Rad51的异常表达与肿瘤治疗

DNA修复相关蛋白Rad51是真核细胞进行同源重组修复的关键酶。在肿瘤细胞中Rad51基因可出现异常表达，引起重组修复失控，基因组不稳定，因此与肿瘤的发生、发展密切相关。同时Rad51蛋白水平在肿瘤细胞中的升高，可导致肿瘤对放化疗产生抵抗作用。以Rad51为肿瘤治疗靶点，降低其在肿瘤细胞中的表达水平，可提高细胞对放化疗的敏感性，这一思路有可能发展为新的肿瘤治疗手段。     

放射耐受性肝癌细胞亚株的筛选与建立

目的 诱导并筛选具有放射耐受性的单克隆肝癌细胞亚株,为进一步研究细胞抗放射生物学变化构建实验模型。方法 采用人肝癌HepG2细胞进行放射诱导,分次照射,累积吸收剂量为60 Gy。经细胞克隆筛选、建株。进行形态学和细胞超微结构观察,同时测定细胞生长特性以及放射敏感性变化与亲本HepG2细胞进行比较,并观察2 Gy照射后细胞内放射相关抗拒基因mRNA表达水平的变化,对该细胞亚株进行鉴定,定名为HepG2/R60细胞亚株。结果 通过2 Gy×30次分割照射诱导,成功建立HepG2/R60细胞亚株。细胞鉴定结果显示,与亲本HepG2细胞比较,细胞形态不规则,伪足伸展,折光度清晰,细胞间连接较为松散。透射电镜观察HepG2/R60细胞表面微绒毛明显增多,线粒体丰富,高尔基体发达。细胞生长延缓,倍增时间明显延迟为34.9 h,与HepG2细胞比较,放射敏感性显著降低,放射相关抗拒基因表达明显升高。结论 成功建立具有放射耐受性的人肝癌细胞亚株:HepG2/R60。经鉴定与其亲本的HepG2细胞比较,其放射敏感性显著降低。     

脐血单核细胞向破骨细胞诱导分化的实验研究

目的　脐血单核细胞向破骨细胞诱导分化的可行性研究。方法　分离脐血中单核细胞经1×10 -8mol/L 1,2 5 (OH) 2 D3 诱导培养,采用倒置相差显微镜观察细胞形态变化、组化染色和吸收陷窝观察技术分析细胞的抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistantacidphosphatase ,TRAP)表达和骨吸收活性。结果　脐血单核细胞在1,2 5 (OH) 2 D3 作用下分化加速,表现为长梭形和类圆形细胞的增多、增大,体外诱导培养13d ,有多核TRAP阳性细胞产生,但未表现出骨吸收功能。结论　脐血单核细胞经1,2 5 (OH) 2 D3 体外诱导培养后可表现骨细胞的早期特征。     

Rad51的异常表达与肿瘤治疗

DNA修复相关蛋白Rad51是真核细胞进行同源重组修复的关键酶。在肿瘤细胞中Rad51基因可出现异常表达,引起重组修复失控,基因组不稳定,因此与肿瘤的发生、发展密切相关。同时Rad51蛋白水平在肿瘤细胞中的升高,可导致肿瘤对放化疗产生抵抗作用。以Rad51为肿瘤治疗靶点,降低其在肿瘤细胞中的表达水平,可提高细胞对放化疗的敏感性,这一思路有可能发展为新的肿瘤治疗手段。     

BSO增强MRP过表达肺癌细胞对顺铂敏感性的作用机制研究

目的：评价使用丁胱亚磺酰亚胺(BSO)克服肿瘤细胞由于高表达MRP而引起对顺铂耐药的可行性，并初步探讨其增敏的作用机制。方法：用基因转染的方法成功建立了一株mrp基因高表达的肺癌细胞株(SPC-A-1／MRP)的基础上，检测BSO作用前后转染细胞对顺铂敏感性的差异，从酶活性测定和转录水平观察了上述过程中谷胱甘肽解毒系统的变化。结果：实验表明同对照(转染不含目的基因的空载质粒)的SPC-A-1／MRP(一)细胞相比，SPC-A-1／MRP细胞对顺铂出现了明显的耐受，BSO可以有效增强MRP高表达的细胞对顺铂的敏感性。BSO通过显著抑制由顺铂引起的肿瘤细胞内GSH解毒系统的活化和MRP蛋白含量升高，有效的克服了肿瘤细胞接触顺铂后过表达MRP而引起的化疗耐受。结论：高表达MRP可以引起肿瘤细胞对顺铂的耐受，BSO针对MRP介导的顺铂耐药有很好的增敏效果。     

尼莫地平对体外培养成骨细胞的影响

目的 :观察尼莫地平对体外培养成骨细胞的影响。方法 :在新生SD大鼠头颅骨第 2继代成骨细胞 (OB2 )培养液中分别加入不同浓度 (10 - 1～10 - 9g·L- 1)尼莫地平 ,分别观察OB2 的增殖功能(用波长 5 70nm处OD值表示 ) ,分化功能 [用碱性磷酸酶 (ALP)活性表示 ]和矿化功能 (用每视野矿化结节数量表示 )。结果 :增殖功能OD值为 0 .12 1±s 0 .0 0 9～ 0 .41±s 0 .0 4(P <0 .0 5 ,P <0 .0 1) ;ALP活性为 (0 .0 92± 0 .0 0 8)U·mg- 1Pro(P <0 .0 5 ) ;每视野矿化结节数量为 (1.3± 0 .9)个 (P <0 .0 1)。结论 :尼莫地平不同浓度对OB2 的增殖、分化和矿化功能作用各异 ,当尼莫地平浓度为 10 - 6 g·L- 1时 ,对OB2 的增殖和分化功能具有刺激作用 ,对OB2 的矿化功能具有显著的抑制作用。     

γ射线照射后乏氧诱导因子1α对肝癌细胞存活的影响

目的 研究辐射对肝癌细胞内乏氧诱导因子1α(HIF-1α)的调节作用以及HIF-1α的变化对肝癌细胞存活的影响。方法 采用CoCl₂化学模拟乏氧预处理人肝癌HepG2细胞,经不同剂量的γ射线照射后,通过细胞集落形成实验,比较有氧及化学模拟乏氧条件下细胞存活水平的差异。同时采用RT-PCR和Western blot方法检测照射后细胞内HIF-1α在转录和翻译水平上的变化。结果 在化学模拟乏氧条件下,细胞存活分数(SF)显著增加,与有氧对照组比较差异有统计学意义,且两种不同作用条件下的SF比值(SF_CO/SF_O2)随照射剂量逐渐增加,同时,经照射后细胞内的HIF-1α表达升高,并呈剂量依赖模式,HIF-1α的表达与照射后的细胞存活水平具有较强的关联性。结论 辐射可诱导肝癌细胞内HIF-1α的表达升高,HIF-1α的表达变化可能影响细胞的存活水平。     

整合素介导的细胞信号转导与肿瘤辐射敏感性

整合素作为重要的细胞黏附分子,可介导细胞的信号转导,在细胞的黏附、迁移、增殖、分化等生长活动中发挥重要作用。同时,在电离辐射条件下,整合素介导的细胞信号转导可在肿瘤细胞内激活多种蛋白激酶,启动不同的信号通路,调控基因表达,维持肿瘤细胞的存活,降低肿瘤的辐射敏感性。因此,深入了解整合素及其所介导的细胞信号转导途径,有利于新型辐射增敏剂的研究,对肿瘤治疗具有积极意义。