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1.
【摘 要】 目的 评价时差成像技术(time—lapse,TL)干式培养与传统湿式培养对不同年龄组胚胎发育的影响。方法 回顾性分析2020 年 7月至2021年12月,2390例体外胚胎培养结果,其中TL组640个周期,传统湿式培养组(对照组,Control,C组)1750个周期,比较两组间正常受精率、正常卵裂率、有效胚胎率、优质胚胎率、囊胚形成率、和优质囊胚率的差异。结果 (1)两组在女方年龄、不孕类型、不孕因素、促排卵药物(Gonadotropins,Gn)用量、受精方式差异均无统计学意义(P>O.05),(2)在20-29岁组:与C组比较,TL组有效胚胎率 (75.39%vs 70.15%)、优质胚胎率(49.79%vs 41.98%),TL组均显著升高(P<0.01);在30-34岁组:与C组比较,TL组优质胚胎率(46.70%vs 41.43%)也显著升高(P<0.01),囊胚形成率(57.14%vs 52.74%)、优质囊胚率(35.82%vs 32.26%)明确改善差异有统计学意义(P<0.05);≥40岁组:与C组比较,TL组优质胚胎率(44.05%vs 48.96%,P<0.05)、囊胚形成率(16.11%vs21.77%,P<0.01)及及优质囊胚率均显著降低(16.11%vs 21.77%,P<0.05)。结论 与常规湿式相比,在低年龄组(20-34岁),TL培养可显著提高优质胚胎率;而在高年龄组(≥40岁)则显著降低优质胚胎率,囊胚形成率和优质囊胚率,可能与培养基渗透压改变有关。 相似文献
2.
目的 探讨多重PCR靶向富集结合高通量测序技术在结直肠癌 (colorectal cancer,CRC)中检测错配修复 (mismatch repair,MMR)基因种系突变的应用。方法 收集17例CRC患者和14例正常人的血液并提取基因组DNA;设计和优化寡聚核苷酸探针,使其能对5个基因MLHl、MSH2、PMS1、PMS2和MSH6的73个外显子序列进行有效的PCR扩增和富集;应用多重PCR技术靶向富集样本MMR基因的外显子序列;扩增产物进行文库构建和高通量测序,检测MLHl、MSH2、PMS1、PMS2和MSH6基因的突变情况。结果 31个样本共得到2.7Gb的数据,平均reads数为287 048,测序数据中平均82.18%可与参考序列进行比对,外显子序列平均覆盖度为99.9%,平均测序深度为2 282。在MMR基因的外显子区域共发现13种非同义单核苷酸变异 (single nucleotide variation,SNV)、2种同义 SNV,其中MSH6的c.G3205C:p.G1069R为未见报道SNV。检测结果经Sanger法测序验证,结果一致。结论 多重PCR靶向富集结合高通量测序技术是一套通量高、速度快、费用低、准确性高的MMR基因突变筛查方法。 相似文献
3.
背景与目的:诱导共刺激分子(inducible costimulator,ICOS)属于B7-CD28免疫球蛋白超家族成员,表达于活化T细胞表面,在T细胞的激活和免疫应答中发挥重要作用;但目前对于ICOS及ICOS+ T细胞在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)肿瘤组织中的表达及其意义尚不清楚。该研究旨在测定ICOS、ICOS+ T细胞在HCC患者肿瘤组织中的表达情况并探讨其预后价值。方法:应用组织芯片(tissue microarrays,TMAs)和多重免疫组织化学技术(multiplex immunohistochemistry,mIHC)检测2006—2007年在复旦大学附属中山医院接受手术治疗的358例原发性HCC患者肿瘤组织和癌旁组织中ICOS+细胞、ICOS+CD4+及ICOS+CD8+ T细胞的浸润密度和ICOS+细胞占CD4+、CD8+ T细胞的百分比。应用Kaplan-Meier法和多因素COX回归模型分析上述指标对患者预后的影响。结果:与癌旁组织相比,ICOS+细胞和ICOS+CD4+ T细胞在肿瘤组织中浸润数量显著增加(P<0.000 1和P=0.009 1),而ICOS+CD8+ T细胞则呈相反的降低趋势(P=0.033);在肿瘤中,ICOS+CD4+ T细胞的浸润程度显著高于ICOS+CD8+ T细胞。此外,ICOS+CD4+和ICOS+CD8+ T细胞占各自T细胞亚群的百分比在肿瘤组织中均显著增加(P均<0.000 1)。预后分析发现,肿瘤组织中ICOS+细胞、ICOS+CD4+及ICOS+CD8+ T细胞浸润高的患者总生存期(overall survival,OS)更长,多因素分析证实上述指标是HCC的独立预后良好因素。结论:ICOS在HCC患者的肿瘤组织中高表达,且ICOS+细胞、ICOS+CD4+及ICOS+CD8+ T细胞是OS的独立预后良好因素,提示上述指标可作为新的HCC预后免疫标志物。 相似文献
4.
