电活动的动物实验、记录及预处理方法. 方法:采用猫做为实验动物模型,信号通过生理数据采集系统记录,运用自回归模型谱分析法、有限冲击响应数字滤波器以及基于成组t检验的算法对原始信号进行预处理. 结果:获得具有明显同步特征的心下交感神经电活动信号,提取出4种可用于进一步分析的电活动特征参数. 结论:动物模型及记录系统能够实现心下交感神经电活动的准确记录,预处理方法从原始信号中提取出电活动特征参数.     

开设基础医学概论自修课程的实践与思考

为了培养学生自主获取知识的能力,第四军医大学在开设基础医学概论自修课程时,实施了教学改革并取得了较好的效果.教学改革包括转变师生的“教”与“学”观念,树立以学生为主体的教学理念;加强教师辅导,教会学生学习的方法,为学生自学创造良好的条件;改革考试方式,全程考评学生的学习成绩,提高自修课程的教学效果.     

褪黑素对急性睡眠剥夺大鼠记忆的影响

背景：睡眠剥夺可引起动物或人学习记忆受损，还可引起大鼠脑组织一氧化氮含量升高。褪黑素具有抗自由基、抗氧化作用。有报道褪黑素对氯化铝、吗啡戒断等因素致动物学习记忆损伤有改善作用，但褪黑素是否对睡眠剥夺致动物学习记忆损伤有影响？ 目的：观察褪黑素对睡眠剥夺大鼠记忆的影响及并分析其可能的作用机制。 设计：随机分组对照观察的动物实验。 单位：解放军第四军医大学基础部基础医学教学实验中心和护理系。 材料：实验于2005～01在解放军第四军医大学基础医学教学实验中心完成。选择成年雄性Sprague Dawley大鼠24只，随机数字表法分为3组，对照组、褪黑素小剂量组、褪黑素大剂量组，每组8只。 方法：小剂量褪黑素组和大剂量褪黑素组，采用褪黑素剂量分别为5mg／kg和15mg／kg，配制成2mL溶液，每天下午17：00腹腔注射，对照组在相同时间腹腔注射生理盐水2mL。1次／d，连续7d，后给予睡眠剥夺3d。此间依然按分组每日给予褪黑素或生理盐水。采用小平台水环境法建立大鼠睡眠剥夺模型，睡眠剥夺48h和睡眠剥夺72h后用水迷宫测试大鼠的记忆，用逃避潜伏期（s）作为大鼠的学习记忆水平变化的指标，逃避潜伏期时间越短，说明大鼠的空间记忆越好。各组睡眠剥夺结束后大鼠立即处死，于冰浴中取出海马与大脑皮质。用硝酸还原法检测大鼠大脑皮层和海马中一氧化氮含量，用硫代巴比妥法检测丙二醛含量。 主要观察指标：睡眠剥夺48h和睡眠剥夺72h后逃避潜伏期测评结果。大鼠大脑皮质和海马中一氧化氮和丙二醛含量。 结果：在实验过程中无动物死亡。全部进入结果分析。（1）各组大鼠睡眠剥夺48h、72h的水迷宫逃避潜伏期差异有显著性意义（F=11．886，P=0．000）和（F=5．440，P=0．012），睡眠剥夺48h、72h小剂量褪黑素组和大剂量褪黑素组的逃避潜伏期均较对照组显著减小，且睡眠剥夺48h大剂量组逃避潜伏期比小剂量组减小。（2）各组大鼠脑内一氧化氮和丙二醛含量差异都非常显著。大脑皮质一氧化氮（r=14．038，P=0．000）、丙二醛（F=27．414。P=0．000）和海马一氧化氮（F=22．692，P=0．000）、丙二醛（F=14．316，P=0．000）。与对照组比较，两个实验组大鼠大脑皮质和海马一氧化氮和丙二醛含量降低都非常显著，且大剂量组与小剂量组海马一氧化氮含量相比差异也有显著性。呈现出量效关系。 结论：褪黑素对睡眠剥夺大鼠记忆障碍有改善作用，这种作用可能与抑制睡眠剥夺大鼠大脑皮质和海马中一氧化氮及丙二醛的升高作用有关。     

硫化钠脱毛剂最佳脱毛浓度的探讨

目的:探讨不同浓度硫化钠脱毛剂对新西兰家兔皮肤的损伤程度,试图找到对实验动物皮肤损伤小、脱毛效果佳的脱毛剂浓度。方法:通过离体实验和在体实验,记录4%、6%、8%、10%硫化钠脱毛剂的脱毛效果,取皮切片显微观察皮肤损伤情况,记录从脱毛开始到肉眼可见绒毛长出的天数。结果:离体实验中,兔毛在4%、6%、8%、10%硫化钠脱毛剂中分别在9.17±0.48min、7.50±0.43min、4.67±0.38min、3.67±0.38min时大量溶解,在体实验中,不同浓度的脱毛剂分别在8.50±0.50min、6.67±0.47min、4.67±0.47min、3.33±0.47min时脱毛完全;切片结果显示4%硫化钠脱毛剂对表皮的损伤最小,10%硫化钠脱毛剂对表皮的损伤最大。结论:浓度为4%和6%硫化钠脱毛剂脱毛后对家兔皮肤及其附属器官的损伤较小,4%可用于慢性脱毛实验,6%可用于急性脱毛实验。     

褪黑素对急性睡眠剥夺大鼠行为的影响及机制

目的:探讨褪黑素对急性睡眠剥夺(SD)大鼠行为的影响及可能的作用机制.方法:将Sprague Dawley 24只大鼠随机分为3组,对照组给予SD和生理盐水腹腔注射,2个实验组分别给予SD和褪黑素5 mg/kg和15 mg/kg腹腔注射,连续给药7 d后,采用小平台水环境法建立大鼠SD模型,SD 72 h用旷场反应箱测试大鼠的行为,用试剂盒检测大鼠大脑皮层和海马中一氧化氮(NO)和丙二醛(MDA)含量.结果:实验组旷场反应测试大鼠兴奋性和探索性行为均明显小于对照组(P<0.05, P<0.01),有量效关系.实验组大鼠大脑皮层和海马组织中NO和MDA含量明显低于对照组(P<0.01).结论:褪黑素对睡眠剥夺大鼠行为障碍有改善作用,这种作用可能与抑制睡眠剥夺大鼠大脑皮层和海马中NO及MDA的升高有关.     

人肝癌组织伴生成纤维细胞的体外培养及其生物学性状的初步探讨

目的:体外培养人肝癌组织伴生成纤维细胞,观察其生长状态,为进一步研究其功能奠定基础。方法:应用组织块培养法进行人肝癌伴生成纤维细胞的原代培养,细胞铺满培养瓶底后首次传代,通过胰酶消化法和反复贴壁法进行成纤维细胞的纯化;通过倒置显微镜观察细胞形态、免疫组织化学方法检测细胞膜波形蛋白(v im entin)、角蛋白(keratin)表达情况,对细胞进行鉴定。结果:组织块法原代培养约1周可见纤维样细胞从组织块周围游出,5周左右细胞基本长满培养瓶底。首次传代时应用胰酶消化法进行成纤维细胞的初次纯化,第2次转种时先后应用酶消化法和反复贴壁法再次进行细胞纯化,第3代以后基本可获得呈典型克隆性生长、长梭形纤维样细胞,生长周期短。免疫组化染色结果为v im entin染色阳性,keratin染色阴性。结论:在体外成功培养了人肝癌组织伴生成纤维细胞,并对其生物学性状进行了初步探讨,为进一步研究其与肝癌细胞生长、浸润及转移的关系等机制奠定了基础。