目的:检测1例交界型大疱性表皮松解症患儿LAMA3基因突变情况。方法:提取1例交界型大疱性表皮松解症患儿及其父母的外周血DNA,通过靶向捕获-高通量测序检测患儿的基因突变,用Sanger测序法进行父母验证,同时通过cDNA测序来验证异常的RNA剪接。结果:在患儿LAMA3基因上检测到两个新的影响RNA剪接的突变,即c.1478+5G>A(导致在mRNA上c.1381_1478del)和c.4647+5G>C(导致在mRNA上c.4647_4648ins74),患儿的这2个突变分别遗传自其父亲和母亲。结论:本次检测到的LAMA3基因上的2个致病突变,可能因严重破坏层粘连蛋白-332的功能性α3肽链的合成而导致患儿发病。 相似文献
5.
6.
目的 旨在构建包含由GFAP启动子介导的荧光素酶的慢病毒载体,检测体内外靶向肝星状细胞的外源基因表达的特异性和效率。方法 通过报告基因实验筛选介导效率较高的GFAP启动子,以CMV 启动子作为阳性对照分别介导荧光素酶在小鼠肝星状细胞(JS1)、人肝星状细胞(LX-2)及人肝细胞(L-02)中的表达。通过尾静脉注射将包装的慢病毒注射到四氯化碳诱导的肝纤维化小鼠体内,通过活体成像和Western blot检测慢病毒颗粒在小鼠体内的分布,并通过免疫双荧光染色检测肝星状细胞的特异表达。结果 人GFAP启动子比小鼠GFAP启动子驱动基因表达的效率高,而且在LX-2和JS1细胞中,人GFAP启动子介导的荧光素酶的活性及表达显著高于L-02细胞。活体成像显示小鼠腹部有荧光素酶的表达。GFAP启动子介导的荧光素酶可以与肝星状细胞的特异性生物标记蛋白GFAP、Desmin和α Sma共定位。结论 成功构建包含由GFAP启动子介导的荧光素酶的慢病毒载体,在体外细胞系以及小鼠体内肝中均可以实现荧光素酶在肝星状细胞中特异性表达。 相似文献
7.
在成骨细胞的分化增殖中,经典Wnt /β-catenin通路起着重要的调节作用;此通路中的任何一个因子都能影响成骨细胞的分化增殖。近几年里,大量研究证明R-脊椎蛋白家族巳成为Wnt/β-catenin信号通路的重要调节因子。本文就Rspo1通过Wnt/β-catenin信号通路调控影响成骨细胞分化增殖的研究进展作一综述。 相似文献
8.
目的 探讨MTB/利福平耐药实时荧光定量基因扩增检测系统(GeneXpert MTB/RIF)在基层医院对肺结核及利福平耐药的诊断价值.方法 收集2020年1-9月上海市奉贤区古华医院结核病专科门诊就诊的281例疑似肺结核患者的痰液标本,通过痰涂片抗酸染色镜检(AFB)、MGIT320培养及GeneXpert MTB/RIF检测,分析不同方法的阳性率、灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、一致性、平均周转时间、利福平耐药性.结果 281例疑似肺结核患者标本中GeneXpert MTB/RIF检测、痰涂片AFB、MGIT320培养阳性率分别为28.5%(80/281)、15.7%(44/281)、26.3%(74/281).以MGIT320培养结果为准,GeneXpert MTB/RIF分析的灵敏度为90.5%(67/74),特异度为93.7%(194/207),PPV为83.8%(67/80),NPV为96.5%(194/201),一致性为92.9%[(67+194)/281];痰涂片AFB的灵敏度为51.4%(38/74),特异度为97.1%(201/207),PPV为86.3%(38/44),NPV为84.8%(201/237),一致性为85.1%[(38+201)/281].AFP与GeneXpert MTB/RIF检测的灵敏度、一致性比较,差异有统计学意义(χ2=25.57、15.42,P<0.001).结论 GeneXpert MTB/RIF检测具有操作简单、快速、安全等优势,且灵敏度、特异度都较高,可以作为基层医院早期检测肺结核的重要方法之一,值得推广. 相似文献
9.
10.
目的探讨外周血循环肿瘤DNA(ctDNA)中原癌基因(KRAS)突变丰度变化对评估KRAS突变的局部晚期(cT3N1-2M0或cT4N0-2M0)结直肠癌患者新辅助治疗疗效的临床应用价值。方法选取53例组织活检被诊断为KRAS突变且接受了新辅助治疗的局部晚期结直肠癌患者,利用微滴式数字聚合酶链反应(ddPCR)检测其接受新辅助治疗前、后外周血中ctDNA KRAS突变丰度,收集胸、腹、盆腔电子计算机断层扫描(CT)结果,检测血清癌胚抗原(CEA)及糖类抗原19-9(CA19-9)含量。结果 53例局部晚期结直肠癌患者接受新辅助治疗前、后外周血ctDNA KRAS突变频率(MAF)不同,差异有统计学意义(P0.05);以MAF差值(治疗前MAF-治疗后MAF)为因变量,用最小显著性差异法(LSD)做MAF差值与影像学和病理学评效的比较分析,差异有统计学意义(P0.05);血清CEA和CA19-9变化差值(均为治疗前-治疗后)与影像学和病理学评效的比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论外周血ctDNA KRAS突变丰度作为一种新的分子评效手段可有效补充传统的治疗评价标准,在反映局部晚期结直肠癌对新辅助治疗的效果中具有重要的临床意义。 相似文献